脑损伤后神经元自噬水平对突触蛋白表达的影响

目的:神经网络的破坏是创伤性脑损伤(TBI,traumatic brain injury)后造成神经病理损伤的一个主要因素,为了弥补神经功能损伤,神经网络重建其拓扑结构,新的细胞间连接形成,将受损脑区的功能重新分配到完整脑区。有报道表明,辛伐他汀可以改善创伤性脑损伤后的神经突出芽,介导该现象的可能通路是磷脂酰肌醇3-激酶/Akt/雷帕霉素靶蛋白(PI-3K/Akt/mT OR)通路以及糖原合成酶激酶-3β/腺瘤性结肠息肉病(GSK-3β/APC)通路,上述通路激活后都可以加速自噬。我们设计实验的目的在于在脑损伤后,通过药物加强自噬的表达,是否可以改善神经网络的重建,是否可以改善神经功能的恢复。实验选取大鼠作为实验动物,通过外力打击,造成弥漫性脑损伤模型,通过给予自噬的激动剂辛伐他汀和抑制剂氯喹,调节损伤后神经细胞内的自噬水平,对于损伤后神经系统的修复,通过突触相关蛋白的表达和行为学参数进行评估。结果:在脑损伤后,给予辛伐他汀治疗可以改良大鼠神经功能的恢复,突触相关蛋白突触后致密蛋白95(PSD-95,postsynaptic density-95 protein)和突触素(synaptophysin)有较高的表达,在整个实验进程中,自噬都有较高的表达。给予氯喹,会使大鼠神经功能的回复变差。结论:辛伐他汀有可能是通过激活自噬相关的通路来加强脑损伤后大鼠神经网络的可塑性,进而改善神经功能的恢复。     

抑郁症大鼠海马神经元自噬与PTEN的表达

目的观察抑郁症大鼠海马神经元是否存在PTEN的异常表达,探讨其表达与自噬的相关性。方法成年健康雄性SD大鼠50只,随机分为对照组和模型组:每组25只。通过慢性不可预见温和性应激(CUMS)方法制备抑郁症大鼠模型。采取旷场、水迷宫、穿梭箱、悬尾实验及糖水偏好等行为学实验检测大鼠抑郁状态。分别于成模后0.5 d、1 d、3 d、7 d、14 d取海马组织,通过免疫组织荧光、Weston blot、实时荧光定量PCR等方法检测海马自噬相关蛋白LC3、Beclin1以及抑癌基因PTEN的表达变化。结果模型组大鼠好奇心缺失,空间学习记忆能力受损,行为绝望状态以及快感缺失(P<0.01);模型组LC3、Beclin1两种自噬相关蛋白有共定位表达,其中LC3也与PTEN蛋白呈共定位表达;抑郁症模型组大鼠海马LC3、Beclin1两种自噬相关蛋白与PTEN蛋白的表达均高于对照组(P<0.05),并呈随时间增加趋势;抑郁症模型组大鼠两种目的自噬相关基因和PTEN基因表达均高于对照组(P<0.01)。结论抑郁症大鼠海马神经元存在异常PTEN表达,其表达与自噬发生相关。     

不明原因习惯性流产与血浆激肽释放酶表达量及妊娠免疫耐受的相关性

[目的]探讨不明原因习惯性流产(RPL)与血浆激肽释放酶(PK)表达量及妊娠免疫耐受的相关性.[方法]选择30例不明原因RPL患者作为观察组,另选择30名健康女性作为对照组,检测两组血清中PK的活性;采用Real-time PCR与Western Blot法检测两组外周血单核细胞(PBMC)中PK mRNA和蛋白表达水平;分别将MOCK、pcDNA3-6myc-PK、pcDNA3-6myc-PK S578A及MOCK、SiControl、SiPK转染入JEG-3细胞,比较Th1/Th2细胞因子的分泌量;利用Transwell小室法和CCK-8实验检测干扰及过表达PK基因对滋养层细胞的侵袭及免疫细胞增殖的影响.[结果]观察组血清中PK活性显著高于对照组,且观察组患者PBMC中PK mRNA和蛋白表达水平均明显高于对照组(P<0.05);过表达和RNA干扰实验结果表明,观察组促炎性细胞因子的表达水平明显上调(P<0.05); PK基因siRNA沉默可明显增加滋养层细胞的侵袭,而siPK组对免疫细胞增殖有抑制作用(P<0.05).[结论] PK在观察组患者血清与PBMC中呈高表达,且PK可增强炎性反应及免疫细胞增殖,且对滋养层细胞侵袭有抑制作用.     

