血府逐瘀胶囊对重度血瘀证患者经皮冠状动脉介入治疗术后氯吡格雷抵抗的调节作用

目的 观察血府逐瘀胶囊联合氯吡格雷治疗氯吡格雷抵抗患者的效果,评价其改善氯吡格雷抵抗作用的效果。方法 经皮冠状动脉介入治疗（PCI）术后氯吡格雷抵抗患者80人,随机分组,分别给予3种药物治疗方案：A组用国产氯吡格雷（泰嘉）加用血府逐瘀胶囊;B组使用进口氯吡格雷（波立维）;C组用国产氯吡格雷（泰嘉）加用西洛他唑,连续3个月,采用血栓弹力图法检测干预后血小板抑制率。并随访患者半年,观察临床不良事件的发生率。结果 治疗3个月后,各组抑制率均有所提高,且均有显著差异（P<0.05）。A组对血小板抑制的有效率达40%,优于C组（33.33%）,与B组相当（40.74%）。对阿司匹林、氯吡格雷均不敏感的患者换用进口波立维对提高血小板抑制效果更佳;仅对氯吡格雷不敏感的患者加用血府逐瘀胶囊对血小板抑制有协同作用。随访半年后发现,联合使用血府逐瘀胶囊的时间延长可能会增强血小板抑制的效果,但并不增加出血及凝血功能异常等风险。结论 血府逐瘀胶囊对提高血小板抑制率有一定的作用,同时对出血风险影响较小。     

原发性甲状腺功能减退症继发垂体增生伴高泌乳素血症

目的报告1例原发性甲状腺功能减退症继发垂体增生伴高泌乳素血症患者,探讨其组织形态学、免疫组织化学表型、诊断与鉴别诊断、治疗及预后等临床病理学特点。方法与结果女性患者,29岁,临床表现为月经失调1年,溢乳3个月,头痛1周。MRI提示垂体瘤可能性大。遂行经鼻蝶鞍区占位性病变探查术。组织学形态观察,部分腺泡细胞明显增生,呈局灶性结节状。免疫组织化学染色,增生的腺泡细胞弥漫性表达突触素、促甲状腺激素,部分表达催乳素,不表达甲状腺转录因子-1,淋巴细胞散在表达白细胞共同抗原,Ki-67抗原标记指数约1%。病理诊断为垂体增生,最终临床诊断为甲状腺功能减退症。持续服用左甲状腺素钠(优甲乐)100μg/d,随访13个月,一般状况良好。结论垂体增生诊断困难,明确诊断须依靠临床病史、组织学形态特征和免疫组织化学表型,应注意与垂体腺瘤尤其是垂体微腺瘤相鉴别。     

骨髓间充质干细胞移植对老年性痴呆大鼠空间学习记忆能力的影响

目的:研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对淀粉样蛋白-β1-40(Aβ1-40)诱导的老年性痴呆(Alzheimer’s disease,AD)模型大鼠行为学的影响,并探讨其治疗AD的可能机制。方法:采用向大鼠双侧海马立体定向注射Aβ1-40诱导AD动物模型,造模后3周采用同样方法移植骨髓间充质干细胞,采用Morris水迷宫观察大鼠行为学变化。造模后2个月处死大鼠,观察海马组织有无溴脱氧尿嘧啶核苷(Br-dU)+神经元特异性烯醇化酶(NSE)、BrdU+胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组织化学双染阳性细胞,并且观察从侧脑室到海马是否存在神经元前体细胞(NPs)的标志--双皮素(DCX)的吻侧迁移流。结果:模型组大鼠逃避潜伏期较对照组明显延长,移植治疗组大鼠逃避潜伏期较模型组缩短。移植组大鼠海马组织及其周围可见免疫组织化学双染阳性细胞,但未见从侧脑室到海马关于DCX的吻侧迁移流。结论:BMSCs移植能够改善AD大鼠空间学习记忆能力,提示BMSCs移植可能成为治疗AD大鼠的一种方法。     

杜虹花中木犀草素提取工艺研究

目的研究杜虹花中木犀草素提取工艺。方法采用正交试验进行优选,考察乙醇浓度、乙醇用量、提取时间等因素的影响,优化提取条件;采用高效液相色谱法测定木犀草素含量,来比较提取效果。结果最佳工艺为加入10倍量70%的乙醇提取3 h。结论该工艺稳定可行,可用于工业化大生产。     

立体定向移植骨髓间充质干细胞改善血管性大鼠的学习记忆能力

背景:大量的实验证明将骨髓间充质干细胞移植到复制的中枢神经系统疾病大鼠模型后,能迁移到损伤部位,表达神经细胞的潜在特性并且提高神经功能。目的:验证骨髓间充质干细胞对拟人类血管性痴呆模型大鼠学习记忆障碍的改善作用。方法:分离SD大鼠骨髓间充质干细胞,于细胞移植前掺入10mg/L的BrdU进行标记。建立Wistar大鼠血管性痴呆样学习记忆障碍动物模型,随机分为模型组、假手术组与移植组。移植组致伤后第14天,通过立体定向途径移植骨髓间充质干细胞到大鼠海马,假手术组给予等量生理盐水,模型组大鼠不做处理。采用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力。损伤后第90天处死大鼠,观察海马组织有无Brdu+神经元特异性烯醇化酶、Brdu+胶质纤维酸性蛋白免疫组织化学双染阳性细胞,并且观察从侧脑室到海马是否存在神经元前体细胞的标志Doublecortin(DCX)吻侧迁移流。结果与结论:①移植组大鼠采用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力逃避潜伏期及跨越平台次数优于模型组及假手术组(P<0.05)。②移植组大鼠海马组织及其周围可见免疫组织化学双染阳性细胞,但未见从侧脑室到海马关于神经元前体细胞的标志Doublecortin(DCX)吻侧迁移流。结果提示,骨髓间充质干细胞移植可以促进脑损伤大鼠的神经功能的恢复,其机制可能与移植细胞分化为神经元样和神经胶质细胞样细胞,并分泌或促进宿主分泌神经营养因子有关。     

