家兔急性肺栓塞对肺血管内皮细胞超微结构及血清一氧化氮含量的影响

目的 探讨急性肺栓塞（APE）对肺血管内皮细胞（PVECs）的结构及血清一氧化氮（NO）含量的影响。 方法 19只日本大耳兔，随机分成假手术组、栓塞2 h、4 h组(n=3)和8 h组（n=10）。通过输入自体血栓建立家兔急性肺栓塞模型后，采用HE染色光学显微镜下观察肺的病理组织学变化；透射电子显微镜下观察PVECs在肺栓塞2 h、4 h及8 h的超微结构变化；硝酸还原酶法测定相应时间点血清NO含 结果 HE染色显示栓塞组肺动脉内有血栓，肺间质炎性病变，肺淤血；透射电子显微镜显示，栓塞组PVECs水肿、破裂，线粒体肿胀，内质网空泡化，并随栓塞时间延长PVECs出现坏死脱落，细胞器溶解。肺栓塞2 h、4 h和8 h血清NO含量均低于栓塞前，与栓塞前比较差异有显著性意义（P＜0.05）。 结论 家兔APE可致PVECs超微结构改变和血清NO含量下降，且两者间关系密切。     

二花地龙胶囊治疗兔腰椎间盘突出症的实验研究

目的 观察二花地龙胶囊对兔椎间盘突出症模型肿瘤坏死因子α (TNF-α)活性的影响,进一步研究其作用机制.方法 选取健康日本大耳白家兔80只,采用随机数字分组法分为正常对照组1、正常对照组2,造模l、2、3、4、5、6组(每组10只,雌雄各半).造模组采用纤维环穿刺法,建立兔腰椎间盘突出症动物模型.造模成功后,将造模1、2、3、4、5组分别作为:自然恢复组(即模型组)、阳性对照组(简称对照组)和二花地龙胶囊高、中、低剂量组.给药组给予二花地龙胶囊高、中、低剂量灌胃治疗,对照组给予戴芬胶囊、正常对照组1和模型组给予生理盐水灌胃.连续灌胃给药7d后,观察二花地龙胶囊对模型动物TNF-α的影响.结果 二花地龙胶囊高、中、低剂量组均能降低兔腰椎间盘突出症模型的TNF-d含量,其值分别为(6.74±0.89)、(7.45±0.93)、(8.06±0.75) ng/L.结论 二花地龙胶囊治疗椎间盘突出症与降低髓核组织中TNF-α含量有关.     

15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯胶束对盐酸特比萘芬滴眼液角膜吸收的促进作用

背景 15-羟基硬脂酸聚乙二醇酯(HS15)是一种低毒性的新型非离子型表面活性剂,广泛用于难溶性药物的增溶,载药量高并能够促进上皮组织对药物的吸收,有助于难溶性抗真菌药物眼部局部用药后的角膜传递,但目前其对抗真菌药物盐酸特比萘芬(TH)眼部应用后的促吸收作用及其对眼组织有无刺激性尚不清楚. 目的 研究HS15胶束(HNMs)对TH的促角膜吸收作用及局部刺激性.方法 采用共溶剂法制备质量分数0.5％ TH-HNMs,用光散射粒度分析仪测定胶束的粒径及Zeta电位,采用透射电子显微镜(TEM)观察胶束的形态,采用高效液相色谱法(HPLC)测定TH包封率及不同pH条件下胶束中TH的累积释放量.取普通级健康雄性新西兰白兔5只,用0.5％ TH-HNMs点眼后行兔眼刺激性试验.另取新西兰白兔90只,采用随机数字表法随机分为对照组和实验组,均以右眼作为用药眼.实验组用50 μl TH-HNMs点右眼,对照组用50μl0.5％ TH油剂点右眼.分别于点眼后5、15、30、60、90、120、180、240和360 min经兔耳缘静脉注射过量质量分数4％戊巴比妥钠溶液处死实验兔,剖取角膜组织后采用HPLC法测定角膜组织中TH质量分数. 结果 制备的TH-HNMs平均粒径为13.32 nm,多分散系数为0.046,Zeta电位为-0.133 mV.TH-HNMs药物包封率为100％.TH体外释放速度呈pH依赖性,6h后在pH5.0的磷酸盐缓冲液中累积释放量达(95.20±3.20)％,在pH 7.4的缓冲液中累积释放量仅为(0.17±0.01)％.0.5％ TH-HNMs点眼后兔眼组织刺激性评分均低于2分,眼部组织未发现任何损伤.0.5％ TH-HNMs点眼后角膜中药物达峰时间均为5 min,达峰质量分数为(20.26±2.26) μg/g,显著高于对照组的(1.40±0.44) μg/g,差异有统计学意义(t=18.926,P=0.000).实验组兔眼给药后药-时曲线下面积(AUC) 0-360 min为1 292.25 μg/(g·min),是对照组的15.6倍.结论 TH-HNMs的制备工艺简单,包封率高,粒径小,无眼部刺激性,与TH油剂相比,点眼后能够显著促进TH在兔眼角膜的吸收.     

