曲古霉素A对人膀胱癌细胞EJ增殖的影响及其作用机制

目的 探讨曲古霉素A(TSA)对人膀胱癌细胞EJ增殖及WNT抑制因子-1(WIF-1)mRNA表达的影响,并分析其可能的作用机制.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的TSA对人膀胱癌细胞EJ增殖的影响;采用流式细胞术检测经TSA处理后人膀胱癌细胞EJ的细胞周期分布情况;采用实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测用药前后人膀胱癌细胞EJ中WIF-1 mRNA的表达情况;采用染色质免疫沉淀技术分析用药前后WIF-1基因启动子区组蛋白H3第9位赖氨酸(H3-K9)的乙酰化状态.结果 MTT比色法检测结果显示,处理72 h后,0.1、0.2、0.4、0.8和1.6μmol/L人膀胱癌细胞EJ的增殖抑制率均高于空白对照组(P﹤0.05).流式细胞仪检测结果显示,人膀胱癌细胞EJ经0.2、0.4和0.8μmol/L浓度的TSA处理72 h后,G0/G1期、G2/M期细胞的数量随着TSA浓度的升高而逐渐增加,S期细胞的数量随着TSA浓度的升高而逐渐减少.RT-PCR检测结果显示,与空白对照组相比,不同浓度(0.2、0.4和0.8μmol/L)的TSA处理24、48、72 h后,人膀胱癌细胞EJ中WIF-1 mRNA的相对表达量均升高(P﹤0.05).琼脂糖凝胶电泳结果显示,电泳条带符合预期的片段长度,经TSA处理后,人膀胱癌细胞EJ中扩增出目的片段,且随着TSA浓度的增加,目的片段的产物增多.结论 TSA对人膀胱癌细胞EJ的增殖具有抑制作用,其作用机制可能涉及细胞周期阻滞、WIF-1基因启动子区组蛋白H3-K9乙酰化水平升高及该基因的表达水平升高.     

血栓性血小板减少性紫癜误诊2例分析

血栓性血小板减少性紫癜（TTP）是一种弥散性血栓性微血管病，临床少见，起病急、病死率高。近10a来我院误诊2例，分析如下。     

高渗盐水雾化吸入诱导肺结核患者取痰标本的应用及护理

目的：对高渗盐水雾化吸入诱导肺结核患者取痰标本进行研究,探讨其护理体会。方法600例肺结核患者随机分为对照组与观察组,各300例,取痰标本做痰涂片查抗酸杆菌及痰PCR结核杆菌DNA检查,第2天对观察组使用3%的高渗盐水超声雾化后再次取痰标本,对照组未予处理再次取痰标本检查,分别将两组两次痰标本结果进行比较。结果两组患者首次痰标本结果比较,差异无统计学意义(P>0.05),再次痰标本结果观察组痰抗酸杆菌涂片及PCR结核杆菌DNA阳性率增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论高渗盐水雾化吸入诱导肺结核患者取痰标本可以有效地提高肺结核患者痰涂片和PCR的阳性检出率。     

原发性胆汁性肝硬化研究进展

原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis，PBC）是一类由自身免疫机制介导的、以肝内小胆管进行性、非化脓性炎症为特征的慢性胆汁淤积性疾病，进一步可发展至肝纤维化与肝硬化。PBC病因不明，在任何年龄段均可发病，多见于40岁以上的女性（男女比例为1：9）。PBC在世界各地均有分布，西方国家患病率较高，约为1．9-15．1／10万，年发病率约为0．39—1．5／10万。近年来国内外报道PBC发病率有上升趋势。本文就该疾病的研究现状作一综述如下。     

预防PICC术后深静脉血栓形成的最佳握拳运动

目的 探讨不同握拳频次对经外周静脉置人中心静脉导管(PICC)术后上肢深静脉血栓形成(UEDVT)的预防效果.方法 将120例PICC患者随机均分为实验1组(A1组,每天3组握拳运动)、实验2组(A2组,每天6组握拳运动)和对照组(C组).置管后第1、2、3、21天,用彩色多普勒超声检测腋静脉最大血液流速(Vmax)、单位时间平均血液流速(TMFV)以及血栓形成情况.结果 与C组相比,A1、A2组置管21 d后的Vmax、TMFV增加,血栓发生率降低(P＜0.05).A1组和A2组血液流速及血栓发生率均无统计学差异(P＞0.05).结论 PICC患者置管后应尽早做握拳运动,每天至少3组握拳,从而减少血液瘀滞,预防UEDVT的发生.     

