绿藻硫酸多糖SHW及其低分子量片段的结构及抗凝活性研究*

目的 对绿藻多糖SHW及其低分子量片段的结构及抗凝活性进行研究。方法 通过热水提取、强阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱,从绿藻硬毛藻中提取分离得到硫酸多糖SHW;通过可控酸解方法制备SHW低分子量片段;采用高效凝胶渗透色谱、高效液相色谱、红外光谱及甲基化方法对多糖结构进行表征;通过活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、凝血酶原时间研究多糖SHW及其低分子量片段体外抗凝血活性。结果 多糖SHW及其低分子量片段主要由阿拉伯糖组成,含有少量半乳糖和氨基葡萄糖;糖链中阿拉伯糖主要以→4)-Arap-(1→和→3,4)Arap-(1→的形式存在,半乳糖以→4)-Galp-(1→存在形式,硫酸根主要位于→4)-Arap-(1→的C-3位。SHW及其低分子量片段A1～A6的分子量分别为492 kDa、200 kDa、170kDa、100kDa、26kDa、14kDa 和10 kDa。SHW 具有较高的抗凝血活性,且其抗凝活性随着其分子量的减少而降低。结论 海藻多糖SHW是一种具有抗凝活性的新颖硫酸多糖,其抗凝活性与分子量密切相关。     

绿藻硫酸多糖UCS2的结构及抗凝血活性研究

目的 对绿藻多糖UCS2的结构特征和抗凝血活性进行研究。方法 通过冷水提取、强阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱,从绿藻花石莼中提取分离得到硫酸多糖UCS2;采用高效凝胶渗透色谱（HPGPC）、高效液相色谱、红外光谱和气质联用色谱对多糖UCS2的结构进行表征;通过活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间、凝血酶原时间对多糖UCS2体外抗凝血活性进行研究。结果 绿藻多糖UCS2分子量为39.55kDa,硫酸根和糖醛酸含量分别为19.74%和18.66%;UCS2主要由鼠李糖组成,含有少量葡糖醛酸和木糖。糖链中含有→3,4)-α-L-Rhap-(1→, →4)-α-L-Rhap-(1→, →4)-β-D-Xylp-(1→和→4)-β-D-GlcAp-(1→,硫酸基位于→4)-α-L-Rhap-(1→的C-3位。多糖UCS2对APTT有显著延长作用,具有较高的抗凝活性。结论 绿藻多糖UCS2是1种抗凝活性的葡萄糖醛酸-木糖-鼠李糖型硫酸多糖。     

海藻MGMG型甘油糖脂的研究

目的鉴定中药海藻(羊栖菜Sargassum fusiforme)中的单半乳糖基单酰基甘油酯(monogalactosylmonoacylglycerol,MGMG),分析sn-1型和sn-2型位置异构体的化学特征。方法利用多种色谱手段分离得到MGMG,采用NMR、HR-ESI-MS等谱学方法鉴定结构,采用HPLC、HPLC-ESI-MS/MS分析位置异构体的互变及其色谱-质谱特征。结果分离到并鉴定5个MGMG,酰基分别为十八碳四烯酰基、十八碳三烯酰基、二十碳四烯酰基、十八碳二烯酰基和十八碳单烯酰基;sn-1型和sn-2型MGMG单体均不稳定,会相互迅速转变直至sn-1型为主(相对峰面积85∶15)的平衡状态。sn-2型在反相色谱柱上的保留时间较sn-1型小,先被洗脱;两者二级质谱碎片离子丰度有较大差异,以[M+Na-Gal]~+为基峰(100%),sn-2型的[M+Na-RCOOH]~+丰度50%,sn-1型的[M+Na-RCOOH]~+丰度20%。结论首次从褐藻门中分离鉴定上述5个MGMG,阐明了sn-1型和sn-2型MGMG之间的互变过程,首次报道这2种位置异构体的色谱-质谱特征,可用于MGMG类化合物酰基取代位置的鉴定。     

