人精子体外氧化损伤对线粒体tRNA~(LeuUUR)基因的影响

目的:探讨活性氧(ROS)对人类精子线粒体tRNALeuUUR基因的氧化损伤。方法:采用Percoll梯度离心法筛选具有正常生理功能的精子,作为正常精子模型,并分为损伤组20例和对照组20例,分别加入次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系或不予处理,37℃有氧环境中孵育60min。分别提取精子DNA,以Fpg酶切损伤碱基并采用接头介导PCR(LM-PCR)检测线粒体tRNALeuUUR基因的氧化损伤。采用Rhodamine(Rh123)荧光探针标记精子,通过流式细胞仪检测线粒体膜电位,观察精子的功能。结果:与对照组相比,损伤组精子孵育后线粒体膜电位明显降低[(116.27±11.72)%vs(64.00±4.88)%,P<0.05]。Fpg酶切和LM-PCR显示精子线粒体tRNALeuUUR基因损伤。结论:ROS可能通过对精子线粒体tRNALeuUUR基因氧化损伤而影响精子功能(线粒体膜电位明显降低),从而引起不育。     

冠心病患者血清对氧磷酶活性的测定

目的探讨冠心病患者血清对氧磷酶1活性及其与冠心病之间的关系。方法选择冠状动脉造影确诊的冠心病患者106例和非冠心病组62例,用乙酸苯酯法和比色法分别测定两组血脂、血清对氧磷酶1活性、超氧化物歧化酶及丙二醛含量,并进行对比分析。结果冠心病组血清中对氧磷酶1活性和超氧化物歧化酶水平分别为113±64μkat/L和43.8±8.2 kU/L,均较对照组降低(134±72μkat/L和63.4±5.7 kU/L)(P<0.05);而丙二醛含量较对照组升高(9.4±1.8μmol/L比4.1±0.5μmol/L,P<0.01)。对氧磷酶1活性与高密度脂蛋白和超氧化物歧化酶水平呈正相关,与丙二醛水平呈负相关。冠状动脉狭窄者对氧磷酶1活性较无狭窄者明显减低(P<0.001),2、3支血管病变者较1支血管病变者对氧磷酶1活性降低(P<0.05)。结论冠心病患者血清对氧磷酶1活性降低,低对氧磷酶1活性与冠心病严重程度有关。     

大便隐血邻甲苯胺法与金标试纸法假阳性/假阴性原因探讨与分析

目前临床检查大便隐血主要有三种方法：化学法、单克隆血红蛋白抗体法及人血红蛋白联合转铁蛋白法。人血红蛋白联合转铁蛋白法因试剂昂贵，使用较少。笔者使用邻甲苯胺化学法、单克隆血红蛋白抗体金标试纸法多年，并进行了大量对比分析，发现两种方法各有长处，同时也存在着一定的局限性。当粪便中血红蛋白〉1．0μg／ml时，两种方法均为阳性；当血红蛋白〈1.0μg／ml时．邻甲苯胺法则不敏感，而金标法只要人血红蛋白浓度少量到0.1μg／ml时，它也能检测出来，     

计算机辅助精液分析男性不育患者精子运动参数与精子活力的相关性

目的探讨计算机辅助精液分析精子运动参数在评价男性不育患者精子活力中的价值。方法按《WHO人类精液及精子-宫颈黏液相互作用实验检验手册》标准,采用国产WLJY-9000伟力彩色精子质量检测系统对276例男性不育患者的精液进行平均直线运动速度、平均曲线运动速度、运动的前向性、运动的直线性、运动的摆动性、平均路径速度、精子活力及分级等进行检测并分析其相关性。结果276名男性不育患者的平均精子活力为（48.93±19.10）%,分级为A级（32.11±17.25）%、B级（17.03±8.91）%、C级（10.14±5.99）%。平均直线运动速度、平均曲线运动速度、运动的前向性、运动的直线性、运动的摆动性、平均路径速度与精子活力的相关系数分别为0.60（P〈0.01）、0.59（P〈0.01）、0.51（P〈0.01）、0.55（P〈0.01）、0.52（P〈0.01）、0.67（P〈0.01）。结论计算机辅助精液分析精子运动参数平均直线运动速度、平均曲线运动速度、平均路径速度是反映精子活力的有效指标,精子运动参数对男性不育的诊断和生育能力的评估具有实用意义。     

