肺癌患者肺部感染的病原菌分布及血清中NSE和CYFRA21-1病理表达的临床研究

目的探讨肺癌患者肺部感染的病原菌分布及耐药性特点,同时观察血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)、血清细胞甲蛋白19片段(CYFRA21-1)、癌胚抗原(CEA)病理表达对肺癌的诊断及鉴别诊断的临床意义。方法选取于2011年3月-2017年3月医院收治的肺癌伴肺部感染患者102例为A组,将同期住院无肺癌伴肺部感染患者102例为B组。取患者痰液至无菌试管中并送检进行细菌培养,观察分析病原菌特点及血清中NSE、CYFRA21-1病理表达水平。结果 102例肺癌肺部感染患者共分离出153株病原菌,其中革兰阴性菌91株占59.48%、革兰阳性菌45株占29.41%、真菌17株占11.11%;A组的NSE、CYFRA21-1、CEA的阳性率均高于B组(P0.05);NSE病理表达水平在小细胞型肺癌最高,与其他类型肺癌的表达水平比较差异有统计学意义,CYFRA21-1病理表达水平在肺腺癌最高,与其他类型肺癌的表达水平比较差异有统计学意义(P0.05)。结论对肺癌合并肺部感染患者需早期行细菌培养及药敏试验检查,根据相关检查结果选择对症抗菌药物治疗,对肺癌合并肺部感染患者进行早期有效治疗,降低并发症所致病死率,CYFRA21-1、及NSE的病理表达水平增高不仅对肺癌的早期诊断具有重要作用,还可对不同类型的肺癌进行初步判定。     

葡萄糖对大鼠血管平滑肌细胞的增殖与Ca^2＋水平的关系

目的研究葡萄糖对大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用与Ca^2＋水平的关系。方法取SD大鼠胸主动脉,用组织贴壁法原代培养血管平滑肌细胞,实验使用第4-8代细胞,荧光酶标仪的方法检测细胞内游离Ca^2＋水平。结果葡萄糖对大鼠VSMCs的增殖具有一定的浓度效应;随着葡萄糖浓度的增加,在一定范围内胞内Ca^2＋浓度也相应增加;随着时间的延长,细胞内的Ca^2＋浓度也逐渐升高。结论葡萄糖引起大鼠血管平滑肌细胞的增殖可能与其引起细胞内的Ca^2＋浓度的升高有关。     

结核分枝杆菌rESAT-6-CFP-10融合蛋白的构建和表达及其免疫反应性分析

Objective To construct esat-6-cfp-10 fusion gene (ec) and its expression vector pET-23b( + )-esat-6-cfp-10 [pET-23b( + )-ec], and express rESAT-6-CFP-10 (rEC)fusion protein of Mycobacterium tuberculosis (MTB) H37Rv and evaluate its immunoreactivity. Methods Fused gene encoding ESAT-6 and OP-10 of MTB was linked with the (Gly4Ser)3 linker by gene SOEing. Construction of TA cloning vector pMDR 19-T-esal-6-cfp-10 (pMDR 19-T-ec) was identified by PCR, restriction analysis and sequencing. After pMDR 19-T-ec was digested with double restriction enzymes (Nde Ⅰ and Xho Ⅰ ), the fused gene was inserted into prokaryotic expression vector pET-23b ( + ). The recombinant plasmid pET-23b( + )-ec was transformed into E. coli BL21(DE3) pLysE, and IPTG was used to induce the expreestion of rEC. Its expression was detected with sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and Western blot. rEC was purified by nickel-chelate affinity chromatography. The immunoreactivity of rEC was preliminarily evaluated by Western blot. Results A recombinant plasmid pET-23b( + )-ec was successfully constructed and could stably express a 21 000 rEC, which accounted for 35% total proteins of bacillus. It existed in soluble form in E. coli. After purification, the purity of rEC reached 97.2% . Its immunoreactivity was confirmed by Western blot. Conclusions The prokaryotic expression vector pET-23b( + )-ec has been constructed and the fusion protein rEC has been obtained successfully, which provides an experimental basis for the application of rEC in the diagnosis of tuberculosis.     

40例肺心病老年住院患者血液酸硷及气体分析

本组40例均经临床确诊为慢性肺源性心脏病,年龄60～79岁,平均68.4岁。既往有慢性支气管炎10年以上者16例,20年以上者24例。肺源性心脏病(肺心病)5年以上者8例,10年以上者20例。本组大多数患者在住院期间应用利尿剂,肾上腺皮质激素及大量葡萄糖输液,部份患者使用呼吸兴奋剂或呼吸器等治疗。仪器采用国产DH-100G 型血气酸硷分析仪,使用选择性离子电极直接测定。用2ml 空针筒肝素化,采取患者动脉血1.5～2ml,密封标本,5～10分钟内测得pH、PaO_2、PaCO_2三个基本参数,每份标本重复3次,重复性在允许     

