葡萄糖调节蛋白和环氧合酶-2在肝癌组织中的表达及其相关性研究

目的 研究葡萄糖调节蛋白(GRP78)和环氧合酶-2(COX-2)在肝癌组织中表达及与临床病理资料的关系.方法 采用免疫组化法检测144例肝癌组织芯片中GRP78和COX-2的表达情况.结果 肝癌组织中GRP78、COX-2的阳性表达率分别为47.22%、56.94%;GRP78与乙肝病毒感染史、丙氨酸氨基转移酶(ALT)差异有统计学意义(P<0.05),但与性别、年龄、肝硬化病史、甲胎蛋白(AFP)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、肿瘤大小、分期、分化程度差异无统计学意义(P>0.05),COX-2的表达与肿瘤组织分化程度差异有统计学意义(P<0.025),与性别、年龄、肝硬化病史、乙肝病毒感染史、AFP、AST、ALT、ALP、肿瘤大小、分期差异无统计学意义(P>0.05);COX-2与GRP78蛋白的表达呈正相关(r=0.204,P<0.025).结论 COX-2的表达与肝癌组织分化程度显著相关,GRP78阳性表达的肝癌组织中COX-2的表达升高,两者在肝癌组织中的关系密切.     

血清半乳甘露聚糖检测在诊断儿童侵袭性肺曲霉感染中的价值

目的评价血清半乳甘露聚糖(GM)试验对儿童侵袭性肺曲霉病(IPA)的诊断价值。方法用双抗体夹心ELISA法测定77例临床高度怀疑IPA患儿的血清GM浓度,以吸光度指数(AI)值绘制ROC曲线,评价其对儿童IPA的诊断价值。结果收集77例患儿标本89份,ROC曲线分析,以AI 1.0为阳性界定值时,诊断儿童IPA的敏感性为79.4%,特异性为83.7%;ROC曲线下面积(AUCROC)为0.841(95%CI:0.747～0.936)。结论血清GM抗原检测对儿童IPA有一定的诊断价值。     

特发性肾病综合征患儿尿液外泌体miR-194-5p水平及其临床价值

目的探讨特发性肾病综合征(idiopathic nephrotic syndrome,INS)患儿尿液外泌体miR-194-5p水平及其作为辅助诊断标志物的临床价值。方法收集101例INS患儿和98例性别、年龄相匹配的健康儿童尿液标本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-194-5p在尿液外泌体中的含量;ROC曲线、相关性分析等评估其对INS患儿的诊断价值。结果 INS组尿液外泌体miR-194-5p水平明显高于健康人对照组[2.420(0.650,9.515)fmol/L vs 0.360(0.220,0.653)fmol/L,U=1 552,P0.01],且其中44例患者在治疗缓解后明显下降[0.975(0.375,4.358)fmol/L vs 0.320(0.145,0.523)fmol/L,W=708,P0.01];伴有高尿蛋白的INS患儿miR-194-5p水平明显高于伴有低尿蛋白患儿[8.430(7.225,13.070)fmol/L vs 2.130(1.180,3.090)fmol/L,U=0,P0.01];miR-194-5p诊断INS的ROC曲线下面积(AUC~(ROC))为0.843(95%CI:0.789～0.897)。相关性分析显示,INS患儿尿液外泌体miR-194-5p与血清清蛋白(r=-0.300)水平呈负相关,与血清总胆固醇(r=0.278)、24 h尿蛋白(r=0.296)呈正相关(P均0.01)。结论 INS患儿尿液外泌体miR-194-5p含量明显升高,与24 h尿蛋白、血清清蛋白和胆固醇水平密切相关,有望作为辅助诊断儿童INS的非侵入性分子标志物。     

儿童原发性肾病综合征患者尿液外泌体miR-23b-3p水平变化及其临床意义

目的检测尿液外泌体miR-23b-3p在儿童原发性肾病综合征(nephrotic syndrome,NS)患者中的水平,评估其作为NS辅助诊断指标的临床价值。方法收集2017年3～11月在解放军东部战区总医院住院并确诊的98例NS患儿(NS组)和南京医科大学附属儿童医院95例年龄、性别相匹配的健康儿童(对照组)的晨尿标本及临床资料。实时荧光定量PCR (quantitative real-time PCR,qRT-PCR)方法检测miR-23b-3p在尿液外泌体中的含量。应用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)、相关性分析等评估其作为儿童NS诊断指标的临床价值。结果 miR-23b-3p在NS组尿液外泌体中的浓度明显高于对照组[13.44(4.47,31.40)fmol/L vs 3.94(2.76,7.15)fmol/L,差异有统计学意义,U=1 899,P0.000 1],且在治疗缓解后显著下降[10.62(4.38,37.72)fmol/L vs 2.84(1.53,4.92)fmol/L,W=695,P0.000 1]。miR-23b-3p诊断NS的ROC曲线下面积(AUC)为0.796(95%CI:0.734～0.858),敏感度为84.7%,特异度为64.2%。相关性分析显示,NS患儿尿液外泌体miR-23b-3p与血清总蛋白(r=-0.377)、清蛋白(r=-0.309)水平呈显著负相关,与血清总胆固醇(r=0.266)、三酰甘油(r=0.318)呈显著正相关,差异均具有统计学意义(均P0.01)。结论 miR-23b-3p在NS患儿尿液外泌体中的含量显著升高,且在治疗缓解后明显降低,有望作为儿童NS辅助诊断和治疗效果监测的潜在指标。     