激素性股骨头坏死中MMP2作用的研究

目的 观察家兔激素性股骨头坏死股骨头中基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达,探讨MMP2在股骨头坏死中的作用.方法 将12只家兔按随机数表法分为模型组和对照组,每组6只.模型组采用静脉注射内毒素和肌肉注射甲基强的松龙的方法造模.对照组则应用等量的生理盐水.10周后,检测股骨头的空骨陷窝率,髓腔脂肪面积和MMP2.结果 模型组的空骨陷窝率、髓腔脂肪面积和MMP2分别为(20.26±9.83)%、(236.30±34.78)μm2和67.3%,均明显高于对照组的(3.12±1.05)%、(178.80±21.82)μm2和21.1%,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 激素性股骨头坏死中MMP2的高表达与其发生发展密切相关.     

密闭舱室内爆炸致兔损伤的伤情分析

目的 探讨密闭舱室内爆炸致实验兔损伤的伤情特点及分布规律.方法 按1∶1比例建造多舱室船舶模型并模拟内部典型结构,舱室内实验动物共计76只兔.按照先实弹后裸弹、先小口径后大口径的顺序分为4组,然后实验动物按不同舱室以及机柜前后(按相对爆源位置定义前后)随机分为5个亚组.采用两种口径实/裸弹分别于舱室内部引爆,观察实验动物死伤情况.结果 整体死亡率为59.2％.实弹组死亡率(63.2％)与裸弹组死亡率(55.3％)之间差异无统计学意义(P=0.484);大口径组死亡率(73.7％)高于小口径组死亡率(44.7％),差异有统计学意义(P=0.010).小口径弹药爆炸中各舱室死亡率差异无统计学意义(P =0.128);大口径弹药爆炸中,各舱室死亡率不全相等(P =0.000),其中当舱死亡率最高,之后分别是邻舱和隔舱.造成死亡的主要原因是冲击波和爆炸破片导致的重要脏器的损伤.结论 船舶多舱室结构中,舱室整体结构及内部机柜在一定范围内对舱室内人员有明显的防护作用.大口径弹药爆炸的伤亡率明显大于小口径弹药爆炸,实弹与裸弹的致伤类型及死亡率未见明显差异.以上伤情特点为密闭舱室爆炸时内部人员的防护及救治提供了一个新的尝试方向.     

氩氦刀对肺气肿兔肺组织微创减容治疗的研究

目的：本研究旨在通过采用氩氦刀经皮肺穿刺对实验性兔肺气肿模型施行靶向冷消融，以确定氩氦刀经皮靶向肺减容术的有效性、可行性和安全性。方法采用纯种健康新西兰成年大白兔20只建立肺气肿模型，分别在建立模型前后测肺功能及血气分析；模型建立后在CT引导下经皮穿刺行氩氦刀肺减容治疗，冷融全部采用2次冷融循环，冷冻为每次5min，复温过程采用氦气主动复温，复温时间为2min。分别于1、3、7、14、28天测定血气分析及肺功能结果，并且获取相应的标本观察其大体形态及其在光镜下的组织学变化。结果氩氦刀冷冻消融治疗过程中，实验组术中少量出血3例（15％），皮下气肿2例（10％）；肺功能及血气分析：与肺气肿模型相比，术后1天无明显改变（P＞0．05），术后3、7天明显改变（P＜0．05）、术后14、28天显著改变（P＜0．01），肺功能和血气分析指标的最佳改善时间为7～14天。结论氩氦刀肺减容术以达到有效破坏靶组织的目的，明显改善动物模型肺功能和血气分析指标，且创伤小、并发症少、效果好、安全性高。     

骨膜去细胞生物支架的制备和鉴定

目的 制备兔骨膜去细胞生物支架，为骨缺损、骨不愈的组织工程研究提供天然的生物支架材料。 方法 取健康新西兰大白兔，游离双侧胫骨近端内侧骨膜，通过物理冻融（-80℃，24h）、去污剂洗脱（triton-X 100、SDS）和酶消化（DNA酶、RNA酶）获取骨膜去细胞生物支架。通过HE染色、DAPI染色、琼脂糖电泳和基因组DNA定量分析(n=5)测定细胞结构及DNA成分残留；Masson染色和羟脯氨酸测定法(n=6)定性定量检测骨膜细胞外基质的主要成分（胶原）的保留情况；扫描电子显微镜下观察骨膜去细胞生物支架的表面微结构；CCK8法检测支架浸提液毒性；皮下包埋实验(n=4)观察该支架的免疫排斥反应。 结果 HE染色和4’，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）染色表明去细胞支架无残留细胞；琼脂糖电泳未见明显DNA条带;DNA定量检测显示组织去细胞率达95%以上；Masson染色及羟脯氨酸测定表明去细胞支架胶原成分被保留；扫描电子显微镜下细胞外基质呈现三维网状疏松结构；不同体积分数的浸提液对骨膜细胞的增殖与对照组（普通培养基）比较无明显抑制作用（P＞0.05）；异体皮下包埋实验显示，该去细胞支架免疫排斥反应不明显。 结论 运用物理冻融、去污剂洗脱和酶消化等方法所获取的骨膜去细胞生物支架细胞去除彻底，细胞外基质的结构及主要成分保留完好，生物相容性良好。     

