多药耐药基因C3435T与G2677T/A单核苷酸多态性检测方法的探讨

目的 建立简便、快速检测多药耐药基因(MDR1)C3435T与G2677T/A单核苷酸多态性(SNPs)的方法 .方法 针对MDR1 C3435T分别设计相对的两对引物-聚合酶链反应(PCR-CTPP)、序列特异性聚合酶链反应(PCR-SSP)及DNA测序方法 的引物,针对MDR1 G2677T/A分别设计PCR-SSP和DNA测序方法 的引物,优化PCR反应条件.将PCR-CTPP和PCR-SSP方法 的基因分型结果 与DNA测序结果 进行比对,确定准确性.在优化条件下,分别对50例健康体检者的外周血白细胞DNA进行MDR1 C3435T和C2677T/A基因型分析.结果 通过条件优化,PCR-CIPP、PCR-SSP方法 可快速的清晰区分MDR1 C3435T与G2677T/A的基因型,结果 与DNA测序方法 相符合.50例健康体检个体MDR1 C3435T与G2677T/A的基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P0.05).MDR1 C3435T PCR-CTPP结合G2677T/A PCR-SSP的检测方法 为最佳选择.结论PCR-CTPP、PCR-SSP方法 可简单、准确、经济、快速地检测MDR1 C3435T、G2677T/A SNPs,具有临床应用价值.     

器官移植受者微量CMV DNA与IL-10基因单核苷酸多态性的相关性研究

目的研究白介素-10（IL-10）基因G1082A和C819T单核苷酸多态性（SNP）与移植术后外周血微量巨细胞病毒（CMV）DNA的关系。万法采集176例移植术后受者，429例次的外周血。通过巢式聚合酶链反应（nPcR）技术检测微量CMV DNA。通过序列特异性聚合酶链反应（SSP-PCR）技术检测IL-10基因G1082A与C819T的变异情况。分析IL-10各基因型在微量CMV DNA受者中的分布频率，并对阳性组与阴性组进行比较。结果研究人群中IL-10 G1082A和C819T基因型分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。CMV DNA阳性组IL-10 G1082A和C819T等位基因频率分别为G=3.75％、A=96.25％和C=32.50％、T=67.50％；CMV DNA阴性组分别为G=5.51％、A=94.49％和C=36.03％、T=63.97％。CMV DNA阳性组两SNP基因型及等位基因分布与其在CMV DNA阴性组中的分布差异无显著性（P〉0.05）。结论目前尚不能认为IL-10基因G1082A与C819T单核苷酸多态性与移植受者微量CMV DNA阳性有相关性。     

曲古抑菌素A诱导胰腺癌细胞株凋亡和Notch信号通路改变的研究

目的 研究曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)干预对胰腺癌细胞株PANC-1凋亡及相关基因表达的影响,探讨其作用机制.方法 采用0.1 ～0.4 μmol/L不同浓度TSA处理胰腺癌细胞.四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞的存活率,通过Hoechst 33258染色直接观察细胞凋亡.实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测包括Notch信号通路相关的基因、肿瘤增殖相关基因eaf2和肿瘤转移相关基因cytohesin 1、2、3、4的表达.蛋白质印迹法检测细胞caspase-3、bcl-2、bax以及Notch-1的胞内活性形式NICD蛋白表达.结果 TSA对PANC-1的增殖抑制作用呈明显浓度和时间依赖性,0.1、0.2、0.4 μmol/L TSA作用PANC-1 24 h后存活率分别为72％、58％和39％.显微镜观察发现随着TSA浓度增加和作用时间延长,PANC-1细胞死亡逐渐增加,Hoechst 33258染色可见凋亡典型特征的PANC-1细胞比例增加.TSA作用PANC-1后,蛋白质印迹法结果显示caspase-3、bax以及NICD蛋白表达增加,而bcl-2蛋白表达下降.qRT-PCR结果显示Notch通路中相关基因numb、hes6mRNA表达升高,gcn512、dll3 mRNA表达下降(P＜0.05),而Notch1 mRNA表达没有变化.肿瘤增殖相关基因eaf2以及肿瘤转移相关基因cytohesin mRNA表达未发现有变化(P＞0.05). 结论 TSA可诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡,且呈剂量依赖性.Notch通路相关基因可能参与了TSA诱导细胞凋亡的过程.     

结直肠癌患者血浆中的miR-106a表达及其与预后的关系

目的:探讨血浆miR-106a水平与结直肠癌(CRC)患者预后生存的相关性。方法:收集60例健康体检志愿者(对照组),103例就诊我院的CRC患者(病例组),对所有人均进行血浆miR-106a实时荧光定量聚合酶链反应(real time-PCR)检测,同时采用Kaplan-Meier进行生存分析。结果:①血浆miR-106a在CRC组较对照组表达明显升高(P=0.004),与是否发生淋巴结转移有关(P=0.033);且患者术后miR-106a明显降低(P<0.001)。②对入院时CRC患者根据miR-106a相对值进行分组,miR-106a高值组术后3年内癌复发率高于低值组(P<0.001);K-M分析则显示高值组术后3年生存率低于低值组(P=0.003)。结论:血浆miR-106a的测定有助于CRC的诊断,且与CRC的复发转移有一定关系。     

胃癌及癌旁组织中分泌性白细胞蛋白酶抑制因子SLPI的表达

维持胃黏膜的正常结构依赖于胃黏膜细胞的凋亡和增殖的动态平衡,这一平衡的失调被认为是胃癌发生及发展的重要机制.分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(secretory leukocyte peptidabe inhibitor,SLPI)属于Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂家族,具有调控细胞分化增殖的能力[1].本研究拟通过对胃癌患者组织标本中SLPI表达水平的研究,评价其在胃癌发生、发展中的作用.     

