心肌型脂肪酸结合蛋白在急性心肌梗死早期诊断中的应用

目的　评定脂肪酸结合蛋白 (H FABP)在急性心肌梗死 (AMI)早期诊断中的应用。　方法　采用自行开发的H FABP酶联免疫吸附试验一步夹心法对 12 6名健康体检者和 5 3例AMI患者血清H FABP进行检测 ,同时测定肌红蛋白 (MYO)、肌酸激酶同工酶 (CK MB)、肌钙蛋白I(cTnI) ,并对AMI进行动态观察 ,对早期诊断的敏感性、特异性、时效性等进行分析。　结果　H FABP在AMI后 (1 84± 0 6 4 )h血浆浓度即开始升高 ,比CK MB、cTnI早 (P <0 0 1) ;时间浓度动态曲线与MYO相似 ,与CK MB、cTnI相比曲线前移。AMI后 2h的敏感性和特异性分别为 76 4 7%、80 4 1% ;4h的敏感性和特异性分别为 89 16 %、91 2 6 %。　结论　AMI后 2、4hH FABP检测对AMI早期诊断具有较高的敏感性和特异性 ,可望成为重要的早期和排除诊断的血清心肌标志物的手段之一。     

白细胞介素-1β和白细胞介素-6对妊娠相关血浆蛋白-A表达的影响

目的探讨炎性因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对人冠状动脉平滑肌细胞(human coronary artery smooth muscle cell,HCASMC)表达妊娠相关血浆蛋白-A(pregnancy-associated plasma pro-tein-A,PAPP-A)的影响。方法应用20μg/L的IL-1β、10μg/L的IL-6各自刺激HCASMC,共同培养0、2、4、8、243、6 h后收集细胞。应用不同浓度的IL-1β(0、5、20、40μg/L)I、L-6(0、5、10、50μg/L)刺激HCASMC,共同培养6 h后收集细胞。应用实时定量聚合酶链反应的方法检测细胞内PAPP-A基因的表达量。结果在同剂量IL-1βI、L-6刺激下,PAPP-A的表达量在2 h时就开始发生上调,8 h达高峰,而后开始下降;在不同剂量IL-1βI、L-6刺激下,PAPP-A的表达量在实验剂量范围内随着剂量的加大呈上升趋势(IL-1β:r=0.972,P=0.000;IL-6:r=0.941,P=0.000)。结论炎性因子IL-1βI、L-6能促进HCASMC中斑块稳定相关标记物PAPP-A的表达,可能是炎症在急性冠状动脉综合征发生发展中的重要作用机制之一。     

白介素-6对人冠脉平滑肌细胞表达妊娠相关血浆蛋白-A的影响

目的探讨炎症因子白介素-6(IL-6)对人冠脉平滑肌细胞表达妊娠相关血浆蛋白A的影响。方法实验于2005年5月至2006年8月在解放军305医院老年病中心实验室完成。人冠脉平滑肌细胞37℃、5%CO2条件下常规培养。实验用5~7代的细胞,按2.5×105/mL密度接种于25cm2的培养瓶中,24h后换液,生长接近80%融合时进行如下处理:(1)应用质量浓度为10ng.mL-1的IL-6刺激人冠脉平滑肌细胞,分别在共同培养0,2,4,8,24,36h后收集细胞。(2)应用不同质量浓度的IL-6(0,5,10,50ng.mL-1)刺激人冠脉平滑肌细胞,共同培养6h后收集细胞。应用实时荧光定量聚合酶链反应的方法检测细胞内妊娠相关血浆蛋白A基因的表达量。应用SPSS10.0软件进行统计学描述与分析,所得数据用x-±s表示,多组间比较用onewayANOVA检验,两两比较应用SNK法检验,并进行pearson相关分析,P<0.05为差异有显著性意义。结果同剂量白介素-6刺激下,妊娠相关血浆蛋白A的表达量在2h时就开始发生上调,8h达高峰,而后开始下降;在不同剂量白介素-6刺激下,妊娠相关血浆蛋白A的表达量在实验剂量范围内随着白介素-6的剂量加大呈上升趋势。除5ng.mL-1和10ng.mL-1组之间差异无显著性意义(P=0.065),其余组间差异均有显著性意义(P<0.05)。结论炎症因子白介素-6能促进冠脉平滑肌细胞中斑块稳定相关标志物妊娠相关血浆蛋白A的表达,可能是炎症在急性冠脉综合征的发生发展中起重要作用的机制之一。     

