基于唾液酸酶和岩藻糖转移酶的抗体—细胞偶联物构建

目的 通过基于唾液酸酶和岩藻糖转移酶的糖链工程将曲妥珠单抗高密度偶联到人外周血白血病T细胞Jurkat细胞,并评价偶联细胞对HER2+靶细胞的识别活性。方法 首先通过凝集素染色和流式细胞术探究去唾液酸化对细胞上α-1,3FucT催化的岩藻糖编辑效率的影响。然后制备含有叠氮标签的曲妥珠单抗,与GDP-炔基岩藻糖通过生物正交反应构建GDP-岩藻糖-抗体偶联物。再利用α-1,3FucT将GDP-岩藻糖-抗体偶联物转移至唾液酸酶处理过的细胞表面,构建抗体-细胞偶联物,并通过流式细胞术和共聚焦成像验证。最后通过荧光成像观察抗体-细胞偶联物对靶细胞SK-BR-3细胞的识别。结果 细胞表面糖链的末端α-2,6唾液酸切除后能够显著提升α-1,3FucT催化的岩藻糖编辑的效率,成功制备GDP-岩藻糖-抗体偶联物并转移至细胞表面得到曲妥珠单抗-Jurkat偶联物,去唾液酸化显著增加了Jurkat细胞偶联曲妥珠单抗的容量,构建的曲妥珠单抗-Jurkat偶联物具备HER2+细胞靶向性。结论 细胞糖链工程可实现细胞偶联分子容量的调节,应用于抗体对免疫细胞的功能化,也为构建海洋糖类活性化合物偶联细胞提供了新的思路...     

内镜经鼻蝶入路手术治疗不同Knosp分级垂体瘤的疗效分析

目的探讨内镜经鼻蝶扩大入路手术治疗不同Knosp分级垂体瘤的临床疗效。方法回顾性分析徐州医科大学附属医院神经外科自2016年9月—2018年2月,应用内镜经鼻蝶扩大入路手术治疗92例不同Knosp分级垂体瘤患者的临床资料;比较不同Knosp分级患者的垂体瘤切除程度及并发症发生率及功能型垂体瘤患者激素水平缓解情况。结果本组患者中全切者69例,近全切患者17例,次全切患者5例,部分切除患者1例; Knosp分级0～2级垂体瘤患者的全切率(90. 5%)明显高于Knosp分级3～4级患者(41. 4%),差异具有统计学意义(P 0. 05)。Knosp分级0～2级患者的手术并发症发生率明显低于3～4级患者; Knosp分级0～2级和3～4级功能型垂体瘤患者的术后激素水平总的治愈率无明显差异。结论内镜经鼻蝶扩大入路治疗不同Knosp分级垂体瘤是一种安全、有效的手术方法,尤其是对于Knosp分级0～2级的患者。     

2016—2018年天津市第一中心医院感染性疾病病原菌的分布及耐药性分析

目的 探究2016—2018年天津市第一中心医院感染性疾病病原菌的分布及耐药性分析。方法 分析2016年1月—2018年10月天津市第一中心医院524例感染性疾病患者,进行病原菌检测、鉴定以及药敏试验,统计并记录病原菌的分布以及各病原菌的耐药性。结果 524例感染性疾病患者检出病原菌503株,革兰阴性菌311株（61.83%）,革兰阳性菌153株（30.42%）,真菌31株（6.16%）,其他8株（1.59%）;革兰阴性菌主要为鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌,分别有102株（20.28%）、65株（12.92%）、47株（9.34%）,革兰阳性菌以金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌为主,分别有54株（10.74%）、32株（6.36%）,真菌以热带假丝酵母菌和白色假丝酵母菌为主,分别有13株（2.58%）、11株（2.19%）;大肠埃希菌对头孢西丁、头孢他啶、妥布霉素、头孢噻肟的耐药率较高,对头孢哌酮、头孢吡肟、美罗培南、氨曲南的耐药率低于10%,鲍曼不动杆菌对氨苄西林、左氧氟沙星、氨曲南、庆大霉素的耐药率高于50%,对头孢吡肟、阿米卡星、头孢哌酮的耐药率低于10%;肺炎克雷伯菌对头孢他啶、氨苄西林、妥布霉素、头孢噻肟、头孢西丁、氨曲南的耐药率高于50%,对阿米卡星、美罗培南、头孢哌酮的耐药率低于10%;金黄色葡萄球菌对苯唑西林、左氧氟沙星、四环素、青霉素G、复方新诺明的耐药率高于50%,对环丙沙星、利奈唑胺、红霉素、万古霉素、替加环素的耐药率低于10%,肺炎链球菌对环丙沙星、庆大霉素、青霉素G、四环素的耐药率高于50%,对红霉素、复方新诺明、万古霉素、替加环素的耐药率低于10%。结论 2016—2018年天津市第一中心医院感染性疾病患者病原菌主要为革兰阴性菌,且主要病原菌耐药性较高,临床医师应该对感染性疾病患者进行病原菌检测并选择种类合理的抗生素进行治疗。     

虾青素在小鼠肾脏缺血再灌注损伤方面的保护作用

目的:探讨虾青素(ATX)在小鼠肾脏缺血再灌注(IR)损伤方面的保护作用。方法:将雄性ICR小鼠随机分为4组:假手术组1(Sham)、假手术组2(Sham+ATX)、手术组1(IR)、手术组2(IR+ATX)。用灌胃法分别管饲等量ATX(5 mg·kg-1·d-1)和橄榄油2周,左肾蒂夹闭50 min诱导IR损伤。收集24 h后血清标本及肾脏组织。比较各组间血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr),肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化产物丙二醇(MDA)含量及肾脏的组织病理学评分。结果:IR+ATX组血清BUN、Cr较IR组显著下降(P<0.05),SOD较IR组明显升高(P<0.05),MDA较IR组明显降低(P<0.05);肾脏组织病理学评分IR+ATX组较IR组显著降低(P<0.05)。结论:ATX对肾功能及肾脏组织具有保护作用。     