单克隆抗体在疾病治疗中的应用

单克隆抗体(单抗)技术与分子生物学技术的结合使重组嵌合抗体、人源化抗体和全人抗体的技术得到迅速发展.由于这些单抗带有人抗体的Fc片段,因此,这些抗体不仅能中和抗原,更重要的是能介导细胞毒作用和激活补体系统.这些抗体已被用于治疗某些疾病,如癌症、免疫性疾病、感染性疾病和器官移植排斥.随着大规模CHO细胞生产工艺的发展,越来越多的单抗将应用于临床.     

单克隆抗体在疾病治疗中的应用

单克隆抗体(单抗)技术与分子生物学技术的结合使重组嵌合抗体、人源化抗体和全人抗体的技术得到迅速发展.由于这些单抗带有人抗体的Fc片段,因此,这些抗体不仅能中和抗原,更重要的是能介导细胞毒作用和激活补体系统.这些抗体已被用于治疗某些疾病,如癌症、免疫性疾病、感染性疾病和器官移植排斥.随着大规模CHO细胞生产工艺的发展,越来越多的单抗将应用于临床.     

川崎病并发冠脉损伤患儿血清活化HUVECs NF-κB促使MMP-9 mRNA水平上调的实验研究

目的 探讨脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)在川崎病(kawasaki disease,KD)并发冠状动脉损伤(coronary artery lesions,CALs)患儿血清作用下,核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)对基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteases 9,MMP9)mRNA转录的影响。方法将HUVECs分为4组,分别为正常血清组(control组)、一般发热血清组(F组)、无冠脉损伤组(non-CALs组)和冠脉损伤组(CALs组)。免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,ChIP)检测HUVECs中NF-κB p65与MMP-9启动子结合情况,RT-PCR检测HUVECs MMP-9mRNA水平。结果 与对照组相比,经KD患儿,特别是并发CALs患儿血清作用后,HUVECs NF-κB p65可直接结合在MMP-9启动子上,同时MMP-9 mRNA呈高表达。结论 HUVECs在KD并发CALs患儿血清作用下,NF-κB p65可直接结合在MMP-9启动子上促进其转录。     

2017-2018年南京市儿童医院儿科重症监护病房感染病原菌的分布及耐药性分析

目的 了解南京市儿童医院儿科重症监护病房（PICU）病原菌的分布及耐药性,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法 对2017年1月-2018年12月南京市儿童医院PICU住院患儿送检标本所分离的病原菌及其耐药性进行回顾性分析。结果 共分离出306株病原菌,主要来自痰液,共191例,构成比为62.41%。革兰阳性菌120株,构成比为39.21%,主要为金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌和屎肠球菌;革兰阴性菌166株,构成比为54.25%,主要为肺炎克雷伯菌、流感嗜血杆菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌;真菌20株,构成比为6.54%。金黄色葡萄球菌对环丙沙星、替加环素、万古霉素、左氧氟沙星、喹努普汀/达福普汀、利福平、利奈唑胺、莫西沙星和庆大霉素完全敏感;金黄色葡萄球菌对青霉素G的耐药率高达93.88%。肺炎链球菌对克林霉素、红霉素完全耐药,耐药率为100.00%,未发现对氯霉素、青霉素G、万古霉素的耐药菌株。屎肠球菌对氨苄西林和青霉素G完全耐药,耐药率为100.00%,未发现对喹努普汀/达福普汀、利奈唑胺、替加环素和万古霉素的耐药菌株。肺炎克雷伯菌对氨苄西林完全耐药,耐药率为100.00%,未发现对左氧氟沙星、环丙沙星的耐药菌株;流感嗜血杆菌对头孢曲松和美洛培南的耐药率较低,均为3.70%。大肠埃希菌对阿米卡星完全敏感。铜绿假单胞菌对左氧氟沙星、环丙沙星、妥布霉素、庆大霉素、阿米卡星完全敏感。鲍曼不动杆菌除了对头孢噻肟完全耐药外,对其他抗菌药物的耐药率均较低,且对左氧氟沙星完全敏感。结论 南京市儿童医院PICU医院感染菌耐药性严重,应加强病原菌耐药性的监测,为临床合理应用抗菌药物提供依据。