改良液氮冻伤法建立易损动脉粥样硬化斑块模型

目的建立改良液氮冻伤法制作动脉粥样硬化(AS)易损斑块(VP)模型,验证改良法是否优于传统的造模方法。方法雄性新西兰白兔24只随机分为改良方法组(A组)和传统方法组(B组)各12只。分别按照改良方法及传统方法造模,6 w末各组随机抽取4只兔子(A1组=4只,B1组=4只)检测斑块形成状况。A组6 w末、B组10 w末剩余兔子(A2组=8只,B2组=8只)以液氮激发斑块破裂。激发48 h后取出右颈总动脉行HE染色及免疫组化检测斑块内基质金属蛋白(MMP)-1水平。不同时间点分别采集空腹静脉血检测兔血脂水平总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)及低密度脂蛋白(LDL)及血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。结果高脂3 d后兔血脂水平已明显升高,1 w后达基础水平的4¹5倍;血脂变化曲线可见第1周血脂上升最为明显。与基线水平相比,高脂喂养1 w后两组兔血清hs-CRP即明显升高,至激发前进一步升高,激发后hs-CRP较激发前明显升高;各时间点两组间比较无显著性差异。大体观察及HE染色可见6 w末A1组兔已形成明显的AS化斑块,而B1组兔斑块较小;激发后48 h两组兔子的右颈总动脉均可见AS表面内皮损伤,部分形成血栓;两组易损斑块在组织结构上无明显差异,免疫组化染色见两组斑块处均有MMP-1蛋白的大量表达。结论改良液氮冻伤法可构建易损/破裂粥样硬化斑块,较传统方法明显缩短成模时间,节约造模成本,更快速,更高效。     

IL-1β对人冠状动脉平滑肌细胞妊娠相关血浆蛋白A分泌的影响

目的探讨IL-1β对人冠状动脉平滑肌细胞（HCASMC）分泌妊娠相关血浆蛋白A（PAPP-A）的影响。方法培养HCASMC,至第5～7代时,分别加入20μg/L和0μg/L的IL-1β（0μg/L组为对照组）,分别孵育2、4、8、24、36 h后,收集细胞培养上清液;采用IL-1β（0、5、20、4μg/L）刺激HCASMC 6 h后分别收集细胞和细胞培养上清液。用ELISA法检测细胞培养上清液内PAPP-A的表达量。结果IL-1β组PAPP-A表达量在2 h时开始增加,8、24和36 h时其浓度显著高于对照组（P均〈0.05）;随着IL-1β剂量增加,PAPP-A的表达量不断升高,其中20μg/L和40μg/L组的浓度均显著高于0μg/L组的浓度（P均〈0.05）。结论IL-1β可使HCASMC分泌PAPP-A增加,并呈时间和剂量依赖性。     

白细胞介素-6对人冠脉平滑肌细胞妊娠相关血浆蛋白A分泌的影响

目的 研究炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对人冠状动脉平滑肌细胞(human coronary artery smooth muscle cell,HCASMC)分泌妊娠相关血浆蛋白A(pregnancy-associated plasma protein-A,PAPP-A)的影响.方法 一期:培养HCASMC,至第5～7代时,分别加入10 μg/L和0 μg/L的IL-6,0 μg/L组设为对照组,均分别孵育2,4,8,24,36 h后,收集细胞培养液上清.二期:采用不同浓度的IL-6(0,5,10,50 μg/L)(0 μg/L组设为对照组)刺激HCASMC 6 h后分别收集细胞和细胞培养液上清.应用酶联接免疫吸附剂测定(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)方法检测细胞培养液上清内PAPP-A的表达量.结果 一期,PAPP-A的表达量在2 h时开始增加,4,8,24 h和36 h组浓度显著高于对照组(4 h:P=0.008;8 h:P=0.007;24 h:P=0.023;36 h:P=0.017),并随时间的延长而不断增加;二期,在实验剂量范围内,随IL-6剂量增加,PAPP-A的表达量不断升高,其中10 μg/L和50 μg/L组均显著高于对照组(10 μg/L:P=0.015;50 μg/L:P＜0.001).结论 IL-6可使HCASMC表达不稳定斑块标记物PAPP-A的升高,说明炎症可能是急性冠状动脉综合征(acute coronary syndromes,ACS)发生发展的机制之一.     

PAPP-A、IGF-Ⅰ在非ST段抬高的急性冠脉综合征患者中的临床意义

目的探讨非ST段抬高的急性冠脉综合征（Non-ST elevation acute coronary syndromes，NSTEACS）患者血清妊娠相关血浆蛋白A（pregnancy associated plasma-A，PAPP-A）及胰岛素样生长因子I（insulin-like growth factor-1，IGF-I）浓度变化的临床意义。方法选择最终以出院诊断为标准NSTEACS患者65例，冠脉造影证实的稳定型心绞痛（stable angina pectoris，SAP）患者28例，正常对照30例。入院后12h内均抽取静脉血5ml，测定IGF-I、PAPP-A及C反应蛋白（C-reactive protein，CRP），常规测定肌钙蛋白T（cTnT）、血脂、血糖等，各组间进行比较并进行相关性分析。结果NSTEACS患者的PAPP-A、IGF-I、CRP明显高于SAP组和对照组（P〈0．01），IGF-I在SAP组明显低于对照组（P〈0．01），而PAPP-A、CRP在SAP与对照组中无显著差异（P〉0．05）。在NSTEMI组中PAPP-A与IGF-I呈正相关，PAPP-A、IGF-I与CRP均呈正相关，而与cTnT无明显相关性。结论PAPP-A、IGF-I对NSTEACS具有一定的诊断、预测价值。     