筋骨痹痛汤药物血清对白细胞介素-1β诱导的兔软骨细胞凋亡的保护作用

目的 观察筋骨痹痛汤药物血清对白细胞介素-1β（IL-1β）诱导的兔软骨细胞Bcl-2、Bax表达及细胞凋亡的影响，探讨筋骨痹痛汤治疗骨性关节炎的机制。
方法 随机取雄性成年新西兰兔8只分成4组，分别灌服生理盐水、补肝肾中药（骨碎补、续断和淫羊霍）、独活寄生汤和筋骨痹痛汤，制得空白血清和药物血清。分离制备幼兔软骨细胞，采用甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫荧光法鉴定软骨细胞。取第3代软骨细胞，随机分5组实验：空白组（A组）、模型组（B组）、补肝肾中药对照组（C组）、独活寄生汤对照组（D组）、筋骨痹痛汤组（E组）。A组用含10%空白血清的DMEM培养36h，其余各组均先采用含IL-1β的DMEM诱导培养12h，然后B、C、D、E组分别给予含10%空白血清、10%补肝肾中药药物血清、10%独活寄生汤药物血清、10%筋骨痹痛汤药物血清的DMEM培养24h。实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR)和免疫印迹法检测兔软骨细胞Bcl-2和Bax的mRNA和蛋白表达，流式细胞术检测细胞凋亡比例。结果 经鉴定分离制备的细胞为软骨细胞。软骨细胞培养24h后，C、D、E组Bcl-2 mRNA和蛋白表达高于B组，D、E组高于C组，E组高于D组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；Bax mRNA和蛋白表达，以及软骨细胞凋亡率，C、D、E组低于B组，D、E组低于C组，E组低于D组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 筋骨痹痛汤药物血清对IL-1β诱导的兔软骨细胞凋亡具有明显保护作用，其机制可能是通过促进Bcl-2表达和抑制Bax表达，调节Bcl-2与Bax的比例来实现。     

温阳化癥粉对家兔多次皮肤刺激性试验的研究

目的 对温阳化癥粉进行动物多次皮肤刺激试验,为其临床使用提供安全评价.方法 将温阳化癥粉涂抹于家兔完整皮肤上,每天1次,连续涂抹14 d,每天观察症状表现.结果 温阳化癥粉对家兔多次皮肤刺激试验的皮肤反应积分均值为1.70分,温阳化癥粉对家兔的皮肤刺激属轻刺激.结论 温阳化癥粉外敷皮肤具有一定的安全性,但长期使用可能对被使用者造成不良影响.     

经皮椎体后凸成形术与传统开放手术对邻近腰椎生物力学功能影响的比较

目的 观察在兔骨质疏松模型中行经皮椎体后凸成形术(PKP)和开放复位内固定手术对邻近腰椎生物力学功能的影响.方法 将新西兰大白兔通过切除双侧卵巢建立骨质疏松模型,造模成功42只,分为两组,A组21只,予以行开放复位内固定手术;B组21只,予以PKP手术,观察两组模型术后椎体弯曲和压缩实验最大载荷量的变化,椎体术后平均高度和矢状面Cobb角的改变.结果 两组兔模型行PKP和开放复位内固定术术后椎体承载压力能力得到了显著提升,手术前差异有统计学意义(P＜0.01),B组术后椎体承载压力能力提高较A组明显,其差异有统计学意义(P＜0.05).但术后6、12、18个月两组模型承载压力能力逐渐下降.术后观察18个月,A组手术椎体术后平均高度和矢状面Cobb角均无明显变化,B组模型18个月后手术椎体前缘平均高度由术前(38.81±4.12)％恢复至(80.17±8.38)％,矢状面Cobb角由术前(30.13±4.27)°恢复至(8.69±2.41)°.B组椎体术后高度测量值和Cobb角的变化与A组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PKP较开放复位内固定手术可更好地改善邻近椎体后凸角度,更显著地改善椎体承载压力的能力,PKP治疗骨质疏松安全有效.