沉默Icmt基因对舌鳞癌CAL-27和SCC-4细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的 探讨异戊二烯基半胱氨酸羧基甲基转移酶（isoprenylcysteine carboxyl methyltransferase,Icmt）对舌鳞癌CAL-27和SCC-4细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响及其相关机制。方法 针对人Icmt基因序列设计并构建3条小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）,采用脂质体载体瞬时转染Icmt-siRNA抑制舌鳞癌CAL-27和SCC-4细胞Icmt表达,将实验组分为Icmt-siRNA-1组、Icmt-siRNA-2组、Icmt-siRNA-3组;同时将脂质体转染NC-siRNA作为阴性对照组,只加转染试剂作为空白对照组。采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和蛋白质免疫印记法（Western blot）检测转染后各组细胞Icmt、K-Ras的mRNA和蛋白表达及K-Ras膜蛋白的表达;Western免疫印迹检测Cyclin D1、p21、Akt、p-Akt蛋白表达;细胞增殖活性检测试剂盒和流式细胞术检测细胞的增殖活性、周期变化和凋亡能力。应用GraphPad Prism 8.2.1 软件对实验数据进行统计学分析。结果 qRT-PCR和Western 免疫印迹检测结果显示,与对照组相比,实验组Icmt mRNA和蛋白表达显著下降（P<0.05）,K-Ras mRNA和蛋白表达无显著差异（P>0.05）,K-Ras膜蛋白表达显著下降（P<0.05）;周期相关蛋白Cyclin D1表达显著下调,p21表达显著上调（P<0.05）;Ras/PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白Akt表达无统计学差异（P>0.05）,但p-Akt表达显著下降（P<0.05）。细胞增殖活性检测结果表明,与对照组相比,实验组细胞增殖能力显著下降（P<0.05）;流式细胞术检测结果表明,实验组细胞凋亡水平较对照组显著增加,细胞周期被阻滞在G1/S期（P<0.05）。结论 体外沉默Icmt基因可有效抑制CAL-27和SCC-4细胞增殖且诱导凋亡,其作用可能是通过影响K-Ras膜蛋白靶向膜定位,负性调控细胞周期和下调Ras/PI3K/Akt/mTOR信号通路而实现。     

前臂游离皮瓣修复舌癌术后组织缺损的语音效果评价

目的：初步探讨前臂游离皮瓣修复舌癌术后组织缺损后患者语音清晰度的改善状况。方法回顾性分析39例舌癌患者,其中24例采取前臂游离皮瓣修复并且皮瓣全部成活,15例采取直线拉拢缝合。术后6个月之后开始对舌体形态及功能进行评估,检查舌体的运动度并以“普通话测试表”对患者术后的语音清晰度进行主观评价。结果两组患者的原发灶愈合良好,进食及语言功能均有恢复,其中前臂游离皮瓣修复组与直接拉拢缝合组的舌体前伸及上抬差异无显著性(P>0.05);两组的术后语音清晰度比较差异有显著性(P<0.05),前臂游离皮瓣修复组患者的语音清晰度高于直接拉拢缝合组。结论应用前臂游离皮瓣修复舌癌术后组织缺损可有效改善患者的术后语音功能。     

功能部位深度烧伤患者的综合康复治疗探讨

目的 探讨早期综合康复治疗对功能部位深度烧伤愈后疲痕增生及挛缩畸形的防治作用.方法 对2006年至2008年收治的功能部位深Ⅱ度以上烧伤患者169例,共计365个功能部位,采取早期切削痴中厚皮移植和复合皮(脱细胞异体真皮加自体表皮)移植,术后固定于伸直或功能位.7～10d逐渐开始康复功能训练,拆线后即行硅胶膜贴敷及弹力套加压治疗和康复功能锻炼.结果 169例患者共计365个功能部位用该方法获得了满意的治疗效果,功能及外形良好者达90%以上.结论 功能部位深度烧伤在伤后3～5d内行切削痴植皮手术,术后正确的固定和早期进行功能锻炼以及瘢痕增生的综合防治是保证各关节功能部位恢复良好的关键,综合康复措施应贯穿治疗的全过程.     

儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征上气道结构的MRI研究分析

目的利用磁共振成像（MRI）对儿童阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）的上气道结构进行测量分析,探讨儿童OSAHS上气道的结构特点。方法选择原发性鼾症组（Ps组）30例和OSAHS组30例,同时随机选择30例正常儿童作为对照组,应用MRI对上气道进行空间测量和软组织测量,结果进行统计学分析。结果①空间测量：3组儿童之间相比,鼻咽气道截面积、口咽气道截面积、腭咽气道截面积、气道斜径,比较差异有统计学意义（P〈0．05）;②软组织测量：舌体截面积3组之间差异无统计学意义（P〉0．05）;OSAHS组比Ps组及对照组腺样体截面积大、腺样体斜距长,比较有统计学意义（P〈0．05）;OSAHS组、Ps组比对照组扁桃体截面积大,比较有统计学意义（P〈0．05）。结论应用MRI可以判定OSAHS儿童上气道的狭窄情况,可作为诊断儿童OSAHS的重要辅助手段。     

体外沉默Rce1对舌鳞状细胞癌细胞侵袭和迁移能力的影响

目的 通过RNA干扰技术沉默Rce1基因,探讨Rce1对舌癌细胞侵袭和迁移能力的影响。方法 体外培养舌鳞状细胞癌Cal-27和SCC-4细胞,设计合成Rce1基因的小干扰RNA（siRNA）,采用脂质体载体瞬时转染沉默Rce1基因。根据转染的siRNA不同,将实验组分为Rce1-siRNA-1组、Rce1-siRNA-2组、Rce1-siRNA-3组,脂质体载体分别转染相对应序列的siRNA。脂质体转染siCON作为阴性对照组,不转染siRNA作为空白对照组。采用实时定量聚合酶链反应检测各组Rce1、RhoA以及K-Ras基因的表达,蛋白质印迹法（Western blot）检测Rce1、RhoA、K-Ras、金属基质蛋白酶（MMP）-2及MMP-9的表达,采用体外侵袭实验检测Cal-27和SCC-4的侵袭能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果 实时定量聚合酶链反应及Western blot检测结果显示,与阴性对照组和空白对照组相比,实验组的Rce1基因及蛋白表达均下调（P<0.05）,RhoA、K-Ras基因及蛋白表达无统计学差异（P>0.05）,MMP-2、MMP-9表达下降（P<0.05）。体外侵袭实验表明,与对照组相比,实验组在聚碳酯膜上的细胞总数明显减少（P<0.05）。细胞划痕实验表明,实验组划痕处细胞闭合时间明显长于对照组（P<0.05）。结论 体外沉默Rce1可以有效下调其在舌癌细胞Cal-27和SCC-4中的表达水平,降低迁移和侵袭能力。     

转录因子Snail促进结直肠癌细胞对奥沙利铂耐药的机制研究

目的 研究转录因子Snail促进结直肠癌细胞HCT116对奥沙利铂产生耐药性的分子机制.方法 采用MTT法分别检测过表达Snail蛋白和空载质粒的HCT116细胞对奥沙利铂的敏感性差别,以及RNA敲除-糖蛋白(P-gp,编码基因ABCB1)蛋白的HCT116细胞对奥沙利铂的敏感性的影响.实时定量PCR方法检测过表达Snail对耐药相关基因表达的影响.蛋白质免疫印迹技术Western blot检测过表达Snail对P-gp蛋白表达的影响.结果 过表达转录因子Snail可以明显促进结直肠癌细胞HCT116对奥沙利铂产生耐药性.实时定量PCR结果表明:过表达Snail明显提高了P-gp蛋白编码基因ABCB1的表达,而对其它耐药基因如ABCC1、ERCC1等没有明显影响.Western blot结果显示过表达Snail可以促进P-gp蛋白的表达.敲除P-gp蛋白可以明显提高HCT116细胞对于奥沙利铂的敏感性.结论 过表达Snail可以明显促进结直肠癌细胞HCT116对奥沙利铂的耐药性,其机制与Snail促进耐药蛋白P-gp的表达有关.     

