狂犬病防制工作不容忽视

我国在公元前300多年就有狂犬病的记载，从发现狂犬病的那一天就开始了狂犬病的防治，并且随着医学生物学的发展和新技术的应用，有关狂犬病研究的各个领域也取得了可喜的成果。如狂犬病毒全基因序列的测定和分子结构的阐明，狂犬病毒致病的分子机理日益明确和狂犬病毒基因工程口服疫苗的研究和应用。我国在狂犬病预防和研究领域也取得了可喜的成绩，如人狂犬病已从80年代的每年数千例降至目前的数百例；Vero细胞纯化狂犬病疫苗的研制成功；人腺病毒和禽痘病毒为载体表达狂犬病毒糖蛋白和/或核蛋白制备基因工程疫苗已在动物实验中证实有保护作用。与此同时我们也应看到仍有许多问题有待于继续努力和解决。     

肾综合征出血热疫苗研究现状

流行性出血热是由一种抗原性及其遗传特性相似的病毒群所致 ,又称肾综合征出血热[1 ] ,30年代在我国东北地区即有孙吴热、二道岗热、虎林热、黑河热等的称谓。至今已有70多年的历史。该病病死率高 ,严重危害着我国人民身体健康和生命安全 ,是我国重点的防治传染病之一 ,世界卫生组织将本病命名为肾综合征出血热 (hemorrhagicfeverwithrenalsyndrome ,HFRS)。 1976年 ,南朝鲜李镐旺在Hantaan河捕获的黑线姬鼠肺组织中分离到 (Koreanhemorrhagicfever,KHF)病原 ,并于 1978年证实为引起流行性出血热的病原体 ,后命名为Hantaan病毒 76～ 118…     

登革4型病毒Ban18-30减毒株的生物学特性研究

目的将登革4型病毒(DEN_4)Ban18原株及其减毒株Ban18_30株在vero细胞传代后进行生物学特性比较研究,以了解Ban18_30株的毒力和免疫原性及其是否为一株有希望的DEN_4减毒活疫苗候选株。方法Ban18原株及在原代地鼠肾细胞传代减毒的Ban18_30株在vero细胞中增殖,将两毒株进行中和实验,确证两株的型别,研究传代毒株的病毒滴度、毒力和免疫原性。结果两株病毒与抗DEN_4特异性抗体进行中和实验,中和指数≥316,证明两株病毒确为DEN_4;空斑滴定两株病毒,滴度约为2×106~2.5×106PFU/ml;Ban18_30株对乳鼠的脑内毒力较Ban18原株低,≥1.7logLD50;Ban18_30株对幼鼠脑内接种不致病,而原株的logLD50值为4.3;腹腔免疫小鼠后用原株进行脑内攻击,能够抵抗大于1 000 LD50致死剂量的病毒攻击。结论两株病毒在vero细胞内增殖良好,滴度较高,Ban18_30对乳鼠和幼鼠的致病力明显减弱,在减毒的过程中仍保留了较高的免疫原性,有望成为一株DEN_4的减毒活疫苗候选株。     

汉坦病毒四川分离株S85-46 的遗传学特征

目的：了解汉坦病毒四川分离株S85－46株分子流行病学特征。方法：将特异性引物从S85－46病毒感染细胞PCR扩增的产物克隆于T载体,正确的克隆纯化后测序,应用DNASTAR软件比较分析。结果：S85－46株M片段与HTN型毒株同源性为84．1％－99．7％,而与SEO型毒株同源率仅为70．4％－70．9％,表明S85－46毒株属HTN型。核苷酸同源性比较显示,S85－46与韩国分离的76－118株高度同源,而与国内一些HTN型病毒差异较大。而且同一地区的毒株也以差异很大。S片段全基因序列同源性比较也支持以上的观点。结论：不同地区汉坦病毒的流行株基因序列可以高度同源。     

国产新型人用狂犬病疫苗临床观察及免疫学效果评价

1994年后,我国部分狂犬病疫苗的生产厂家在中国药品生物制品检定所的倡议下,开始研究纯化狂犬病疫苗,现完成新药临床观察的有十余家企业。笔者就这些疫苗的临床效果进行综合评价。     