丹参酮ⅡA通过阻断MAPK抑制糖尿病大鼠血管平滑肌细胞增殖

目的研究丹参酮ⅡA(TSN)对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用及与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号传导通路的关系。方法培养糖尿病大鼠血管平滑肌细胞,BrdU掺入DNA的ELISA法测定细胞内DNA合成水平,同位素示踪法测定MAPK活性。结果原代培养的大鼠VSMCs内MAPK活性较高,使用TSN和U0126后,可明显抑制细胞的增殖和MAPK活性。结论TSN对糖尿病VSMCs内DNA的合成具有明显抑制作用,其机制可能是阻断了MAPK信号传导通路。     

危重病患者血清甲状腺激素水平检测分析

危重病患者内分泌常发生紊乱，尤其是血清甲状腺激素体内的转运、代谢出现异常变化，并且随着病情的改变而改变。本研究对我院收治的危重病患者临床资料进行观察和分析，现报告如下。     

RA患者RDW水平变化及其与ESR、CRP和RF的关系

目的探讨类风湿性关节炎(RA)患者红细胞体积分布宽度(RDW)水平变化,并分析其与红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)的相关性。方法选取97例RA患者(观察组)及90名体检健康者(对照组)。根据RA疾病活动指数,将观察组分为高活动期组(56例)和低活动期组(41例),比较各组RDW、ESR、CRP及RF水平,并分析RDW与ESR、CRP、RF的相关性。结果观察组RDW、ESR、CRP及RF水平均显著高于对照组(P0.05),高活动期组RDW、ESR、CRP及RF水平均显著高于低活动期组(P0.05)。RDW与ESR、CRP及RF均呈正相关(r值分别为0.232、0.270、0.292,P0.05)。结论 RA患者RDW变化显著,且与ESR、CRP及RF呈正相关,其可为RA患者的诊断及预后提供参考。     

心血管病患者N末端B型脑钠肽水平变化及与其它生化指标的相关性研究

目的：探讨心血管病患者N末端B型脑钠肽水平变化及与其它生化指标的相关性。方法：选取2014年1月至2016年1月期间在该院接诊的58例心血管病患者，设为观察组，并抽取58例体检健康者，设为对照组，采用化学发光检测仪检测两组研究对象的各项生化指标，对其数据做统计学处理。结果：观察组血清N末端B型脑钠肽水平为（3.26±1.02）mol／ml，高于对照组（2.34±0.59）mol／ml，组间对比差异明显（t＝10.352，P＜0.05）。血清N末端B型脑钠肽水平与心功能分级呈正相关。结论：心血管病患者N末端B型脑钠肽浓度会随着心力衰竭程度升高而升高，成为评估心功能的敏感指标。     

耐利福平结核分枝杆菌rpoB基因序列研究

目的研究杭州地区结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)对利福平(RFP)的耐受与rpoB基因突变的关系.方法随机挑选了90例结核杆菌感染的病例,选择了利福平作为主要的药物进行药敏实验,PCR扩增39株耐RFP结核分支杆菌的rpoB基因片段(580bp);测定扩增片段的序列,并与美国国立生物信息中心(www.ncbi.nlm.nih.gov/nucleotide)检索获得结核杆菌野生株(利福平敏感株)序列(登陆号:AJ749948)作对比分析.结果结果显示PCR结核测序方法得到了39例结核杆菌耐药株,51例敏感株,与药敏实验的方法检测的结果完全一致.测定的11株临床分离的耐药株中,526位或531位有突变,其中526位有突变的有7株,占耐药测定株63.6%,531位突变的有4株,占耐药测定株36.4%,未见两位点同时突变.检测的11株敏感株,未见526位或531位有突变.结论杭州地区结核分支杆菌耐利福平的发生与rpoB基因的526位或531位突变密切相关,与国外的报告基本相似.但526位突变占耐药测定株高达63.6%,如此高比例目前国内外未见相似报道.PCR扩增和产物测序将是临床检测结核分支杆菌耐利福平和耐多药的一种迅速、准确的方法.     

耐利福平结核分枝杆菌rpoB基因序列研究

目的 研究杭州地区结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis）对利福平（RFP）的耐受与rpoB基因突变的关系。方法 随机挑选了90例结核杆菌感染的病例。选择了利福平作为主要的药物进行药敏实验，PCR扩增39株耐RFP结核分支杆菌的rpoB基因片段（580bp）；测定扩增片段的序列。并与美国国立生物信息中心（www．ncbi．nlm．nih．gov／nucleotide）检索获得结核杆菌野生株（利福平敏感株）序列（登陆号：AJ749948）作对比分析。结果 结果显示PCR结核测序方法得到了39例结核杆菌耐药株。51例敏感株，与药敏实验的方法检测的结果完全一致。测定的11株临床分离的耐药株中，526位或531位有突变，其中526位有突变的有7株，占耐药测定株63．6%，531位突变的有4株。占耐药测定株36．4％。未见两位点同时突变。检测的11株敏感株，未见526位或531位有突变。结论 杭州地区结核分支杆菌耐利福平的发生与rpoB基因的526位或531位突变密切相关，与国外的报告基本相似。但526位突变占耐药测定株高达63．6％。如此高比例目前国内外未见相似报道。PCR扩增和产物测序将是临床检测结核分支杆菌耐利福平和耐多药的一种迅速、准确的方法。