局部用药预防下颌阻生第三磨牙干槽症的疗效分析

目的评价不同处理方法预防下颌阻生第三磨牙干槽症的临床效果。方法回顾性分析2016年12月至2019年3月在山东省青岛市市立医院口腔颌面外科拔除符合诊断标准416颗下颌阻生第三磨牙,按拔牙后处理方式共分为三组:A组142例,采用派丽奥明胶海绵填充拔牙窝;B组140例,用复方氯己定含漱液含漱;C组(对照组)134例,不予用药。分析三组拔牙术后干槽症发生情况的差异。结果A组干槽症的发生率为2.11%,B组为3.57%,对照组为9.70%;其中,A组干槽症发生率显著低于C组(P<0.0167),B组干槽症发生率低于C组,但差异无显著性(P>0.0167)。结论派丽奥明胶海绵是预防下颌阻生第三磨牙干槽症安全而有效的方法,可以明显降低术后干槽症发生率。     

腹主动脉阻断术用于控制腹盆腔大出血的临床应用

目的 探讨腹主动脉阻断术控制腹盆腔大出血的临床效果.方法 54例患者术中应用棉纱带暂时阻断腹主动脉控制出血.结果 54例患者术中出血均得到有效控制,手术均顺利完成.术后观察未发现因血管阻断而出现的各种并发症.结论 暂时性腹主动脉阻断术是迅速控制腹盆腔大出血的安全、有效方法.     

RAC1对人舌鳞癌CAL27细胞迁移、侵袭的影响

目的: 构建RAC1基因小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）,探讨RAC1对人舌鳞癌CAL27细胞侵袭、迁移的影响及其分子机制。 方法: 针对人RAC1基因设计并合成3条siRNA,通过脂质体介导转染进3组人舌鳞癌细胞CAL27中,以抑制RAC1的表达;同时设置阴性对照组（转染无关核苷酸序列）和空白对照组（未转染）,采用实时荧光定量PCR检测细胞中RAC1 mRNA的表达, Western 免疫印迹实验检测RAC1、PAK1、LIMK1蛋白的表达,通过划痕实验及Transwell细胞侵袭实验检测转染后细胞迁移和侵袭能力的变化。采用SPSS 18.0软件包对数据进行统计学分析。 结果: 细胞转染48 h后,与阴性对照组和空白对照组相比,RAC1干扰组细胞RAC1 mRNA和蛋白表达均显著下降（P<0.05）,PAK1、LIMK1蛋白表达显著下降（P<0.05）,细胞迁移和侵袭能力显著降低（P<0.05）。 结论: 沉默RAC1基因可抑制舌鳞癌CAL27细胞的侵袭和转移,其机制可能与细胞内PAK1、LIMK1的表达下调有关。     

手部复杂组织缺损的急诊显微外科修复探讨

目的关于将显微外科用于治疗手部复杂组织缺损患者所取得的临床疗效进行研究探讨。方法选取在我院进行治疗的66例手部复杂组织缺损患者,按照治疗方法的不同将其分为试验组与对照组,各33人。对照组患者采用常规治疗,试验组患者在进行常规治疗的同时运用显微外科修复治疗。观察并比较两组患者治疗后的临床疗效。结果两组患者经过一段时间治疗后,试验组总有效率（96.96%）明显高于对照组总有效率（63.63%）,具有统计学意义（P〈0.05）。结论对于手部复杂组织缺损的患者来说,使用急诊显微外科修复的效果好,使患者的受伤缺损的状况有了明显的改善,不良反应少,此方法治疗安全可靠,可广泛应用于临床,值得推广。