狂犬病疫苗质量安全性问题探讨

狂犬病是一种由狂犬病毒引起的急性大脑炎,病死率高达100%。预防狂犬病的最有效的方法是暴露后接种狂犬病疫苗.III度咬伤需联合注射抗狂犬病血清/免疫球蛋白。我国目前使用的狂犬病疫苗在预防狂犬病方面起到了重要作田,但在疫苗质量方面还有许多值得进一步探讨与提高。     

SARS-CoV蚀斑形成技术的建立

自2002年11月我国出现第一例传染性非典型肺炎(SARS)病例以来，至2003年8月已造成5000多例临床病例，其中死亡300多例，对我国国民经济和社会稳定造成了巨大影响。现在已确定了SARS-冠状病毒(SARS-CoV)为其病原体，也成功分离到多株SARS-CoV，并能在Veto细胞和2BS等细胞系中培养增殖，这为我们研发疫苗和研究病原学等方面提供了基础和基本条件。由于蚀斑试验和蚀斑减少中和试验用于测定病毒滴度和中和抗体效价的检测较其他方法准确，且特异性高，因此，用蚀斑方法可以准确测定病毒滴度、SARS患者恢复期抗体水平、疫苗免疫后的抗体产生水平以及评价疫苗的质量和有效性、抗病毒药物的筛选等。     

登革4型病毒Ban18原株及其减毒株的分子特征研究

目的 从分子水平上探讨登革4型病毒Ban18-30减毒株的毒力相关位点和减毒机制。方法 Ban18原株及Ban18-30减毒株在Vero细胞中培养增殖,收集病毒液,经RNA抽提后RT-PCR扩增C、prM、E、NS1和3′、5′端核苷酸片段并测序,比较分析结果,研究两株病毒的分子特征。结果 RT-PCR成功扩增出目的片段,对两株病毒部分基因测定序列后进行对比分析,两株病毒间在C111位和E155位各有1个氨基酸残基发生变化,在3′UTR的219位发生核苷酸改变。结论 从分子水平证明两株病毒确为DEN-4型病毒,某些基因位点的变化与Ban18-30株病毒毒力减弱有关,其中E155位的突变可能关系最大。     

汉坦病毒Z10株全基因序列的测定及分析

目的 测定我国肾综合征出血热疫苗株Z10的全基因序列，了解其分子结构特征，并分析Z10与基他汉坦病毒株的遗传差异，为疫苗生产提供依据。方法 从Z10病毒感染的细胞提取总RNA，将逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）扩增的产物纯化后克隆于T载体并进行序列测定，应用BNAS－TAR软件分析比较。结果 序列测定表明，Z10株L，M，S片段的全基因序列分别由6553，3615，1701个核苷酸组成，单一读码框架分别编码2151，1135，429个氨基酸。基因比较分析表明，Z10株与HTN型外其他汉坦病毒同源性较低，与HTN型病毒接近，但与HTN型病毒核苷酸序列的同源性亦仅为83.6%-87.4%，而其氨基酸序列的同源性高达94.2%-96%，据此绘出了三个片段的核苷酸和氨基酸的种系发生树。结论 测定了Z10株的全基因组序列，首次发现Z10株为已报道的HTN型中的另一亚型。     

肾综合征出血热山东分离株鲁宁-84刘株的分子特征分析

目的 分析肾综合征出血热山东分离株鲁宁—84刘株的分子特征。方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)扩增鲁宁—84刘株M和S片段全基因，克隆于T载体，纯化后测定序列，应用DNA STAR软件比较分析。结果 鲁宁—84刘株(JNL株)的M片段的全基因序列共3615个核苷酸，编码1135个氨基酸，S片段的全基因序列共1698个核苷酸，编码429个氨基酸，为HTN型毒株。JNL株与HTN型毒株M和S全基因序列差异分别高达20．0％-20．6％和15．5％-16．0％，基于核苷酸序列的种系发生分析结果也可以看到，鲁宁—84刘株不同于国内外其他的分离株，处于独立的分支。结论 山东地区鲁宁—84刘株流行株是与国内外HTN型毒株不同的新的HTN亚型病毒。