中性甲醛液固定及固定时间对脑肿瘤Ki-67表达指数的影响

Ki-67为一种增殖期细胞特异性表达的蛋白质，可识别细胞周期G0期以外其他周期的细胞，用于判断细胞增殖活性，是确定肿瘤细胞增殖活性的重要标记物，因此常作为某些恶性肿瘤预后的重要参考指标。“临床技术操作规范病理学分册”出版后提出了病理科的技术操作规范，在落实规范要求的实践工作中，为了解固定液及固定时间对Ki-67表达指数的影响并制定我院实验室标准，笔选择脑肿瘤中最为常见的星形细胞瘤和脑膜瘤标本进行观察。     

胚胎干细胞治疗博来霉素诱导的小鼠肺纤维化的研究

目的 研究静脉注射胚胎干细胞（ESC）对肺纤维化小鼠的治疗作用。方法 气管内滴注博来霉素8.5mg/kg制作C57/BL6雌性小鼠的肺纤维化模型。治疗组(n=20)静脉注射S8小鼠ESC,对照组(n=10)注射生理盐水。治疗组又分为单次治疗(n=10)和重复治疗(n=10),两者均在造模后1h静脉注射ESC,重复治疗组在造模后3d再次静脉注射ESC。记录小鼠的生存时间,测定小鼠肺组织的羟脯氨酸含量,肺脏病理学观察炎症状态。利用秩和检验统计3组小鼠生存时间,方差分析3组小鼠肺羟脯氨酸含量的差异。结果 接受干细胞治疗后,肺纤维化模型小鼠的生存时间(d)延长,重复治疗组更加明显（对照组、单次治疗组、重复治疗组分别为7.8±2.8、8.4±3.8、13.5±5.6,P<0.01）;肺羟脯氨酸含量(μg/mL)降低 [对照组、单次治疗组、重复治疗组分别为（8.59±1.14）、（8.23±1.09）、（5.51±0.39）,P<0.01）];肺脏病理检查显示肺组织炎症程度降低,结构破坏减轻。结论 静脉注射胚胎干细胞可以减轻博来霉素诱导的小鼠肺部炎症和肺纤维化,延长肺纤维化小鼠的生存时间。     

尼群地平β-环糊精包合物的研制

目的：研究尼群地平β-环糊精包合物最佳制备工艺。方法：采用饱和水溶液法，通过正交试验设计，以包合物的收率、药物的包封率及溶出度为考察指标，综合评分后确定最佳制备工艺。结果：最佳制备工艺为尼群地平：β-环糊精(摩尔比，1：1)，包合时间为30min，包合温度为70℃；尼群地平经β-环糊精包合后，45min溶出度为原料药的5．4倍，证明有包合物形成。结论：采用最佳制备工艺制成的包合物收率高，溶出快，有助于提高其体内的生物利用度，为尼群地平加工制成各种剂型开辟了良好的前景。     

HPLC法同时测定地氯滴眼液中地塞米松磷酸钠及氯霉素含量

目的建立地氯滴眼液中主要成分地塞米松磷酸钠、氯霉素的高效液相色谱含量测定方法.方法色谱柱为Hypersil ODS C18(250 mm×4.6 m,5 μm),流动相为甲醇-0.34%的磷酸二氢钾水溶液(52:48,v/v),柱温25℃,检测波长240nm,内标:0.14 mg·mL-1氢化可的松.结果在0.1004～0.401 6 mg·mL-1范围内,地塞米松磷酸钠线性良好(r=0.999 98),回收率为102.5%,RSD=2.2%(n=9);在1.014 4～4.057 6 mg·mL-1范围内,氯霉素线性良好(r=0.999 98),回收率为101.8%,RSD=1.5%(n=9).结论该实验建立的分析方法灵敏、快速、准确.     

胚胎干细胞来源的饲养细胞支持自体胚胎干细胞生长

目的探讨小鼠胚胎干细胞(mESCs)来源的饲养细胞是否具备支持自体mESCs未分化生长的能力.方法先诱导mESCs形成类胚体(EB),进一步诱导其分化为成纤维细胞(mEB-dFE),以用作饲养细胞.采用形态学、集落形成率、细胞分化率、免疫细胞化学、碱性磷酸酶染色和RT-PCR对生长在mEB-dF上的mESCs的未分化特性进行鉴定.采用RT-PCR和诱导mESCs体内外分化方法鉴定mESCs多分化潜能特性.结果从EB三个发育阶段(EB贴壁10、15、20 d)分离出48个mEB-dF系,其中5个(来自15 d的EB)能维持mESCs未分化生长和多潜能性达10代以上.生长在这种饲养层上的mESCs与生长在小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)上一样,其特性无明显差异,均表达碱性磷酸酶和特殊的mESCs标记,包括SSEA-1、OCT-4、NANOG,在体外形成EB和体内形成畸胎瘤;其他43个mEB-dF系则不具有这种能力.结论研究不仅为mESCs体外培养提供了一种新的饲养细胞,避免了MEF作饲养细胞的许多不足;而且还提示mESCs可诱导出不同功能的成纤维样细胞,其差异的分子机制值得进一步研究.