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1.
为阐明O139霍乱弧菌的主要分子生物学特征,并为探讨其来源提供科学依据,应用核酸脉冲场凝胶电泳、基因探针Southern杂交等方法,对国内外分离的23株O139菌和一些O1群菌株进行分析。结果表明,所有O139菌株均表现为一致的且具有特征性的酶切图谱;它们与埃尔托型流行株的图谱较与古典型菌株图谱更为相似,与埃尔托非流行株和其他非O1菌株的遗传差异较大。在SmaI图谱中,新疆分离的O139菌株显示出与当地1989年分离的埃尔托型流行株较接近的图谱;Southernblot结果显示在不同的酶切图谱分子杂交(SmaI、SalI、XbaIctx,BglI16srRNA)中,O139菌株与O1流行株之间有一定的差异;我国分离的O139菌株具有一致的图谱,与印度和孟加拉国分离的O139菌株之间有较小差异;新疆分离的O139菌株与该地1989年分离的某些EVC流行株的图谱相似。基因检测表明,O139菌株都具有ctx、zot、ace和RS1;MEE分析表明,O139菌株的ET型与EVC流行株不可区分。  相似文献   
2.
1 前言 医疗服务行业事关人的生命、健康,是公认的高风险行业。医疗服务的安全性和质量控制至关重要。据报道,美国每年约有10万人死于完全可避免的医疗差错(error in hospitals)(大大超过车  相似文献   
3.
利用PCR扩增标记的Dig-dUTP-16SrRNA基因为探针,分析我国不同时间和地区分离的119株伤寒沙门氏菌和1株鼠伤寒沙门氏菌染色体经PstⅠ消化后的16SrRNA基因限制性图谱。结果发现,各菌株的杂交片段范围为7.0~26.5kb,每个菌株有5~10条杂交带不等。通过对每个菌株的杂交结果进行数值分类,119株伤寒沙门氏菌可分为38个RTs,其中新疆伊犁1991年流行菌株和大连1990年爆发菌株大部分(13/20)为同一RT;从国内各高发省份分离的一些流行株也有相同的RT;而一些地区的散发菌株具有独特的RT;鼠伤寒沙门氏菌的RT则更为特别。对39个RTs,进行聚类分析发现:国内的一些流行菌株,爆发菌株在遗传距离0.55处聚成一大类;而散发菌株,非流行菌株则在0.70处聚成另一类。此外,从健康带菌者分离的菌株251所具有的RT单成一类。鼠伤寒沙门氏菌的距离更远。  相似文献   
4.
霍乱弧菌溶原性噬菌体CTXΦ的氯霉素抗性基因标记及诱导   总被引:9,自引:0,他引:9  
目的 对携带霍乱毒素基因的溶原性噬菌体CTXΦ进行遗传标记 ,以深入研究CTXΦ对霍乱弧菌的转染机制。方法 将CTXΦ基因组中ctxAB的上下游同源序列连接到cat基因的两侧 ,然后通过自杀质粒介导的DNA同源重组技术将霍乱菌株N16 96 1染色体上CTXΦ基因组中的ctxAB基因缺失掉 ,替换以氯霉素抗性基因 ,对CTXΦ基因组进行遗传标记 ,然后用丝裂霉素C诱导这种经抗性基因标记的噬菌体 ,再利用它对古典型霍乱弧菌的转染检测活性。结果 获得了ctxAB缺失、带有cat遗传标记的重组菌株N Φc;诱导出的CTXΦc噬菌体颗粒成功感染了霍乱菌株 1119。结论 N Φc中的CTXΦ带有了氯霉素抗性标记 ,诱导出具有感染活性的CTXΦc可用于研究毒力基因的水平转移  相似文献   
5.
O139霍乱弧菌CTAKΦ的基因水平转移的研究   总被引:2,自引:1,他引:1  
目的 探讨CTAKΦ介导的霍乱弧菌毒素基因水平转移。方法 用抗生素敏感试验筛选出几组基因水平转移试验组合的供、受体菌,以便于用抗性筛选来确定基因转移的情况。在这几组试验组合中分别用接合转移、上清水平转移、培养液水平转移的方法,检查供体菌将CTAKΦ的A^RK^R抗性转移给受体菌的能力。结果 供体菌FJ97129、DX29能通过多种转移方式,以很高的频率将CTAKΦ的A^RK^R抗性转移给受体菌HK42、XJ93172、GD3188、7763、569B和94001;而受体菌IEM101对CTAKΦ有一定的抗感染能力。结论 CTAKΦ能够介导霍乱弧菌中霍乱毒素基因的水平转移。  相似文献   
6.
