改良ELISA用于测定痢疾菌及EIEC毒力的研究

在痢疾菌、EIEC的研究和鉴定工作中,常用豚鼠角膜试验或细胞学方测定其毒力。但这些方法或需要动物或需要一定的细胞培养技术,而且费时。我们参照文献,初步建立了用改良的酶免疫吸附试验测定上述菌株毒力的方法。用有毒力的痢疾福氏2a-153和EIEC     

Vero细胞检测出血性大肠杆菌O157:H7毒素的方法研究

目的建立用Vero细胞检测大肠埃希菌毒素的方法。方法用两种不同的培养基培养10株大肠杆菌和1株痢疾志贺杆菌,将其培养物上清和菌体裂解液加入Vero细胞中,观察对Vero细胞的毒性作用。结果两种培养基培养大肠杆菌产生的上清对Vero细胞的毒性作用差异不大,大肠杆菌培养上清的毒性作用大于菌体,而痢疾志贺菌菌体的毒性作用大于上清。结论Vero细胞毒性检测方法可以用于检测出血性大肠杆菌细胞毒素。     

Vi抗原研究进展

Vi抗原是伤寒杆菌、丙型副伤寒杆菌和枸橼酸菌属某些血清型的表面抗原.自从1934年Felix首先发现Vi抗原以来,迄今做了大量的研究工作,现将有关资料综述如下.Vi抗原的理化及生物学性质Vi抗原是一种高度聚合的酸性多糖,由N-乙酰-氨己糖醛酸组成,分子量为10~6左右.用超声波处理弗劳地枸橼酸杆菌Vi抗原后,其比粘和相对粘滞度均降低.经处理的Vi抗原糖苷键断裂,发生部分解聚,分子量从10~6降到10~4.用温和的酸碱处理Vi抗原,     

伤寒Vi多糖菌苗人体接种反应与血清学观察

1993年3～10月在江苏省宜兴市对我国研制成功的伤寒Vi多糖菌苗以不同浓度不同注射途径进行接种反应及血清学效果观察,并以伤寒菌苗及Vi多糖菌苗的稀释液作为对照。结果表明30μg皮下组最优,其体温中反应率为2.59%,局部红肿的中和反应率24小时仅2.59%48小时全部消退。接种前GMT为5.43,接种后1个月上升到50.18四倍增长率达91.6%,接种后6个月仍保持在38.18。30μg肌肉组接种反应与30μg皮下组相似,但抗体水平的下降幅度较后者快。20μg皮下组的接种反应不比30μg皮下组轻,接种后1个月的GMT较后者低。伤寒菌苗组局部中强反应率显著高于Vi菌苗各组。笔者认为Vi多糖菌苗全身和局部反应是轻微的,免疫原性是好的,初次接种只需注射一针次,该苗在伤寒预防上有着广阔的前景。     

宋氏I相/福氏~(1b)痢疾双价抗原菌株的构建(简报)

1980年Kopecko等人证明了凡是强毒宋内氏痢疾杆菌都含有一个非诱动性的120Md大质粒,它编码宋氏Ⅰ相抗原并与该菌侵入上皮细胞的关系非常密切。用转座子插在大质粒上使其获得抗药性遗传标记,再通过诱动系统诱动,可将此大质粒转移给适当的受体菌株。     

宋氏I相/福氏1b痢疾双价抗原菌株的构建

以菌体内重组方法将脱失了部分毒力基因片段的宋氏痢菌Ⅰ相抗原质粒诱动到已脱失140Md毒力质粒的福氏痢菌1b中,构建成兼具福氏及宋氏“O”抗原的二价菌株。该菌株不含编码卡那霉素抗性基因的Tn5;连续传25代仍对宋氏及福氏1b痢菌O抗血清呈凝集反应;质粒电泳图显示该二价菌株拥有供体菌赋予的75Md的质粒带。     

伤寒Vi多糖菌苗流行病学效果

本文对我国伤寒Ｖｉ多糖菌苗研制协作组制备的伤寒Ｖｉ多糖菌苗进行接种反应及流行病学效果观察，并以其稀释液作为对照，对７７７名接种者的反应观察结果表明，菌苗组发热轻、中反应率分别为１６．９３％和０．０５％，对照组分别为１５．０１％和０．０３％，两者发热反应率无显著差异。菌苗组仅出现两例局部轻反应。对８１５０６名接种者的流行病学观察，以血培养伤寒杆菌阳性作为病人诊断标准，菌苗的保护指数为３．４９，保护率为７１．３５％，总的保护指数为４．５８，保护率为７８．１７％。临床资料显示，接种组发病者的发热强度明显低于对照组发病者。笔者认为伤寒Ｖｉ多糖菌苗全身、局部反应轻微，安全性好，保护率较高，发病者可降低发热强度，且初免只需注射一针，是一种值得推广使用的新一代菌苗     

空肠/结肠弯曲菌的血清学分型

按Penner血清分型方法,应用被动血凝试验对349株空肠/结肠弯曲菌进行了分型,其中病人287株,可分型208株(72.5%);健康带菌者17株,可分型11株(64.7%);动物45株,可分型32株(71.1%)。说明Penner血清分型法在我国基本适用,但我国还有新的血清型存在。可分型的菌株共达57个不同的血清型,与国外集中于2、4和3型的报道不一致。从动物菌株的血清分型提示鸡与人的关系比较密切,可能是人类空肠弯曲菌肠炎的主要传染源之一。     

大肠杆菌O157:H7 VT2毒素基因的克隆及测序

目的 克隆出血性大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７的ＶＴ２毒素基因。方法 利用ＰＣＲ技术从出血性大肠杆菌Ｏ１５７：Ｈ７染色体基因组中扩增出ＶＴ２毒素基因。并连接至ｐＧＥＭ－Ｔ载体上,构建重组质粒ｐＧＶＴ２并进行序列测定。结果与结论 酶切分析表明重组质粒含有ＶＴ２毒素基因,核苷酸序列分析表明,其序列与ＧｅｎＢａｎｋ上Ｏ１５７：Ｈ７的ＶＴ２毒素基因一致。