多孔钽在骨科和口腔医学领域应用的研究进展

多孔钽小梁金属长期应用于骨科,可促进血管新生、伤口愈合和成骨;近期在钛合金牙种植体中多孔钽的应用也越来越多。多孔钽具有良好的生物相容性及与骨组织相似的弹性模量,与金属钛相比,它能明显促进原代成骨细胞的增殖和分化,促进骨结合,完成骨整合,从而显著提高种植体在骨组织中的二次稳定性,是目前已知最好的金属植入材料之一。现通过回顾以及分析相关文献,对多孔钽材料的特性以及其在骨科和口腔医学领域的应用研究进展作一综述。     

粒细胞集落刺激因子对大鼠脑出血后脑组织NF-κB和IL-1β表达变化的影响

目的:观察脑出血(ICH)后粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对炎症因子NF-κB和IL-1β表达的影响,探讨G-CSF对ICH后脑组织继发性炎症损伤的保护机制。方法:将健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和G-CSF治疗组(治疗组),每组10只。采用注入自体血方法复制脑出血模型。Garcia等方法进行神经功能障碍评分;干湿重法检测脑组织含水量;免疫组织化学SP法检测NF-κB和IL-1β蛋白的表达;免疫印迹检测NF-κB和IL-1β蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,大鼠脑出血后神经功能障碍评分降低,NF-κB和IL-1β阳性表达和脑含水量明显增多(P<0.05);G-CSF干预后NF-κB和IL-1β阳性表达和脑含水量显著下调(P<0.05),与脑神经功能障碍评分上调相一致。结论:粒细胞集落刺激因子可能通过抑制炎症因子NF-κB和IL-1β的表达,减轻脑出血血肿周围组织的炎性反应,改善神经功能损伤,起到神经保护作用。     

非小细胞肺癌人乳头状瘤病毒感染及其与cIAP2和EGFR蛋白表达的相关性研究

目的 探讨非小细胞肺癌中人乳头状瘤病毒(HPV)感染与cIAP2及EGFR蛋白表达的关系,分析HPV感染、cIAP2及EGFR蛋白表达与NSCLC临床病理参数的关系,进而探究HPV感染可能致癌发生发展的分子学机制,为临床用药策略提供实验室依据.方法 收集华北理工大学附属医院手术切除的非小细胞肺癌标本49例,用PCR方法检测新鲜标本中HPV16/18 DNA,免疫组织化学法检测HPV16/18-E6蛋白、cIAP2及EGFR蛋白的表达情况.选取14例肺良性病变组织作为对照.结果 PCR及免疫组化检测49例NSCLC中HPV阳性率(42.86％,21/49)明显高于肺良性病变组(7.14％,1/14) (P＜0.05),cIAP2和EGFR蛋白的阳性表达率均高于肺良性病变组(P＜0.05),且cIAP2和EGFR蛋白在NSCLC中表达的成正相关(x2=8.85,P＜0.05,r=0.391).HPV16/18阳性NSCLC组,cIAP2和EGFR蛋白的阳性表达率均高于HPV阴性组(P＜0.05).在49例NSCLC中,HPV感染与患者的吸烟史、组织学类型有关(P＜0.05),EGFR蛋白的表达与有无淋巴结转移相关(P＜0.05),而cIAP2蛋白的表达与患者的性别、年龄、吸烟史、肿瘤的组织学类型、分化程度及淋巴结转移情况等临床病理参数均无关(P＞0.05).结论 HPV感染可能是非小细胞肺癌发生的重要的病毒学危险因素之一,与吸烟协同作用促进肺上皮细胞的恶性转化,并可能通过上调EGFR、cIAP2蛋白表达而促进肿瘤发生发展.     

