基于HPLC梯度洗脱法同时测定止咳喘颗粒中7种成分的含量

摘要：目的:建立高效液相梯度洗脱法（HPLC-GEM）同时测定止咳喘颗粒中去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、甘草苷、甘草酸、金丝桃苷和槲皮素的含量。方法:色谱柱为Agilent TC-C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,柱温:30℃;流动相为乙腈-0.5%冰醋酸溶液,梯度洗脱,体积流量:1.0 ml·min-1;检测波长分别为210 nm（检测去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E和桔梗皂苷D3）、237 nm（检测甘草苷和甘草酸）和360 nm（检测金丝桃苷和槲皮素）。结果:去芹糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E、桔梗皂苷D3、甘草苷、甘草酸、金丝桃苷和槲皮素质量浓度分别在0.74～14.80μg·ml-1（r=0.999 9）、1.16～23.20μg·ml-1（r=0.999 6）、0.53～10.60μg·ml-1（r=0.999 5）、1.39～27.80μg·ml-1（r=0.999 3）、6.47～129.40μg·ml-1（r=0.999 7）、4.18～83.60μg·ml-1（r=0.999 4）、1.06～21.20μg·ml-1（r=0.999 8）范围内与峰面积线性关系良好;平均加样回收率分别为97.70%、98.69%、96.98%、99.23%、100.09%、99.47%和98.24%,RSD分别为1.33%、1.20%、1.03%、0.97%、0.69%、0.72%和1.49%（n=9）。结论:该方法操作简便、重复性好,可作为评价止咳喘颗粒的质量控制方法。     

当归熟地药对配方颗粒与单味配方颗粒组合的化学有效成分对比研究

目的:研究当归熟地药对不同配比下有效成分的差异,探索中药药对配方颗粒作为中药配伍的可行性与必要性。方法:采用高效液相色谱法,测定当归熟地药对配方颗粒和单味配方颗粒混合冲泡后药液中阿魏酸和毛蕊花糖苷含量,比较两者差异。结果:当归熟地药对配方颗粒冲泡后,阿魏酸和毛蕊花糖苷的含量均略高于单味配方颗粒混合冲泡后含量。结论:中药药对配方颗粒与单味配方颗粒混合后冲泡含量大小有差异,中药药对配方颗粒作为中药基础配伍,具有可行性与必要性。     

基于HPLC-QAMS法的清肝降压胶囊中10个成分同时定量测定研究

目的:建立同时测定清肝降压胶囊中10个成分的高效液相色谱一测多评(HPLC-QAMS)方法,并验证其准确性和可行性。方法:采用Phenomsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^-1;柱温:30℃;检测波长:320 nm(检测2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷)、250 nm(检测3'-羟基葛根素、葛根素和3'-甲氧基葛根素)、208 nm(检测泽泻醇F、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B)和270 nm(检测隐丹参酮和丹参酮ⅡA)。以葛根素为内参物,建立其与其他9种成分的相对校正因子(RCF),并计算含量,实现一测多评;同时采用外标法(ESM)测定清肝降压胶囊中10个成分的含量,比较一测多评法计算值与外标法实测值的差异。结果:10个成分的线性范围分别为8.136~162.7、7.488~149.8、30.54~610.9、14.11~282.2、0.3680~7.360、0.7040~14.08、0.4320~8.640、3.056~61.12、0.5120~10.24、0.8480~16.96μg·mL^-1,r为0.9992~0.9999;平均回收率分别为98.5%、98.0%、100.0%、100.0%、97.8%、98.5%、97.0%、99.1%、99.3%和100.1%,RSD为1.3%、1.1%、0.96%、0.64%、1.6%、1.5%、1.2%、0.83%、1.1%和0.72%;葛根素与2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、3'-羟基葛根素、3'-甲氧基葛根素、泽泻醇F、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B、隐丹参酮、丹参酮ⅡA的相对校正因子分别为1.1551、1.1262、1.2760、0.9643、0.8959、0.8593、1.3662、0.8399和0.9663;一测多评法计算值和外标法实测值之间无明显差异。结论:所建立的方法简便、准确,可用于清肝降压胶囊的质量评价研究。     

五福饮治疗膝骨关节炎的动物实验研究

目的：观察五福饮颗粒剂（WFYG）对膝骨关节炎大鼠膝关节的影响,为从“五脏同补”角度治疗膝骨关节炎提供依据。方法：将SPF级雄性大鼠30只随机分为假手术组、模型组和治疗组,每组各10只;模型组和治疗组均采用Hulth法建立大鼠KOA模型;造模6周后治疗组大鼠开始灌胃WFYG,假手术组和模型组灌胃等量生理盐水,共4周。采用ELISA测定WFYG对KOA大鼠血清及关节液中白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）的影响,采用IHC法观察WFYG对KOA大鼠软骨中骨形态发生蛋白-2（BMP-2）的影响。结果：与模型组相比,WFYG可以显著降低血清IL-1β[（2.751±0.269）ug/l比（3.660±0.371）ug/l,P<0.01]、IL-6[（2.719±0.391）ug/l比（3.385±0.313）ug/l,P<0.01]含量,以及关节液中IL-1β[（2.670±0.381）ug/l比（3.630±0.384）ug/l,P<0.01]、IL-6[（2.517±0.343）ug/l比（3.254±0.460）ug/l,P<0.01]含量,上调BMP-2[（0.371±0.025）比（0.212±0.018）,P<0.01]的表达。结论：五福饮颗粒剂可通过降低KOA大鼠血清和关节液中IL-1β、IL-6的含量,上调关节软骨中BMP-2的表达,延缓关节软骨退变。     