海洋硫酸多糖PAE的结构和抗病毒活性研究

目的 对肠浒苔来源的硫酸多糖的结构和抗病毒活性进行研究。 方法 通过稀碱提取法,从肠浒苔中提取硫酸多糖,采用强阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱对多糖进行分离纯化;采用高效液相色谱(HPLC)、高效凝胶渗透色谱(HPGPC)、傅里叶变换红外光谱(IR)以及气质联用色谱(GC-MS)方法对多糖的结构进行表征;采用细胞病变效应测定PAE对不同病毒的抑制率。 结果 从肠浒苔中分离得到多糖PAE,其分子量为13.98 kDa,主要由鼠李糖、葡萄糖醛酸和木糖构成,糖链主要由(1→4)-Rhap,(1→3,4)-Rhap,(1→2,4)-Rhap,Xylp(1→和(1→4)-Glcp组成,硫酸根主要位于(1→4)-Rhap 的C-2或C-3位以及Xylp(1→的C-4位上,PAE具有良好的抗病毒活性,特别是对呼吸道合胞体病毒的抑制率较高。 结论 海洋多糖PAE是一种结构新颖的由鼠李糖、葡萄糖醛酸和木糖组成的硫酸多糖,具有良好的抗病毒活性。     

绿藻多糖CH1-1的可控降解及其寡糖的制备研究

目的 研究绿藻多糖CH1-1的可控降解及其寡糖的制备。方法 采用不同浓度的三氟乙酸（TFA）或盐酸（HCl）对绿藻多糖CH1-1进行水解,通过薄层色谱和凝胶渗透色谱法研究了水解过程中不同的反应温度和反应时间对多糖降解产物的影响;通过控制酸浓度、反应温度和反应时间,通过Bio-Gel P4凝胶色谱柱分离得到寡糖产物;采用质谱法对得到的寡糖产物进行分析。结果 采用0.1 mol?L-1 和0.05 mol?L-1 TFA或HCl,随着反应温度的升高和反应时间的延长,多糖的分子量降低,其中0.1 mol?L-1 TFA、80 ℃及0.1 mol?L-1 HCl、80 ℃水解条件对多糖的降解作用较好;最终选取0.1 mol?L-1 HCl、80 ℃、3 h的水解条件对多糖进行降解制备寡糖,并采用Bio-Gel P4凝胶色谱柱对寡糖混合物进行分离纯化,电喷雾质谱分析表明,这些寡糖组分为聚合度为1～8的硫酸阿拉伯糖。结论 建立了绿藻多糖CH1-1可控降解方法,制备得到新颖的海洋硫酸寡糖。     

海洋硫酸鼠李寡糖的制备研究

目的 探究海洋硫酸鼠李寡糖的制备方法并对所得寡糖的特征进行了研究。方法 采用三氟乙酸(TFA)和盐酸(HCl)对海洋硫酸鼠李多糖进行降解,通过薄层色谱法和凝胶渗透色谱法对降解条件进行分析,确定寡糖的制备方法;制备得到一系列硫酸鼠李寡糖,采用质谱法对其特征进行研究。结果 0.1 mol.L-1 TFA 80℃及0.1 mol.L-1 HCl 80℃水解条件对多糖的降解作用较好,且通过Bio-Gel P4凝胶色谱柱对寡糖能进行有效分离;最终选取0.1 mol.L-1 HCl 80℃10 h的水解条件对硫酸鼠李多糖进行降解,采用Bio-Gel P4凝胶色谱柱对寡糖混合物进行分离纯化,负离子模式下的电喷雾质谱分析表明,这些寡糖为聚合度为1–11的硫酸化鼠李寡糖。结论 首次建立了海洋新型硫酸鼠李寡糖的制备方法,这些硫酸鼠李寡糖为新型海洋特征寡糖。     

海藻多糖UH3的结构特征、抗凝和溶栓活性研究

目的 对海藻多糖UH3的结构特征、抗凝血和溶栓活性进行研究。方法 通过热水提取法，从海藻中提取硫酸多糖，采用强阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱对多糖进行分离纯化；采用高效液相色谱、高效凝胶渗透色谱（HPGPC）、红外光谱及甲基化方法对多糖的结构进行表征；通过活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、凝血酶原时间（PT）及血凝块溶解法研究多糖体外抗凝血和溶栓活性。结果 多糖UH3在HPGPC色谱图上呈单一对称峰，分子量为50.3 kDa，硫酸根和糖醛酸含量分别为12.27和12.85%；UH3主要由鼠李糖组成，含有少量葡萄糖醛酸和木糖；UH3糖链中鼠李糖主要以→4)-Rhap-(1→、 →3,4)-Rhap-(1→及少量的T-Rhap形式存在，木糖以→4)-Xylp-(1→和T-Xylp存在形式，糖醛酸以→4)-GlcAp-(1→和T-GlcAp形式存在；硫酸根主要位于→4)-Rhap-(1→的C-3位。多糖UH3对APTT和TT有显著延长作用，并能明显提高溶栓率。结论 海藻多糖UH3是一种结构新颖的具有抗凝和溶栓活性的硫酸多糖。