结核分支杆菌耐多药株katG突变SSCP技术检测的研究

目的 建立并评价ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测结核分支杆菌耐药性基因突变的方法。方法 根据ｋａｔＧ基因易变区设计一对引物,ＰＣＲ扩增,产物经沸点断裂成单链,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,比较电泳的位置。结果 ＰＣＲ检测结核菌ＤＮＡ的灵敏度达到１００个细菌／ｍｌ,与其它细菌和其他分支杆菌无交叉反应。３０株敏感株和Ｈ３７Ｒｖ的ＰＣＲ产物经ＳＳＣＰ检测正常,２０株耐异烟肼结核菌中,１９株的ＰＣＲ产物ＳＳＣＰ检测游异常电泳带     

海口地区超广谱β-内酰胺酶阳性菌检测及其流行病学分析

目的为了解海口地区超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)阳性菌的种类及其分布,为控制其扩散、预防暴发流行提供科学依据. 方法采用双纸片琼脂扩散法,测定3年中从临床各类标本分离的革兰阴性菌的ESBLs,比较菌种、病房及标本间ESBLs阳性率差异. 结果产ESBLs的菌种已达28种,阳性率最高达60%,常见菌的阳性率均达约50%,且3年间的变化多数无统计学意义;ESBLs阳性菌分离率在病室间的差异不大,门诊患者相对住院患者较低,在标本间的分布存在一定差异. 结论 ESBLs阳性菌已在海口地区广泛存在,并已成为医院及社区感染的主要病原菌,控制其进一步发展已成为一项迫在眉睫的工作.     

呼吸病患者痰培养及药敏结果分析

痰标本细菌培养与药物敏感试验 ,了解下呼吸道感染的病原菌 ,同时筛选出敏感药物 ,对临床上治疗呼吸统感染 ,尤其对反复发作的严重感染有着重要的意义。总结农垦总局医院近 1年 337例呼吸病患者的痰标本细菌培养及药物敏感试验 ,分析感染细菌谱及对抗生素的耐药的现况 ,对临床治疗有一定参考价值 ,现报道如下。1　材料与方法1.1　标本　痰液标本取自农垦总局医院近 1年住院呼吸病患者。患者于清晨用无菌水或无菌等渗盐水漱口 3次后 ,用力咳出深部的痰置无菌杯送检[1] 。昏迷病人则需使用吸引器吸引 ,送检一次性吸引管中的痰液。1.2　细菌分…     

绿脓杆菌所致感染症的现状及其初析

绿脓杆菌在自然界和人体分布很广,1882年由Gessard首次分离,1890年Charrin确认为具有致病性,但绿脓杆菌感染症在青霉素与磺胺药问世以前其发病率很低,随着抗菌药物的广泛应用,临床上引起感染症的病原菌也发生了变化。近年来,一些被认为致病力比较低的革兰氏阴性杆菌所致的感染症明显增加。据国外报导,绿脓杆菌所致感染症仅次于大肠杆菌,成为现代临床感染症     

海口地区耐药金黄色葡萄球菌检测及其流行病学分析

了解海口地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）在医院环境中的分布及其阳性率变化。1．材料与方法：菌株来自2000年1月至2003年10月在海南省农恳总局医院就诊及住院患者的各种标本，部分标本取自海口市其他几家三甲医院。MRSA测定采用NCCL推荐的高渗琼脂扩散法，苯唑西林（Oxacillin，OX）药敏纸片购自Oxoid公司。     

117例女性生殖道支原体感染与药敏试验分析

目的了解女性生殖道支原体感染与药物敏感试验情况，以指导临床合理用药。方法采用美国其昌达生物高科技（上海）有限公司生产的支原体培养试剂盒对195例女性拟诊为生殖道支原体感染的患者进行培养及药敏试验。结果195份标本中，支原体阳性117例，阳性率60％，其中解脲支原体（uu）、人型支原体（MH）及UU＋MH混合感染的阳性率分别为38．46％（75例）、3．08％（6例）、18．46（36例）。药敏结果显示：抗菌活性较强的药物有强力霉素、美满霉素、交沙霉素、克拉霉素。耐药性高的药物有林可霉素、壮观霉素等。结论女性生殖道支原体感染以UU为主，其次是UU＋MH混合感染，临床上可将强力霉素、美满霉素、交沙霉素、克拉霉素作为女性生殖道支原体感染的酋选用药。     