β-连环素和锌指E盒结合的同源盒蛋白1在膀胱癌组织的异常表达及意义

目的检测β连环素(β-catenin)和锌指E盒结合的同源盒蛋白1(ZEB1)分子在膀胱癌组织中的表达,分析二者的关联及其在膀胱癌发生、发展中的作用。方法收集79例手术切除的膀胱癌组织标本,应用EnVision免疫组化检测β-catenin、ZEB1蛋白的表达及分布。分析二者的相关性,并探讨其与患者临床病理特征之间的关系。结果β-catenin在膀胱癌组织中的表达具有明显的异质性,可分布在胞膜、胞质或胞核内,在较低临床分期和较低病理分级膀胱癌中主要以胞膜和胞质表达为主,而在较高临床分期和较高病理分级膀胱癌中主要以胞质和胞核表达为主;ZEB1在膀胱癌组织中表达主要位于胞核中,并且表达强度随着肿瘤病理分级和临床分期的增加而升高,二者表达具有明显的相关性。结论膀胱癌组织中β-catenin和ZEB1的异常表达与肿瘤临床分期、病理分级及有无淋巴结转移相关,且β-catenin和ZEB1的表达具有明显的相关性,二者联合应用,对膀胱癌的准确诊断和预后分析有一定价值。     

PrLZ基因3′-UTR区荧光素酶报告基因载体的构建及活性检测

目的分析前列腺亮氨酸拉链(PrLZ)基因3′非编码区(3′-UTR)可能的微小RNA(miRNA)调控位点,构建PrLZ基因3′-UTR荧光素酶报告载体,为研究PrLZ基因转录后的miRNA调控提供有效的工具。方法使用PCR方法从PrLZ阳性的C4-2细胞中扩增含PrLZ基因3′-UTR区序列,插入到T-Vector载体上,提高PCR产物的连接、克隆效率,通过Xbal和BamHI限制性内切酶双酶切后将其连入经相同内切酶双酶切后的荧光素酶报告基因载体pLUC中,构建pLUC-PrLZ 3′-UTR载体,使用生物信息学方法预测PrLZ基因3′-UTR可能是miR-34a的作用靶点,使用慢病毒载体构建对照载体(质粒名称-NC)和过表达miR-34a(质粒名称-miR-34a),包装成病毒颗粒后分别感染293-T细胞,然后通过X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent转染试剂将pLUC空质粒和pLUC-PrLZ 3′-UTR重组质粒分别转染293-T细胞,Promega试剂盒测定荧光素酶的活性。结果得到含PrLZ基因3′-UTR序列的荧光素酶报告重组质粒,并用凝胶电泳和基因测序的方法验证了其序列的正确性。在miR-34a高表达组的293-T细胞中,重组质粒组荧光素酶活性比空质粒组低40%,差异具有统计学意义(P0.05)。结论成功构建PrLZ基因3′-UTR荧光素酶报告载体,miR-34a可以显著降低荧光素酶的活性,PrLZ基因3′-UTR上可能有miR-34a的调控作用靶点。     

矫形器介绍(二)

脊柱过伸矫形器主要用于限制脊柱运动，辅助稳定病变关节减轻局部疼痛，减少椎体承重，促进病变愈合，支持麻痹的肌肉，预防和矫正畸形。因其限制活动的范围向上达上腰段和胸段，可以减轻腰椎体和胸椎下部椎体的负荷，并对椎体进行固定。矫形器的框式支撑结构限制了躯干的...     

高压低频交流电场治疗神经衰弱40例

神经衰弱是临床上较常见的一种疾病，往往造成患工作和生活上的很多困难和痛苦。我科自1995年8月至1996年12月对40例神经衰弱的患，应用了高压低频交流电场进行治疗。疗效满意，报告如下。     

头体针交替治疗脑源性偏瘫45例疗效分析

脑源性偏瘫严重危害着人们的身心健康，如何使患重返社会，已日益受到临床康复医学的重视。自1992年以来，采用头体针交替针刺治疗45例脑源性偏瘫．经临床观察治疗效果显，现总结如下。     

有下尿路症状的前列腺增生人群临床症状参数与血清PSA值之间的关系

目的:探讨有下尿路症状(LUTS)的前列腺增生(BPH)人群年龄、前列腺体积、残余尿、国际前列腺症状评分(IPSS)、最大尿流率对血清前列腺特异性抗原(PSA)值的影响,寻找影响血清PSA值的最主要因素。方法:应用酶联免疫法测定了191例51～81岁有LUTS的BPH人群血清总前列腺特异性抗原(TPSA)、游离前列腺特异性抗原(FPSA)值。应用直线相关统计学方法分析年龄、前列腺体积、残余尿、IPSS评分、最大尿流率与血清PSA值的相关性。结果:年龄与TPSA、FPSA、前列腺特异抗原密度(PSAD)成正相关关系(P<0.05);与FPSA/TPSA无相关性(P>0.05)。前列腺体积与TPSA、FPSA呈强正相关关系(P<0.01);与FPSA/TPSA值呈弱负相关关系(P<0.05)。残余尿量、IPSS评分与血清TPSA值呈弱正相关关系(P<0.05)。最大尿流率和血清TPSA值有弱负相关关系(P<0.05)。多元线性回归分析得出只有前列腺体积与血清PSA值有相关性(P<0.01),其他因素与血清PSA值之间均没有相关性(P>0.05)。结论:前列腺体积是导致血清PSA值变化的最主要因素。