HPLC测定注射用盐酸头孢替安含量

目的建立测定注射用盐酸头孢替安含量的反相高效液相色谱法。方法色谱柱为DiamonsilTM C18（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为乙腈-水（1.5%乙酸）（5∶95）,流速1.0 mL·min-1,检测波长254 nm,柱温40 ℃。结果盐酸头孢替安浓度在12~2 000 mg·L-1内,峰面积与浓度呈良好线性关系(r=0.999 9),加样回收率为98.8%, RSD为1.35%(n=5)。结论该方法简便可靠,能够满足注射用盐酸头孢替安的含量测定要求。     

植物甾醇对慢性非细菌性前列腺炎的保护作用及其机制研究

目的:研究植物甾醇对慢性非细菌性前列腺炎的保护作用及其可能的机制。方法:采用消痔灵诱导慢性非细菌性前列腺炎模型,取前列腺液镜下观察卵磷脂小体数及白细胞数并计算前列腺指数,观察植物甾醇对慢性非细菌性前列腺炎的抑制作用;采用ELISA方法检测大鼠血清中IL-1β,IL-2及TNF-α的含量变化;免疫组化法及Western blot法检测大鼠前列腺组织中COX-2及5-LOX的表达。结果:植物甾醇150 mg.kg-1能明显降低慢性前列腺炎模型前列腺液中的白细胞数、增加卵磷脂小体密度,同时各给药组均能不同程度改善前列腺组织的病理变化。植物甾醇150 mg.kg-1对慢性前列腺炎大鼠血清中的IL-1β及TNF-α有明显的抑制作用,同时能明显提高血清中IL-2的水平;各给药组均能不同程度抑制组织中COX-2及5-LOX的表达。结论:植物甾醇对大鼠慢性非细菌性前列腺炎有明显的保护作用。其抗炎作用可能是通过参与免疫调节及抑制前列腺组织中COX-2及5-LOX表达实现的。     

RP—HPLC法体外筛选5α-还原酶抑制剂模型的建立

目的：建立高效液相色谱法体外筛选5α-还原酶抑制剂。方法：5α-还原酶提取液从大鼠肝脏组织中获取。采用反相高效液相色谱法测定酶促反应中底物睾酮浓度在反应前后的变化，以此反映酶活性高低，用于5α-还原酶抑制剂的体外筛选。色谱条件Diarnonsil^TM C18（250mm×4．6mm，5μm），流动相为甲醇-水-乙酸（70：29．5：0．5），流速1．0mL·min^-1，柱温30℃，检测波长230nm。结果：酶促反应体系中其他组分与睾酮有效分离。5α-还原酶抑制剂爱普列特抑制5α-还原酶活性，并呈现良好的量效关系。结论：方法简便可行，可用于5α-还原酶抑制剂的体外筛选。     

石墨炉原子吸收分光光度法测定大鼠血浆和尿液中的赛特铂

目的建立大鼠血浆和尿液中赛特铂含量测定的无火焰石墨炉原子吸收分光光度法。方法采用岛津AA-670原子吸收分光光度仪及GFA-4A石墨炉,上海电光KY-1铂空心阴极灯,检测波长265.9 nm,测定大鼠血浆和尿液中的赛特铂含量。血尿样品用Triton X-100稀释,进样50μL。结果在浓度范围0.25 mg·L^-1-10.0 mg·L^-1内,样品峰面积与浓度呈良好线性关系,相关系数r²分别为血浆0.9952,尿液0.9878;加样回收率为血浆89%～112%,尿液82%～100%。结论方法简便可靠,适于生物样本中的赛特铂含量测定和动物药动学研究。     

石墨炉原子吸收分光光度法测定大鼠血浆和尿液中的赛特铂

目的建立大鼠血浆和尿液中赛特铂含量测定的无火焰石墨炉原子吸收分光光度法。方法采用岛津AA-670原子吸收分光光度仪及GFA-4A石墨炉,上海电光KY-1铂空心阴极灯,检测波长265.9 nm,测定大鼠血浆和尿液中的赛特铂含量。血尿样品用Triton X-100稀释,进样50μL。结果在浓度范围0.25 mg.L-1~10.0 mg.L-1内,样品峰面积与浓度呈良好线性关系,相关系数r2分别为血浆0.9952,尿液0.9878;加样回收率为血浆89%~112%,尿液82%~100%。结论方法简便可靠,适于生物样本中的赛特铂含量测定和动物药动学研究。     

贯叶金丝桃抗抑郁作用机制研究:昼夜节律试验

贯叶金丝桃提取物治疗中、轻度抑郁症有效,但其作用机制尚未完全明确。已知口服该植物能提高皮肤光敏性,推测它是否可能直接或通过光敏性作用于节律定时系统从而减轻抑郁症状。据此,作者研究了在持续黑暗(DD)和持续微亮(LL)条件下,贯叶金丝桃提取物对大鼠昼夜活动节律变化的影响。实验1:24只雄性大鼠分为3组,每组8只,饲养在DD环境中,经17d基线期后,连续27d喂饲贯叶金丝桃提取物,每天616或308mg/kg(含金丝桃素分别为0.74和0.37mg/kg),对照组给相应量的乙醇,停药后给自来水,观察昼夜节律变化。实验2:与实验1相同的分组和给药方法,饲养在LL…     

