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目的探讨高危型HPV-16E6在树突细胞中的定位。方法构建真核表达载体pGFP-16E6,转染小鼠骨髓源性的树突细胞,在荧光显微镜下动态观察高危型HPV-16E6蛋白在树突细胞内的定位和表达水平。结果树突细胞在分别转染pGFP-16E6和pEGFP-C1质粒后,GFP-16E6主要定位于细胞核内,而对照组的只表达GFP的蛋白则均匀分布于树突细胞。蛋白表达水平的检测表明,在转染树突细胞后的12h,GFP-16E6和GFP蛋白开始表达(荧光强度分别为31.29,39.52),转染后至24h,蛋白表达均到达高峰(荧光强度分别为119.37,134.23),24h后,蛋白表达逐渐降低。结论 HPV-16E6主要定位于树突细胞核内,随时间其蛋白表达水平不同,这为HPV E6的树突细胞疫苗发挥有效的抗癌作用提供理论依据。 相似文献
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本文报告“霍乱一步法快诊试剂”在国内部分地区现场应用及与常规分离鉴定法的比较结果。共观察了 79份粪便标本直接使用“一步法快诊”的检测结果及 47份标本增菌 6 - 8小时后同样用该法的检测结果。现场考查表明 ,一步快诊法适用于检查急性期病人 ,从粪便标本中不仅能查出活菌 ,还能检查就诊前服用过抗菌药物的患者 ,其检出率高于常规培养法 (χ2 =17 2 5P <0 0 0 5 ) ;而增菌后标本的一步快诊法能得到和常规法完全相同的特异性与敏感性 ,可用于检定轻型病人和健康带菌者 ,但比常规法简便、快速。 相似文献
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目的 建立以Taqman实时PCR检测河弧菌的方法.方法 根据河弧菌toxR基因的保守序列设计引物和Taqman探针,建立检测河弧菌的实时PCR方法;对引物和探针的浓度进行优化,对优化后建立的方法分别进行实验室内的灵敏度和特异性评价,并与常规PCR比较.结果 建立了检测河弧菌的实时PCR方法,经优化该方法选择引物的浓度为100 nmol/L,探针浓度为200 nmol/L;该方法对纯菌的检测下限为4.17×102cfu/mL,比常规PCR高1000倍;针对toxR基因建立的河弧菌实时PCR方法,对8种其他弧菌和肠道细菌的染色体无扩增.结论 建立的方法能够特异和敏感地检测河弧菌,可用于河弧菌的快速筛检. 相似文献
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埃尔托型霍乱弧菌模拟越冬中的超微结构观察—纤细状体与细菌体的交替生长现象 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨埃尔托型霍乱弧菌(EVc)在流行间歇期的保菌越冬及流行期的复苏,为霍乱的防治提供依据。方法 运用电镜、荧光显微镜、普通显微镜等检测方法,对埃尔托霍乱弧菌在模拟越冬中的超微结构进行了观察研究。结果 研究发现,进入低温低营养条件后,EVc在模拟水体中以纤细状体和正常弧菌的交替生长形式存在,在此过程中,大部分细菌自溶,向环境提供营养成分,少部分通过潜-生序的变化得以存活,细菌群体在两种形式的演变中显示一定的有序性。纤细状体与细菌体的交替变化通过一系列的变异形式,包括圆球状体、巨形体、原生小体和革兰阳性小细胞等。结论 本实验不仅对霍乱弧菌的越冬机理作出解释,而且观察到革兰阴性菌在不利条件下的一种细胞多分裂增殖方式,这种方式在自然界中可能普遍存在。 相似文献
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目的观察猪溶素(Suilysin,SLY)及其无溶血活性的突变体诱导小鼠腹腔巨噬细胞(peritoneal macrophage,PM)释放IL-1β和细胞毒的差异,为进一步研究SLY诱导炎性体激活通路奠定基础。方法重组表达纯化SLY及第353氨基酸位点突变体rSLY353L,体外和小鼠PM相互作用,用乳酸脱氢酶释放法检测细胞毒作用,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-1β的水平。结果不同浓度rSLY(0.1~10μg)诱导小鼠PM细胞毒性呈现明显的剂量效应,rSLY(1μg/ml)诱导产生750 pg/ml的IL-1β同时细胞毒20%;rSLY(5μg/ml)可引起最大量的IL-1β释放但细胞毒高达90%。相同剂量的rSLY353L不能诱导可检测到的IL-1β和细胞毒性。rSLY与PM共孵育20 h IL-1β产量最高,20 h后IL-1β产量下降但细胞毒性随孵育时间延长而增大。结论 1μg/ml SLY和PM作用20 h可诱导较高的IL-1β产生同时细胞毒性较低,该实验条件适用于进一步进行SLY激活PM炎性体信号通路的机制研究。 相似文献