碱提灵芝多糖的分离纯化、结构表征及免疫活性评价

目的从赤芝Ganoderma lucidum中提取、分离和纯化获得碱提多糖组分,在表征其基本理化性质和精细结构的基础上,对其体外免疫调节活性进行研究。方法赤芝子实体干燥粉碎后,利用碱提醇沉法提取粗多糖,经Q-Sepharose Fast Flow离子交换色谱柱纯化得到灵芝多糖组分(LZJ-0.15)。采用PMP柱前衍生-高效液相色谱法(HPLC)及高效凝胶渗透色谱-十八角度激光光散射联用法(HPGPC-MALLS)测定LZJ-0.15的单糖组成及相对分子质量特征,并通过核磁共振氢谱(1H-NMR)、碳谱(13C-NMR)及二维谱(1H-1H COSY和1H-13C HSQC)对LZJ-0.15的精细结构进行表征。采用小鼠巨噬细胞RAW264.7吞噬中性红实验对灵芝多糖LZJ-0.15进行免疫活性评价。结果 LZJ-0.15的相对分子质量、分子半径及Mw/Mn分别为24 700、46.6 nm和1.019,其单糖组成分析显示以葡萄糖为主(92.3%),核磁谱图显示LZJ-0.15为→3)Glc(β1→及→6)Glc(β1→连接为主的葡聚糖。RAW264.7细胞吞噬中性红实验显示LZJ-0.15具有较好的免疫调节活性。结论赤芝碱提灵芝多糖相较于水提多糖组分具有较优的免疫活性,有望开发成重要的免疫调节剂。     

膀胱脐尿管瘘1例

1临床资料患者男,9岁,出生后即发现脐部不断流出少量淡黄色液体,于2004年6月14日入院。查体:心肺无异常。腹平软,未触及包块,脐部较大,隆起,直径约2cm,中央凹陷发红并见一小孔,内有淡黄色液体溢出,考虑为尿液。血常规血红蛋白120g/L,白细胞5.9×109/L。尿常规未见异常。尿素氮5.04mmol/L,肌酐91.32mmol/L。B超提示右肾结石,右肾上盏积水,膀胱未见异常。从脐部瘘口处插入细管并注入76%泛影葡胺10ml,见对比剂沿脐部瘘管流入膀胱内,考虑脐尿管完全未闭。于2004年6月22日在氯胺酮静脉分离麻醉下手术,将脐、脐尿管及部分膀胱壁袖状切除送检,术…     

一次性单向阀硅胶负压吸引球在胆囊切除术中的应用

目的　探讨一次性单向阀硅胶负压吸引球在胆囊切除术中的作用。方法　分析 134例胆囊切除术患者使用一次性单向阀硅胶负压吸引球的结果。结果　共进行 134例胆囊切除术 ,其中11例同时进行胆总管探查术。所有患者均于术毕于温氏孔置该引流管 ,从手术切口引出体外 ,平均放置时间 5 2h ,平均总引流量 83ml,切口愈合时间平均 8d ,无引流并发症。结论　一次性单向阀硅胶负压吸引球具有无菌、无毒 ,使用方便 ,不易堵塞等特点 ,非常适合应用于胆囊切除术后引流     

海洋细胞毒药物与抗体偶联物的制备及生物活性评价

目的 以抗体N-糖链为偶联位点,制备曲妥珠单抗与海洋细胞毒药物单甲基澳瑞他汀E(MMAE)偶联物,并研究其对乳腺癌细胞BT474的杀伤作用。 方法 合成含叠氮和炔基修饰的唾液酸化寡糖,采用化学酶法制备含叠氮或炔基修饰的曲妥珠单抗,利用生物正交反应分别制备相应的抗体药物偶联物。利用SDS-PAGE 对转糖基及偶联过程进行监测,表面等离子共振技术(SPR)对叠氮或炔基修饰前后抗体与FcγRIIIa亲和力进行检测。利用CCK-8法评价两种抗体药物偶联物对乳腺癌细胞株BT474的杀伤作用。结果 成功制备了含叠氮或炔基修饰的曲妥珠单抗及N-糖链糖基位点抗体药物偶联物,修饰抗体与FcγRIIIa的亲和力较曲妥珠单抗增加,相比曲妥珠单抗,两种抗体MMAE偶联物对BT474有更明显的生长抑制作用。结论 基于抗体糖链末端唾液酸位点偶联的方法可有效应用于海洋细胞毒抗体偶联药物的开发。     

血透机的日常维护与保养

浅谈血透机的日常维护与保养     

大脑皮层体感Ⅱ区对中缝大核下行痛抑制活动的调控及其与电针镇痛的关系

用玻璃微电极细胞外记录大鼠(NRM)神经元单位放电及其对尾尖伤害性刺激的反应,研究表明刺激 SmⅡ可增加 NRM 神经元的自发放电,抑制其伤害性反应;与电针对 NRM 的效应相似,发现两者具有相关性。提示:SmⅡ对 NRM 镇痛机制可以发挥下行性调控,电针对 NRM 的影响可能部分是经激活 SmⅡ,再转而作用于 NRM 的。