社区老年人骨健康的调查结果分析和预防措施探讨

采用随机抽样调查法和标准化问卷及体检。结果骨折史占24%认识程度占10%,骨密度负值占70%,女性占58%,男性占42%,X线骨质增生占60%。社区老年的人的骨折风险高,应该加强健康宣教和干预预防性的治疗,进一步利用社区卫生资源更好地为老年保健服务,减少骨折发生率,节省国家医疗资源,减轻家庭经济负担。     

急性乙型肝炎患者外周血单个核细胞颗粒溶素mRNA定量测定及临床意义

目的应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测乙型肝炎（简称乙肝）患者外周血单个核细胞（PBMC）中颗粒溶素（GNLY）mRNA的表达,探讨GNLY基因表达水平与急性乙肝的关系。方法实时荧光定量RT-PCR分别检测40例急性乙肝患者及100名正常对照的PBMC的GNLY基因表达水平,同时检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）水平。结果急性乙肝患者发病期mRNA表达显著高于正常对照组（P〈0.01）,恢复期GNLY基因表达与正常对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。乙肝患者GNLYmRNA与血清ALT、AST呈正相关。结论实时荧光定量RT-PCR检测GNLY mRNA的表达准确可靠。患者外周血GNLY基因表达水平与急性乙肝的发生发展存在一定的相关性。     

原发性胆汁性肝硬化患者三种免疫效应分子的表达及临床意义

目的研究颗粒溶素（granulysin，GNLY）、颗粒酶B（granzymeB，GrB）及穿孔素（perforin，PF）三种免疫效应分子在原发性胆汁性肝硬化（primarybiliarycirrhosis，PBC）外周血中的表达并探讨其与PBC的关系。方法以正常健康人和肝炎后肝硬化患者为对照，用实时荧光定量RT—PCR方法检测PBC患者PBMC中GNLY、GrB及PFmRNA的含量。用ELISA方法检测PBC患者血清中GNLY表达情况并分析其与肝功能的相关性。结果PBC组GNLY、GrBmRNA平均拷贝数显著高于健康对照组（P〈0．01）和疾病对照肝炎后肝硬化组（P〈0．001），而PFmRNA与对照组相比差异无统计学意义。PBC患者血清中的GNLY蛋白表达显著高于健康对照组（P〈0．01）和乙型肝炎后肝硬化组（P〈0．01）。血清中GNLY浓度与血清GGT、AIJP的浓度呈正相关（P〈0．01）。结论PBC患者GNLY、GrBmRNA和含量显著高于对照组，同时ELISA方法检测出PBC患者血清中GNLY蛋白含量显著高于对照组，GNLY、GrB表达与PBC的发病存在一定的关联性，为临床PBC病情的监控提供可靠依据。     

M2抗体重组人源靶抗原二联体在原发性胆汁性肝硬化患者中的检测及应用

目的 利用重组抗原BCOADA-E2和PDC-E2的二联体（BP），检测PBC患者血清中的M2抗体并探讨其临床意义。方法 经Ni—NTA亲和柱纯化重组表达的BP融合蛋白，分别建立免疫印迹法（IBT）和酶链免疫吸附（ELISA）法检测60份PBC患者血清，以60份其他肝病患者、60份自身免疫病患者、80例正常人血清为对照组。结果 经常规试剂盒检测为M2（＋）的60份患者血清，利用重组抗原检测阳性53例，阴性7例，阳性率为88．3％；经常规试剂盒检测为M2（-）的60份自身免疫病患者血清、60份其他肝病患者和80例正常人血清，利用重组抗原检测为M2（-）。结论 利用重组抗原BP检测M2抗体敏感性较高。对临床辅助诊断PBC提供一定的手段。     

TRAIL及其受体与隐球菌性脑膜炎的关联性研究

目的研究建立实时荧光定量（RFQ）-PCR法测定TRAIL及其受体DeR1、DcR2、DR4、DR5 mRNA含量的方法，探讨其在隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中表达的检测价值，并分析隐球菌性脑膜炎患者细胞因子与TRAIL及其受体的相关性。方法设计特异性的引物和探针，以人基因GAPDH为内参照，用实时定量PCR的方法检测35例健康人和35例隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中TRAIL及其受体mRNA的表达水平，采用ELISA方法检测血清IL-4、IL-10、TNF-α、IFN-γ浓度。结果与健康人比较，隐球菌性脑膜炎患者外周血单个核细胞中TRAIL mRNA的表达明显下降（P〈0．01）；受体DeR1 mRNA的表达显著升高（P〈0．01），受体DeR2、DR4、DR5 mRNA的变化无统计学意义。隐脑患者血清中IL-10显著升高（P〈0．01），与TRAIL的变化成负相关；IFN-γ显著下降（P〈0．01），与TRAIL的变化成正相关。结论隐球菌性脑膜炎患者TRAIL下降及其受体DeR1mRNA的表达明显升高，提示TRAIL及其受体DeR1可能参与隐球菌性脑膜炎的疾病进程，这为有效治疗隐球菌性脑膜炎提供了新的线索。