利用优化的显微技术观察和定位Merm1/Wbscr22在人肺癌细胞NCI-H1299中的表达

目的 优化细胞免疫荧光染色技术结合激光扫描共聚焦显微镜技术的实验步骤,观察并定位Merm 1/Wbscr22在人肺癌细胞NCI-H1299中的表达,以期对后续深入研究Merm1/Wbscr22的分子功能提供技术支持.方法 采用Western blot 及细胞免疫荧光染色结合激光扫描共聚焦显微镜技术观察Merm1/Wbscr22在NCI-H1299细胞的表达与定位,改进并优化免疫荧光染色实验步骤.结果 Merml/Wbscr22蛋白在NCI-H1299细胞内过量表达,并定位于细胞核内.细胞免疫染色步骤显著地影响Texas Red-鬼笔环肽的非特异性染色及F-actin、Merm1/Wbscr22、细胞核DNA染色荧光的强度.结论 结合细胞免疫荧光染色技术与激光扫描共聚焦显微镜技术可以清楚地观察Merm1/Wbscr22在人肺癌细胞NCI-H1299的表达与定位,该技术的最优实验步骤是细胞固定、透膜、封闭、Texas Red-鬼笔环肽标记F-actin、一抗结合、二抗结合、DAPI标记细胞核DNA,最后共聚焦显微镜成像,这样既能减少Texas Red-鬼笔环肽的非特异性染色,各组分荧光强度又足够清晰利于观察.     

赛特铂对人卵巢癌细胞A2780的凋亡诱导作用

目的：观察赛特铂对人卵巢癌细胞A2780的凋亡诱导作用及对细胞周期的影响。方法：MTT法观察药物对细胞增殖的抑制作用，碘化丙锭染色分析细胞周期变化，电镜和荧光显微镜观察细胞形态学变化，多参数流式细胞术及TUNEL法检测细胞凋亡率，并测定caspase-3的活性变化及caspase抑制剂对细胞存活率的影响。结果：赛特铂可抑制A2780细胞的增殖并诱导凋亡，具有明显的剂量依赖性，作用与顺铂相当。赛特铂主要导致A2780细胞S期细胞明显增加，G2／M期细胞少许增加。经赛特铂作用后漂浮细胞呈现典型凋亡细胞形态学改变。caspase-3活性随着细胞凋亡率增加而增加，caspase抑制剂不完全抑制细胞死亡。结论：赛特铂影响A2780细胞周期分布，可体外诱导A2780细胞凋亡。caspase依赖性和caspase非依赖性途径参与了其凋亡过程，其中caspase依赖性途径又包括caspase-3依赖性和非easpase-3依赖性途径。     

铂类抗癌新药双环铂的体内外抗肿瘤活性

目的观察铂类抗癌新药双环铂的体内外抗肿瘤活性及其对细胞周期的影响。方法MTT法观察双环铂对人肿瘤细胞增殖的抑制作用;小鼠动物肿瘤模型观察双环铂对肿瘤的体内抑制作用;碘化丙锭PI染色流式细胞术分析药物所致人卵巢癌细胞A2780细胞的周期变化。结果双环铂于体外抑制多种人肿瘤细胞增殖,体内抑制小鼠肉瘤S180、肝癌Heps及黑色素瘤B16的生长,并导致A2780细胞S期细胞明显增加及G₂/M期细胞少许增加。结论双环铂具有明显的体内外抗肿瘤活性,并影响肿瘤细胞的细胞周期分布。     

脱氧氟尿苷针剂对小鼠移植性肿瘤的抑制作用

目的　观察脱氧氟尿苷DFUR针剂对动物移植性肿瘤的实验治疗作用。方法　选用肉瘤S180、肝癌HepS、白血病L6 15和艾氏腹水癌ECA等四株小鼠移植性肿瘤,观察注射途径下脱氧氟尿苷DFUR的抗肿瘤作用。结果　腹腔、静脉或口服给药,DFUR对S180的抑瘤率均大于80%。腹腔给药对HepS的抑瘤率为78% ,对L6 15和ECA的生命延长率为515%和202%。腹腔给药对S180的化疗指数分别为DFUR2.8,FU1.3,FT2071.4和FUDR1.5。结论　无论是静脉、腹腔或口服给药,脱氧氟尿苷DFUR对多种小鼠肿瘤均有明显的抑制作用。与FU ,FT2 0 7和FUDR相比,DFUR可在较低的毒性下显示更好的抗肿瘤作用