p63、34βE12和S-100在前列腺穿刺活检组织中的表达及其对前列腺癌的诊断价值

目的:研究p63、角蛋白-903(34βE12)和S-100等组织免疫相关指标在前列腺穿刺活检组织中的表达及诊断价值。方法:选择2017年1月～2020年1月经我院收集的前列腺穿刺活检标本90例,其中前列腺癌58例,良性前列腺增生32例。采用免疫组织化学法检测p63、34βE12和S-100在不同前列腺病变组织中的表达情况,探讨其对前列腺癌的诊断价值。结果:p63在58例前列腺癌组中无弱阳性、阳性表达,58例(100.00%)阴性表达;在32例良性前列腺增生组中29例(90.63%)阳性表达,3例(9.38%)弱阳性表达,无阴性,阳性率100%(32/32);前列腺癌组患者p63阳性表达率显著低于良性前列腺增生组(P0.05);34βE12在58例前列腺癌组中有2例(3.45%)弱阳性表达,56例(96.55%)阴性表达,阳性率3.45%(2/58);在32例良性前列腺增生组中29例(90.63%)阳性表达,3例(9.38%)弱阳性表达,无阴性,阳性率100%(32/32);前列腺癌组患者34βE12阳性表达率显著低于良性前列腺增生组(P0.05);S-100在58例前列腺癌组中有45例(77.59%)阳性表达,2例(3.45%)弱阳性表达,11例(18.97%)阴性表达,阳性率81.03%(47/58);在32例良性前列腺增生组中有4例(12.50%)阳性表达,3例(9.38%)弱阳性表达,25例(78.13%)阴性表达,阳性率21.88%(7/32);前列腺癌组患者S-100阳性表达率显著高于良性前列腺增生组(P0.05);p63、34βE12和S-100表达水平与非前列腺癌疾病存在相关性(P0.05)。结论:p63、34βE12和S-100蛋白联合用于检测前列腺癌,可提高其诊断准确率,且对前列腺疾病有鉴别诊断作用。     

下调REV7基因对于人结肠癌HCT116细胞放射敏感性影响及机制研究

目的 研究下调REV7基因表达对人结肠癌HCT116细胞放射敏感性影响及其机制。方法 对HCT116细胞进行培养并运用RNA干扰技术实现REV7基因下调,将细胞分为空白组、转染阴性RNA oligo片段阴性对照组、转染REV7 RNA oligo的REV7基因下调组。克隆形成实验反映细胞增殖水平,蛋白印迹法检测相关基因表达水平、细胞凋亡发生水平和非同源末端连接途径发生水平。结果 6Gy照后REV7 siRNA组细胞克隆形成率降低(P<0.05)。REV7 siRNA组REV7基因下调效率>60%。REV7 siRNA组γH2AX、Caspase9表达升高(P<0.05),Ku80、XRCC4表达降低(P<0.05)。结论 下调REV7基因能提高HCT116细胞放射敏感性,其机制可能与下调REV7后非同源末端连接的发生被削弱有关。     

LncRNA MEG3靶向miR-181a-5p调控宫颈癌细胞放射敏感性

目的 研究LncRNA MEG3对宫颈癌细胞放射敏感性的影响,并探讨其作用机制。方法 运用qRT-PCR法检测放射抗性和放射敏感性宫颈癌细胞中LncRNA MEG3的表达;将过表达对照组(转染pcDNA 3.1)、过表达LncRNA MEG3组(转染pcDNA 3.1-LncRNA MEG3)、抑制miR-NC组(转染anti-miR-NC)、抑制miR-181a-5p组(转染anti-miR-181a-5p)、过表达LncRNA MEG3+过表达miR-NC组(共转染pcDNA 3.1-LncRNA MEG3和anti-miR-NC)、过表达LncRNA MEG3+过表达miR-181a-5p组(共转染pcDNA 3.1-LncRNA MEG3和anti-miR-181a-5p),均用脂质体法转染至SiHa细胞;克隆形成实验检测细胞的存活分数;流式细胞术检测细胞的凋亡率;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性;Western blot检测细胞中PTEN、p-Akt、Akt的蛋白表达。结果 与放射敏感组相比,放射抗性宫颈癌组织中LncRNA MEG3的表达明显降低(P<0.05),其表达量与宫颈癌细胞的放射敏感性呈正相关;过表达LncRNA MEG3、抑制miR-181a-5p均可显著增强宫颈癌细胞SiHa放射敏感性,促进凋亡(P<0.05);野生型LncRNA MEG3细胞的荧光活性受miR-181a-5p的抑制。过表达miR-181a-5p逆转了LncRNA MEG3对宫颈癌细胞放射增敏和促凋亡作用及对PTEN/Akt信号通路的调控。结论 长链非编码RNA LncRNA MEG3可增强宫颈癌细胞放射敏感性,其机制可能与靶向miR-181a-5p调控PTEN/Akt 信号通路有关,可为提高宫颈癌的预后提供新方向。     