单链构象多态性银染技术检测结核菌katG基因变异

单链构象多态性 (ＳＳＣＰ)技术能分辨碱基不同的核酸片段 ,并应用于基因变异检测。我们根据对耐药结核菌的测序结果 ,设计了一对引物 ,建立ＳＳＣＰ检测ｋａｔＧ基因突变的方法。一、材料与方法1 菌株分离与药敏测定方法同文献 [1]。2 核酸提取 :痰液经碱消化 ,提取ＤＮＡ。方法同文献[1]。3 引物设计和ＰＣＲ扩增 :ＫＧ3:5′ ＴＣＡＣＣＡＧＣＧＧＣＡＴＣＧＡＧＧＴＣ 3′ ,ＫＧ4:5′ ＡＴＧＣＣＣＧＧＡＴＣＴＧＧＣＴＣＴＴＡ 3′。位于ｋａｔＧ的第 2 916～ 3371碱基位置 ,长度为 45 6ｂｐ。由大连宝生物技术公司合成并纯化。4 ＳＳ…     

耐药结核分枝杆菌基因变异研究

目的 研究多药结核分枝杆菌ｋａｉＧ、ｉｎｈＡ基因的变异机理。方法 用ｋａｔＧ、ｉｎｈＡ基因片引物，聚合酶链反应扩增产物，克隆后制质粒、直接测定ＤＮＡ序列。结果 １５株耐异烟肼菌株均有ｋａｔＧ基因突变，主要为点突变，其中１４株有４６３位和３１５位ＡＡＰ２密码改变，在１８个耐异烟肼菌株中，全部出现基因ｉｎｈＡ 基因变异，主要为点突和人，以单个点变异主，各菌株变异不同，ｋａｔＧ、ｉｎｈＡ基因同时出现变异     

耐多药结核杆菌分离林KatG及inhA基因变异的研究

目的用直接测序法研究临床分离的多耐药结核杆菌的katG和inhA的基因变异机理。方法用未见报还katG和inhA基因中的片须为引物，PCR法扩增产物，克隆后大量制备质粒，经全自动测序系统测定其DNA序列。结果15株耐INH≥1ug/ml的细菌均有katG突变，主要为点突变。其中14株有463位和315位AA密码子改变。13个变异位点中，9个未见文献报告。关于inhA变异，在18个耐INH≥1ug/ml的菌株中，全部出现inhA基因变异，主要为点突变和缺失，其中又以单个位点变异为主。各菌株之间变异不同。耐式菌株中，katG和inhA同时出现变异的比例较大。结论结核杆菌耐药基因变异机理复杂，我国分离的多耐药结核菌株与国外的菌株上述二基因变异特点不同。     

铜绿假单胞菌ESBLs检测及其流行病学分析

目的　为了解本地铜绿假单胞菌的耐药性及其分布情况 ,为控制和预防其流行提供科学依据。　方法　采用双纸片琼脂扩散法 ,测定 2 0 0 0～ 2 0 0 3年从临床标本分离的铜绿假单胞菌的ESBLs检测及药敏结果 ,比较该菌在病房、标本间的检出率、ESBLs阳性率、耐药性差异及年间变化。　结果　铜绿假单胞菌在各年检出的革兰氏阴性病原菌中均居第二位或第三位 ,住院标本检出率为 15 9%是门诊标本检出率 6 1%的 2 6倍 ,以五官耳鼻喉科、放疗科、康复科、心血管内科、老干病房、呼吸内科、心胸外科的呼吸道、伤口创面分泌物检出率较高。ESBLs总阳性率为 3 6 3 % ,前三年逐年下降 ( 5 7 1%～ 6 7% ) ,2 0 0 3年又呈上升趋势 ( 71 4% ) ( χ2 =3 3 163 ,P <0 0 5 )。对临床常用的氯霉素、丁胺卡那霉素、环丙沙星等均产生了很高的耐药性 ,最高达 10 0 % ,且ESBLs阳性菌株的耐药率明显高于阴性菌 (P <0 0 5或 0 0 1) ;对复合抗生素优力欣也已产生了较高的耐药性 ,对碳青霉烯类抗生素———泰能 ,复合抗生素舒普深、特治星的耐药性目前较低。　结论　铜绿假单胞菌ESBLs阳性菌在医院广泛存在 ,对临床常用的抗生素有很高的抗药性 ;应加强重点科室物表、空气和ESBLs监测及常住病人痰标本的送检 ,对阳性者作适当的隔离