IL-6对人冠脉平滑肌细胞中PAPP-A、MMP-3、TIMP-1基因表达的影响

目的探讨细胞因子白介素6(IL-6)对人冠脉平滑肌细胞中妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)、金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP-1)基因表达的影响。方法应用10μg/L的IL-6刺激人冠脉平滑肌细胞,共同培养0,2,4,8,24,36h后收集细胞。应用不同浓度IL-6(0,5,10,50μg/L)刺激人冠脉平滑肌细胞,共同培养6h后收集细胞。应用实时定量PCR方法检测细胞内PAPP-A,MMP-3,TIMP-1基因表达量。结果在IL-6刺激下,PAPP-A、MMP-3表达量在2h时就开始发生上调,8h左右达高峰,而后开始下降;在不同浓度IL-6刺激下,PAPP-A,MMP-3表达量随着细胞因子浓度加大呈上升趋势。TIMP-1在IL-6刺激下,表达量在2h时就开始发生下调,4h左右达最低,而后开始上升;在不同浓度的IL-6刺激下,TIMP-1表达量随着细胞因子浓度加大呈下降趋势。结论炎性因子IL-6对冠脉平滑肌细胞中斑块稳定相关标记物PAPP-A、MMP-3、TIMP-1表达的影响,可能是炎症在急性冠脉综合征发生发展中作用机制之一。     

冠状动脉粥样硬化斑块稳定性与超敏C反应蛋白和妊娠相关血浆蛋白A及基质金属蛋白酶组织抑制剂1表达的关系

目的:探讨冠心病患者血清非特异性炎性因子高敏C-反应蛋白、动脉粥样硬化稳定斑块中的妊娠相关血浆蛋白A及参与斑块破裂活动的基质金属蛋白酶3与冠状动脉粥样硬化斑块稳定性的关系。方法:选择2003-10/2004-03在解放军总医院住院治疗的70例冠心病患者为冠心病组,其中稳定心绞痛12例,不稳定心绞痛20例,发病6h内急性心肌梗死38例。对照组20人为健康体检者。均清晨空腹采肘静脉血5mL,离心分离血清后分为2份置-80℃,检测冠心病组和对照组的外周血血清高敏C反应蛋白、妊娠相关血浆蛋白A、基质金属蛋白酶3水平并进行相关性分析。结果:冠心病组70例及对照组20名均进入结果分析。①妊娠相关血浆蛋白A浓度比较:对照组低于稳定心绞痛组犤(0.7,1.1)mIU/L,(P<0.05)犦。②血清高敏C反应蛋白浓度比较:对照组明显低于不稳定心绞痛组犤(2.0,6.0)mg/L,(P<0.01)犦。③基质金属蛋白酶-3浓度比较:对照组明显低于急性心肌梗死组犤(48.5,63.6)ng/L,(P<0.01)犦。④冠心病患者3种不同类型的3项指标相关分析显示:血清高敏C反应蛋白水平与基质金属蛋白酶-3水平无相关性(r=0.099,P=0.539),与妊娠相关血浆蛋白A水平无相关性(r=0.017,P=0.210),血清基质金属蛋白酶3水平与妊娠相关血浆蛋白A水平有显著相关性(r=0.250,P=0.046)。结论:冠心病的发生与血清高敏C反应蛋白、妊娠相关血浆蛋白A、基质金属蛋白酶-3水平的变化相关联,而动脉粥样硬化斑块的不稳定只与妊娠相关血浆蛋白A及基质金属蛋白酶-3相关。     

2型糖尿病患者血清超氧化物歧化酶与颈动脉内中膜厚度的相关性

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清超氧化物歧化酶(SOD)水平与颈动脉内膜中层厚度(CIMT)的关系。方法收集T2DM住院患者共165例,根据CIMT值分为内膜正常组59例,增厚组51例,斑块组55例,记录3组患者的年龄、性别、糖尿病病程、吸烟史、高血压史、体质量指数(BMI)、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血脂、血清超氧化物歧化酶(SOD)水平,并进行统计学分析。结果正常组血清SOD水平[(158.51±12.02)U/mL]及增厚组血清SOD水平[(152.00±15.04)U/mL]较斑块组[(145.24±10.30)U/mL]增高,且增厚组血清SOD水平高于斑块组,差异有统计学意义(P0.05)。Spearman相关分析显示,血清SOD水平与年龄、低密度脂蛋白(LDL)和CIMT呈负相关(r=-0.26、-0.16、-0.32,P0.05)。Logistic回归分析显示,血清SOD是T2DM患者颈动脉粥样硬化保护因素(OR=0.938,P=0.003)。血清SOD诊断T2DM患者颈动脉病变的受试者工作特征曲线(ROC曲线)曲线下面积为0.717[95%CI(0.638,0.797)],最佳截断点为159.9U/mL,灵敏度为79.2%,特异度为52.5%,阳性预测值为74.5%,阴性预测值为60.8%。结论 T2DM患者血清SOD水平随颈动脉动粥样硬化病变程度加重而降低,是CIMT增厚的保护因素,同时对合并颈动脉病变早期筛查提供一定的指导价值。