乳腺癌细胞系亚群的异质性及对癌细胞生物学行为的影响

目的研究人乳腺癌细胞系亚群的异质性及对癌细胞生物学行为的影响。方法利用Percoll液在高速离心力作用下形成连续的密度梯度,将乳腺癌细胞分离纯化为不同密度的细胞亚群;应用流式细胞仪检测各亚群细胞系周期时相及DNA含量;应用Brd U法检测不同亚群乳腺癌细胞的增殖能力;应用MTT法检测不同乳腺癌细胞亚群对抗癌药物的敏感性;应用Transwell法检测不同细胞亚群的侵袭能力。结果乳腺癌细胞系存在不同亚群,各亚群细胞的周期时相分布及DNA含量均有差异,不同亚群的乳腺癌细胞对抗癌药物的敏感性、细胞增殖能力、侵袭能力均不同。结论不同亚群的乳腺癌细胞存在异质性,对乳腺癌细胞系的增殖能力、抗药性及侵袭能力产生不同的影响。     

枸杞多糖对大鼠角膜缘干细胞体外增殖的影响研究

目的通过体外分离和培养大鼠角膜缘干细胞(Limbal Stem Cells, LSCs)，观察枸杞多糖(Lyciumbarbarum Polysaccharide, LBP)对LSCs体外增殖的影响，为中药体外培养LSCs的研究提供实验资料。 方法体外分离和培养LSCs，显微镜观察LSCs的细胞形态特征，通过免疫荧光检测转录因子p63初步鉴定大鼠LSCs；分对照组和枸杞多糖处理组，每组20例，免疫印迹检测增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen, PCNA)，初步探讨枸杞多糖对LSCs的增殖影响。 结果镜下观察LSCs体积小，呈多边形或椭圆形，胞核较大，核质比例大，免疫荧光结果显示体外分离的LSCs可表达p63(阳性率为76.41±1.66%)；枸杞多糖处理后LSCs的PCNA蛋白的表达水平高于对照组，并且随着枸杞多糖浓度的增加，PCNA蛋白的表达升高(P<0.05)。 结论枸杞多糖对LSCs的增殖和生长具有促进和维持的作用。     

lncRNA SOX2OT在卵巢癌细胞系中的表达及其对卵巢癌生物学行为的影响

目的 探讨lncRNA SOX2OT在卵巢癌细胞系中相对表达情况,评估其对卵巢癌生物学行为的影响。 方法 将2017年4月—2019年4月宁波市鄞州人民医院治疗的112例卵巢癌患者纳入研究,分析卵巢癌及卵巢癌旁组织、卵巢癌细胞系lncRNA SOX2OT表达情况,并测试其影响增殖及周期、迁移状况。 结果 卵巢癌组织内SOX2OT mRNA表达(3.50±0.13)高于癌旁组织(1.59±0.21,t=81.045,P<0.01);HO-8910PM细胞株内lncRNA SOX2OT表达(5.78±0.04)高于HO-8910细胞株(1.05±0.11,t=405.918,P<0.05)。空白对照组克隆细胞数、迁移细胞数、侵袭细胞数高于siSOX2OT-1组、siSOX2OT-2组;阴性对照组克隆细胞数、迁移细胞数、侵袭细胞数高于siSOX2OT-1、siSOX2OT-2组(均P<0.01)。子宫内膜样癌、浆液性卵巢癌、黏液性卵巢癌lncRNA SOX2OT表达分别为4.12±0.25、3.68±0.42、3.44±0.31,组间差异无统计学意义(均P>0.05)。 结论 lncRNA SOX2OT在卵巢癌细胞系中呈异常高表达,敲低lncRNA SOX2OT表达可对卵巢癌细胞的增殖及迁移、侵袭进行抑制,加快卵巢癌细胞凋亡。      

P63阳性基底细胞在前列腺切除术后尿道再上皮化中的作用

目的:探讨前列腺切除术后P63阳性基底细胞在前列腺部尿道上皮修复过程中的作用。方法:15只老年家犬行前列腺增生切除术,术后第3、7、14天取材行HE染色和免疫组织化学染色分别观察前列腺部尿道上皮修复过程和P63蛋白表达水平。结果:术后3 d手术创面偶见P63阳性细胞;术后7 d可见片状P63阳性细胞,且这些细胞与残余前列腺组织相连续;术后14 d可见新生尿道上皮基底层细胞阳性表达P63。结论:残余前列腺组织是BPH术后尿道再上皮化的重要组织,而位于基底层的P63阳性细胞可能是这一修复过程的源细胞之一。