古草生机汤对H22荷瘤小鼠体内抑瘤及免疫调节作用的初步研究

目的：探究古草生机汤对H22荷瘤小鼠体内实体瘤的抑瘤功效和对机体的免疫调节作用机制。方法：本研究采用H22实体瘤动物模型,随机分为空白组、模型组、阳性药组、古草生机汤低、高剂量组,灌胃给药7 d,计算各组小鼠的体质量增长率、肿瘤抑制率、胸腺及脾指数,小鼠实体瘤病理切片苏木精-伊红（HE）染色观察瘤体组织和细胞形态,酶联免疫吸附试验法检测小鼠血清中γ干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2（IL-2）、Fas、Fas配体、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）的含量,实时荧光定量PCR测量小鼠瘤组织中Bax和Bcl-2mRNA的相对表达量。结果：古草生机汤有促进H22荷瘤小鼠体质量增长、抑制体内实体瘤增长和促进肿瘤凋亡坏死的作用,可提高小鼠的胸腺指数同时降低脾脏指数,可显著提高小鼠血清中IFN-γ、TNF-α、IL-2的含量并降低Fas、Fas配体、AST、ALT的含量（均P<0.01）,能够上调小鼠瘤组织中Bax mRNA的表达并下调Bcl-2mRNA的表达。结论：古草生机汤具有明显的体内抗肝肿瘤药效,在抑制肿瘤生长、促进肿瘤细胞凋亡、调节机体免疫方面有一定作用。     

HPLC法测定紫草及其制剂紫金油中左旋紫草素的含量

紫草为紫草科植物新疆紫草 Arnebia euchroma( Royle) Johnst.、紫草 Lithospermum erythrorhizonSieb.et Zucc.的根。该药具有凉血活血、解毒透疹之功 ,用于血热毒盛、斑疹紫黑、麻疹不透、疮疡、湿疹、水火烫伤[11] 。紫草类中药的主要化学成分为萘醌类色素[2 ] 。《中华人民共和国药典》2 0 0 0年版一部采用分光光度法测定紫草总色素的含量 ,由于缺乏专属性 ,有待于进一步改进。本实验采用 HPLC法对紫草及其成药紫金油中左旋紫草素进行含量检测 ,经多种流动相系统筛选 ,最终确定本实验规定的色谱条件 ,左旋紫草素与其他萘酚类成分色…     

HPLC测定莲须中槲皮素和山萘酚的含量

目的：采用高效液相色谱法测定莲须中槲皮素和山萘酚的含量。方法：色谱柱为Shim-pack CLC-ODC柱；以甲醇-0．025mol／L磷酸(60：40)为流动相，检测波长为370nm。结果：测定组分槲皮素、山萘酚与其它组分的色谱峰得到基线分离。加样回收率平均值为96．8％，RSD为1．97％。结论：此方法为控制中药莲须的内在质量提供了新的测定指标和方法。     

均匀设计优化半仿生提取葛根芩连汤的工艺研究

葛根芩连汤由葛根、黄芩、黄连、甘草4味中药组成,具有解肌清热、止泻止痢的功效,临床上主要用于泻泄痢疾、身热烦渴、下利臭秽等证.近年来,在中医药配伍研究、工艺优化、药物筛选和药理作用等方面的研究中,均匀设计法运用越来越广泛.“半仿生提取法”是近几年提出的新方法,它是从生物药剂学的角度将整体药物研究法与分子药物研究法相结合,模拟口服药物经胃肠道转运吸收的环境,采用活性指导下的导向分离方法,是为经消化道口服给药的制剂设计的一种新的提取工艺.因此本实验采用半仿生提取法对葛根芩连汤的工艺进行了筛选.     