骨髓间充质干细胞重复移植对大鼠脑梗死后bcl-2、caspase-3蛋白表达的影响

目的探讨重复移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗大鼠脑梗死bcl-2、caspase-3蛋白表达。方法 BMSCs体外培养、纯化。线栓法建立大鼠永久性大脑中动脉阻塞模型,随机分为对照组(n=15):1,7d分别注射1ml生理盐水;单次组(n=15):1d,注射1ml细胞悬液,7d注射1ml生理盐水;重复组(n=15)在1,7d注射1ml细胞悬液,均尾静脉注射。神经功能评分进行行为学评价;TTC染色评估梗死体积;免疫组化及western检测bcl-2、caspase-3蛋白表达。结果单次组、重复组mNSS评分比对照组显著降低(P<0.01),同组比较评分降低(P<0.05);单次组、重复组相对梗死体积比对照组小(P<0.05),单次组和重复组bcl-2阳性细胞灰度值比对照组大(P<0.01),caspase-3阳性细胞灰度值降低(P<0.05),单次组和重复组bcl-2蛋白含量比对照组多(P<0.01),caspase-3蛋白含量降低(P<0.05)。结论重复移植BMSCs治疗脑梗死可更好改善大鼠神经功能,减少梗死体积,可能与上调bcl-2蛋白表达,减少caspase-3蛋白表达有关系。     

冷酚法淋病奈瑟菌多糖疫苗制备及其对体液免疫的效果

①目的应用冷酚法制备淋病奈瑟菌多糖疫苗,评价其体液免疫效果。②方法扩增细菌后,冷酚法制备淋病奈瑟菌多糖,分别应用低剂量和高剂量多糖抗原免疫家兔,运用絮状沉淀试验测定血清中抗多糖抗体效价。③结果低剂量多糖和高剂量多糖组的血清中抗多糖抗体效价分别为（1：381±0．004）和（1：269±0．008）,差异统计学意义（ P＞0．05）,说明低剂量和高剂量多糖抗原免疫效果一致。④结论成功制备淋病奈瑟菌多糖抗原,且低剂量和高剂量抗原的免疫效果无差异。     

喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒FM1株感染免疫低下小鼠肺炎的影响

目的:观察喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒感染免疫低下小鼠肺炎模型的预防和治疗作用。方法:采用腹腔注射环磷酰胺联合甲型H1N1流感病毒FM1株滴鼻感染ICR小鼠造成免疫低下小鼠肺炎模型,分别经治疗性给药4 d和预防性给药5 d后,取各组小鼠肺组织称重,计算肺指数、肺指数抑制率, RT-PCR法检测各组小鼠肺组织中相对病毒载量。结果:采用甲型H1N1流感病毒FM1株感染免疫低下小鼠后,肺指数明显增高,脾、胸腺指数降低,三者与环磷酰胺对照组比较差异有显著统计学意义(P0.01)。治疗性给予喘可治注射液4d后,小鼠肺指数有所降低,与模型对照组比较差异无统计学意义(P0.05);脾指数和胸腺指数均升高,其中脾指数与模型对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。预防性给予喘可治注射液5 d,肺指数明显降低,与模型对照组比较差异有显著统计学意义(P0.01);小鼠肺组织中FM1株流感病毒病毒载量也明显降低,与模型对照组比较差异有统计学意义(P0.05),病毒载量抑制率可达58.68%。结论:喘可治注射液对流感病毒感染免疫低下小鼠肺炎模型有较好的防治作用。