一种新的编码霍乱毒素的丝状噬菌体CTAKΦ   总被引:3,自引:1,他引:2  
目的 探讨介导霍乱弧菌毒素基因水平转移的一种独特的遗传结构。方法 从O139群霍乱弧菌菌株FJ97129上清中分离出丝状噬菌体颗粒CTAKΦ,并进行电镜观察。从丝状噬菌体颗粒CTAKΦ中纯化出DNA,并进行链型分析。对pCTAK进行酶谱分析。用ctxAB、zot引物对pCTAK进行PCR扩增检测,用RS1探针对pCTAK进行Southern blot检测;用pCTAK转化DH5α和IEM101得到DX29和4329,将pCTAK克隆于pUC18载体并转入DH5α得到UD29,用GM1-ELISA检测DX29、4329、UD29的CT表达。对pCTAK的ctxAB、zot基因片段进行测序,并用DNASTAR软件和BLAST算法,在国际互联网上对测序结果进行序列分析。结果 发现和分离了一种编码霍乱毒素的质粒pCTAK,它以稳定的高拷贝数存在于1株天然的O139霍乱弧菌FJ97129中;酶谱分析发现其明显不同于CTX元件酶谱,在CTX元件中相当保守的酶切位点:BglⅡ、EcoRⅤ、PstⅠ、EcoRⅠ,在pCTAK中没有切点。ctxAB、zot引物对pCTAK的PCR扩增检测呈阳性,RS1探针杂交呈阳性;pCTAK的ctxAB、zot基因序列与已报道的序列有很高的同源性。pCTAK能直接或经载体转化DH5α和IEM101并表达CT。从FJ97129培养上清中分离出丝状噬菌体颗粒CTAKΦ,电镜观察并计算其直径大小为7nm左右。其全基因组大小为8.5kb,为单链DNA。结论 发现了一种新的编码霍乱毒素的丝状噬菌体CTAKΦ。  相似文献   
7.
8.
卫生技术是指用于卫生保健领域和医疗服务系统的特定知识体系,包括药品、器械设备、医疗方案、技术程序、后勤支持系统和行政管理组织等,是所有川于疾病预防、筛查、诊断、治疗和康复及促进人民健康的技术手段。卫生技术评估(Healthtechnology assessment,HTA是指运用循证医学  相似文献   
9.
El Tor型霍乱弧菌口服活疫苗候选株IEM108的构建   总被引:1,自引:1,他引:0  
目的 构建能够诱导抗菌抗毒素免疫和抵抗CTXΦ转染的霍乱弧菌生物安全性口服活疫苗候选株。方法 以不产毒的EI Tor型霍乱弧菌疫苗候选株IEMl01为出发菌株,以管家基因thyA为选择压力,在IEMl01的thyA基因缺失株IEMl01-T中,通过质粒.染色体致死平衡系统表达霍乱毒素B亚单位基因ctxB和介导CTXΦ噬菌体免疫的rstR基因。在家兔模型中,通过检测血清杀弧菌抗体和抗CTB的IgG抗体来评价该新建疫苗候选株的免疫原性;以对家兔攻毒试验后肠段积液量来评价其保护力。结果 含ctxB、rstR和大肠杆菌来源的thyA基因的重组质粒在:IEMl01-T中稳定存在,GMI-ELISA检测ctxB基因能够很好表达。动物试验表明,该新建疫苗候选株能刺激机体产生高滴度的血清杀弧菌抗体和抗CTB IgG抗体,能较好抵抗至少4μg纯品CT和不同毒株的攻击。结论 应用质粒.染色体致死平衡系统构建了能抵抗CTXΦ转染和稳定表达ctxB的生物安全性抗菌抗毒口服活疫苗候选株,其在家兔模型中有较好的免疫原性和保护力。  相似文献   
10.
技术评估和技术管理在我国产前诊断服务中的应用   总被引:4,自引:1,他引:3  
本文通过介绍产前诊断技术管理办法及其相关附件的出台过程,说明卫生技术评估和卫生技术管理在产前诊断领域内的实际运用,对如何实现卫生技术评估和技术管理一体化的模式作了详细阐述,并对这种模式在我国卫生技术管理中的作用和发展方向进行了前瞻。  相似文献   
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