芪冬活血饮中药汤剂UPLC指纹图谱研究

目的:建立芪冬活血饮中药汤剂指纹图谱,为芪冬活血饮颗粒标准提供参考.方法:收集黄芪、麦冬、虎杖及当归饮片各10批,制成芪冬活血饮中药汤剂,通过高效液相法进行指纹图谱研究,并对色谱峰进行归属.结果:经方法学验证,该方法专属性、精密度、稳定性、重复性良好,可用于芪冬活血饮指纹图谱研究.结论:不同批次间芪冬活血饮中药汤剂指纹...     

羊栖菜化学成分及药理活性研究进展

羊栖菜Sargassum fusiforme是一种生长在太平洋西北部的暖温带至亚热带性藻类植物,用于消痰软坚散结、利水消肿。因其具有多样的药用价值和丰富的营养价值而广受关注,长期研究证据表明羊栖菜在抗阿尔茨海默病、抗抑郁、抗氧化、抗衰老、降血糖、调节肠道菌群、抗肿瘤、抗病毒、抗菌、抗炎、抗凝血等方面均表现出显著的药理活性。对羊栖菜化学成分及其药理作用的前沿研究进行综述,为羊栖菜药理活性物质的合理开发与综合利用提供参考。     

基于HPLC多波长融合指纹图谱及谱效关系的熟地黄活性成分研究

目的 建立熟地黄HPLC多波长融合指纹图谱并筛选抗糖尿病骨质疏松的活性成分。方法 采用HPLC建立10批熟地黄多波长(203，210，254，334 nm)融合指纹图谱；通过糖尿病骨质疏松大鼠模型药效评价，运用偏最小二乘回归法进行谱效分析，得到主要活性成分并以高糖成骨细胞模型验证其药效，并考察熟地黄的体内抗糖尿病骨质疏松作用。结果 10批熟地黄融合指纹图谱共确定26个共有峰，鉴定出的17个色谱峰与骨形成指标(血清碱性磷酸酶活性)呈正相关，其中峰8(梓醇)和峰12(地黄苷D)的标准回归系数和VIP值最显著，二者均能提高成骨细胞增殖活性和细胞碱性磷酸酶水平。结论 梓醇和地黄苷D具有显著抗糖尿病骨质疏松作用，为熟地黄主要活性成分。多波长融合指纹图谱结合谱效关系可作为活性成分筛选的有效策略。     

在法定标准中谨慎扩大部分中药来源的可行性研究

目的 探讨在法定标准中谨慎扩大部分中药来源的可行性。方法 结合中国药典和《浙江省中药炮制规范》中的个别品种进行分析和总结。结果 一些在历史沿革中本就存在的品种、已经在市场成为主要流通的品种、鉴别困难的近缘品种及个别可替代濒危物种的品种等,可以作为扩大来源的中药品种。结论 在注重基源鉴定和药理药效研究的基础上,于法定标准中谨慎扩大部分中药来源是可行的。     

五福饮治疗膝骨关节炎大鼠模型实验研究

目的观察五福饮颗粒剂(WFYG)治疗大鼠膝骨关节炎(KOA)及对血清、关节液白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、关节软骨骨形态发生蛋白-2(BMP-2)表达的影响。方法SPF级雄性大鼠30只随机分为假手术组、模型组和治疗组,各10只;模型组和治疗组采用Hulth法建立大鼠KOA模型;造模6周后治疗组大鼠开始WFYG[2.64g/(kg·d)]灌胃,假手术组和模型组(10m L/kg)等量生理盐水灌胃,共4周。ELISA法测定各组大鼠血清及关节液IL-1β、IL-6,免疫组化检测各组大鼠关节软骨BMP-2表达。结果与模型组相比,治疗组大鼠血清IL-1β[(2.751±0.269)μg/L比(3.660±0.371)μg/L,P0.01]、IL-6[(2.719±0.391)μg/L比(3.385±0.313)μg/L,P0.01],以及关节液IL-1β[(2.670±0.381)μg/L比(3.630±0.384)μg/L,P0.01]、IL-6[(2.517±0.343)μg/L比(3.254±0.460)μg/L,P0.01]显著降低,BMP-2[(0.371±0.025)比(0.212±0.018),P0.01]表达上调。结论五福饮颗粒剂可能通过降低KOA模型大鼠血清和关节液IL-1β、IL-6含量,上调关节软骨BMP-2表达,延缓关节软骨退变。