谷胱甘肽转硫酶T1、P1和M 1基因多态性与马兜铃酸肾病的关系

2000

2.0.TX;2-R.aspx'>Urotheliai lesion in Chinese-herb nephropathy [其它论文] 1999

Aristolochic acid as a probable human cancer hazard in herbal remedies:a review 2002

Pathologic aspects of a newly described nephropathy related to the prolonged use of Chinese hetbs 1994

Onaran I.Cuven G.Ozaydin A The influence of GSTM1 null genotype on susceptibility to in vitro oxidative stress [其它论文] 2001

Hirvonen A Polymorphisms of xenobiotic-metabolizing enzymes and susceptibility to cancer [其它论文] 1999(zl)

Pemble S.Schroeder KR.Spencer SR Human glutathione S-transferase theta (GSTTl):cDNA cloning and the characterization of a genetic polymorphism 1994

Harries LW.Stubbins MJ.Forman D Identification of genetic polymorphisms at the glutathione S-transferases Pi locus and association with susceptibility to bladder,testicular and prostate cancer [其它论文] 1997

苏涛.屈磊.张春丽 马兜铃酸Ⅰ在大鼠体内的代谢特征研究 [其它论文] -中国中药杂志2004

Jeronimo C.Varzim G.Henrique R I105V polymorphism and promoter methylatinn of the GSTP1 gene in prostate adenocarcinoma 2002

Sweeney C.Farrow DC.Schwartz SM Glutathinne Stransferase M1,T1,and P1 polymorphisms as risk factors for renal cell carcinoma:a case-control study 2000

Zhong S.Wyllie AH.Barnes D Relationship between the GSTM1 genetic polymorphism and susceptibility to bladder,breast and colon cancer 1993

Garte S.Gasped L.Alexandrie AK Metabolic gene polymorphism frequencies in control populations [其它论文] 2001

>>更多...     

MAL基因在胃癌组织中的甲基化及其mRNA的表达

目的:研究MAL基因在胃癌和癌旁组织中的甲基化状态及其mRNA表达.方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)和实时荧光定量RT-PCR法检测37例人胃癌组织及对应癌旁5 cm组织中MAL基因的甲基化状态和mRNA表达,并分别将其与各临床病理指标进行统计学分析.结果:37例胃癌组织中MAL基因甲基化率为78.4%.对应37例癌旁组织中MAL基因甲基化率为5.4%.癌组织与癌旁组织的甲基化率差异有统计学意义(P<0.01).胃癌组织中MAL基因甲基化状态与患者年龄、性别、肿瘤大小、有无淋巴结转移、胃癌分化程度、临床分期无统计学意义(P>0.05).在胃癌组织与对应癌旁组织中MAL基因mRNA定量表达差异有统计学意义(P<0.05),胃癌组织中MAL基因mRNA定量表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、胃癌分化程度、有无淋巴结转移、有无神经束浸润及肿瘤TNM分期无相关(P>0.05).结论:胃癌组织中MAL基因表达缺失或低下,并且存在高甲基化率,MAL基因发生甲基化可能与胃癌发生有关.     

人前列腺炎组织中α1肾上腺素能受体亚型mRNA的表达

目的：研究Ⅲ型前列腺炎患者α1肾上腺素能受体（α1-AR）亚型在前列腺组织的mRNA的表达。方法：经会阴穿刺获得40例Ⅲ型前列腺炎患者的前列腺组织,用逆转录聚合酶链反应检测3种α1-AR亚型的mRNA含量。结果：40例患者中Ⅲa型22例,Ⅲb型18例;病理呈CP者33例,正常者7例。α1a-AR、α1b-AR和α1d-AR含量分别为0.26±0.04,0.17±0.04和0.17±0.03,三者的比例为44：27：29。α1a-AR与α1b-AR及α1d-AR的含量差异有显著性（P〈0.05）,α1b-AR与α1d-AR的含量差异无显著性（P〉0.05）。各受体亚型在Ⅲa组和Ⅲb组,病理呈CP组和病理正常组之间比较无显著性差异（P〉0.05）。结论：本研究表明在国人的前列腺炎组织中,α1-AR受体亚型的表达以α1a-AR mRNA含量最高,在前列腺平滑肌的收缩中起主要作用。     

移植肾功能延迟恢复与供者谷胱甘肽硫转移酶多态性的研究

目的 探讨影响移植肾功能延迟恢复(DGF)的相关因素.方法 收集肾移植受者150例临床资料.其中24例发生DGF,对可能影响DGF发生的各项指标进行统计学分析.提取移植肾供者172例和健康体检者157例外周血中基因组DNA,应用多重PCR和特异性引物多态PCR技术检测谷胱甘肽硫转移酶(GST)基因多态性,比较DGF和无DGF组供者GST基因多态性的差异.结果 受者DGF组和非DGF组性别(χ~2=0.028,P=0.867)、PRA(χ~2=1.564,P=0.211)及透析类型(χ~2=0.585,P=0.444)之间比较差异无统计学意义(P>0.05);单因素线性回归分析提示术后第2个24 h尿量、第1和第2个24 h入量与T_(1/2(SCr))间存在线性关系(P<0.05),Cox风险比例回归模型提示术后第2个24 h尿量可判断受者移植肾功能的恢复情况(RR=1.002,P=0.001).DGF组供者GSTMl基因型缺失频率为86.4%,与未发生DGF组的62.7%、健康对照组的47.8%比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 受者术后第2个24 h尿量对预测DGF的发生有重要意义.供者GSTMl基因型缺失可能是发生DGF的原因之一.