基于NF-κB/NLRP3/Caspase-1通路介导的巨噬细胞焦亡探究葛根芩连汤对动脉粥样硬化易损斑块的干预机制

目的 探究葛根芩连汤（GQL）通过调控核转录因子（NF）-κB/NOD样受体蛋白3（NLRP3）/胱天蛋白酶（Caspase）-1通路介导的巨噬细胞焦亡对动脉粥样硬化（AS）易损斑块的作用。方法 12只正常C57BL/6CNC小鼠作为空白组，60只同品系的载脂蛋白E基因敲除（ApoE^-/-）小鼠随机分为5组，即模型组、葛根芩连汤低、中、高剂量组（GQL-D、Z、G组）、立普妥组，以高脂饲料喂养造模。空白组、模型组予等体积无菌蒸馏水灌胃；GQL-D、Z、G、立普妥组分别予对应浓度的药物灌胃8周。苏木素-伊红（HE）染色观测主动脉区域斑块情况，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）水平，ELISA检测巨噬细胞甘露糖受体（MMR/CD206）/凋亡相关斑点样蛋白（ASC）、CD206/NLRP3蛋白表达水平，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组小鼠gasdermin D蛋白C端（C-terminal GSDMD）、gasdermin D蛋白N端（N-terminal GSDMD）、NLRP3、含胱天蛋白酶-1前体（pro-Caspase-1）和NF-κB p65蛋白表达水平。结果 与空白组比较，模型小鼠AS病变程度严重，血清IL-1β、IL-18、组织ASC、NLRP3、C-terminal GSDMD、N-terminal GSDMD、pro-Caspase-1和NF-κB p65表达水平明显升高（P<0.05），CD206水平明显下降（P<0.05）；与模型组比较，给药各组小鼠主动脉壁AS病变程度有所减轻，血清IL-1β、IL-18、组织ASC、NLRP3、C-terminal GSDMD、N-terminal GSDMD、pro-Caspase-1和NF-κB p65表达水平有不同程度下降，CD206水平不同程度上升，部分组结果差异有统计学意义（P<0.05）。结论 GQL对AS易损斑块的干预作用可能是通过调控NF-κB/NLRP3/Caspase-1通路，减轻其介导的巨噬细胞焦亡来实现的。     

基于细胞水平药物筛选的微流控芯片系统研究进展

进入21世纪以来,药物筛选技术正朝着快速、高效的细胞水平筛选方面发展,微流控芯片技术作为现代生命科学领域的重要研究工具,以其分析微型化、高通量化、可集成化和良好的生物相容性等特点,在细胞水平药物筛选方面引起了广泛关注,并取得了一系列成果。国家“十二五”规划中启动科技重大专项“基于微流控芯片的新药研究开发关键技术”,使得微流控芯片在药物筛选领域的研究达到了一个新的高度。本文主要综述了近年来基于细胞水平药物筛选的微流控芯片系统的研究进展,并对其应用前景进行了展望。     

基于多波长覆盖融合指纹图谱的大川芎片主要成分研究

目的建立10批次大川芎片多波长融合高效液相色谱指纹图谱,在此基础上对大川芎片融合指纹图谱共有峰进行初步指认,构建大川芎片的全析指纹图谱为其全面的质量控制提供依据。方法采用高效液相色谱法对大川芎片进行检测,将不同波长下数据进行多波长融合得到10批大川芎片的融合指纹图谱,采用液质联用技术对融合指纹图谱中的共有峰进行初步结构鉴定。结果 10批大川芎片融合指纹图谱共获得13个共有峰并与共有模式图相似度均>0.92,其中8个共有峰得到指认。结论本文通过多波长融合技术手段及HPLC-MS分析方法建立大川芎片全析指纹图谱,为大川芎片主要成分的质量控制提供依据,为规范中药制剂及其合理使用奠定基础。     

HPLC法测定健脾养胃颗粒中厚朴酚的含量研究

目的:建立健脾养胃颗粒中厚朴酚的含量测定方法。方法:采用HPLC法,色谱柱:采用Allsphere ODS(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%醋酸(78:22),流速:1.0 ml.min-1,检测波长为294 nm。结果:厚朴酚在0.05792~0.5792μg范围内线性良好,r=0.9999,平均回收率99.18%,RSD%=1.80%(n=6)。结论:该方法分离度高,重现性好,简便,准确,可用于健脾养胃颗粒的质量控制。     

正交设计法对利咽喷雾膜剂制备工艺的研究

目的:通过正交试验法考察利咽喷雾膜剂的水提制备工艺。方法:以绿原酸、甘草酸单铵盐和干膏收率的综合指标作为考核指标,通过L9(34)正交试验设计考察水提的制备工艺条件,确定利咽喷雾膜剂的最佳水提工艺。结果:水提制备T艺影响因素大小依次是:煎煮次数(C)>加水量(A)>煎煮时间(B),最佳制备工艺条件为A2B1C3,处方药材加12倍量水,煎煮3次,每次1h。结论:筛选出最佳的水提工艺。     

银黄片中金银花提取工艺研究

目的:探讨银黄片中金银花最佳提取工艺。方法:采用正交设计法,以干膏收率及金银花中绿原酸含量为指标综合评价。结果:10倍水提取2次,每次2h。结论:上述试验结果可为银黄片中金银花最佳提取确定实验依据。