佐太、β-HgS、HgCl_2对PC12细胞活性和凋亡相关基因表达影响的比较

目的比较佐太、β-HgS、HgCl_2对PC12细胞活性和凋亡相关基因表达的影响。方法 MTT法测定3种药物对细胞活性的影响,实时荧光定量PCR法检测Bax、Bak、Bcl2、Fas、FasL表达。结果 0.250 g/L佐太作用2 h后细胞活性下降约10%,等汞量β-HgS使其下降12%左右,而含汞量只有佐太1/10的HgCl_2却导致其下降约70%;佐太降低Bax、Bak、Bcl-2、FasL表达,β-HgS降低Bax、Bak、Fas、FasL表达,HgCl_2降低Bcl-2表达而增加Fas、FasL表达。结论佐太、β-HgS对PC12细胞的毒性远小于HgCl_2,两者可能对细胞中线粒体凋亡通路的激活有抑制作用,而HgCl_2可能通过激活死亡受体通路诱导细胞凋亡。     

含HgS传统药物朱砂和佐太中汞的胃肠道溶出及吸收蓄积研究

中药朱砂和藏药佐太的主要成分分别为α-HgS和β-HgS,但是关于朱砂、佐太、α-HgS和β-HgS中的汞在人体胃肠道中的溶出吸收以及在器官中的分布蓄积的比较研究未见报道.该研究模拟了4种硫化汞类化合物在人体胃肠道中的溶出过程,然后测定汞溶出度,分别比较不同药物间汞溶出度差异以及不同溶液的促溶能力差异.为了探究朱砂和佐太在机体内的吸收蓄积情况,分别以其临床等效剂量灌胃小鼠,同时设置与朱砂等汞量的α-HgS和β-HgS给药组,以及与佐太等汞量的β-HgS和HgC12给药组,然后比较各组不同药物中的汞在小鼠体内吸收蓄积能力差异以及小鼠不同组织器官对汞的蓄积能力差异.实验结果表明,佐太在人工胃肠液中的汞溶出度均较大,其次是β-HgS,朱砂和α-HgS也有一定的溶出.对于小鼠汞吸收蓄积实验,HgCl2吸收蓄积能力最强,β-HgS其次,α-HgS略强于朱砂;不同器官对汞的蓄积能力大小依次是肾＞肝＞脑.该研究贴近临床实际,观察含汞药物朱砂和佐太在胃肠道中的溶出以及吸收分布蓄积,为临床安全用药提供参考,也希望为含重金属药物的安全性评价提供研究模式.     

复方藏药当佐脂溶性成分GC-MS分析

目的 对复方藏药当佐中脂溶性化学成分进行分离鉴定,以探索其药理效应的物质基础。方法 采用柱色谱法将当佐的脂溶性提取物分离为3个流份：非极性、弱极性和极性流份,并运用GC-MS联用法进行分离鉴定。结果 从3个不同极性的流份中,共分离出103个色谱峰,所有化合物均得到鉴定,并用面积归一化法确定各成分质量分数。结论 藏药当佐中脂溶性成分得到全面分析,并发现存在多种活性化合物,为揭示当佐药理和毒理效应的物质基础提供了参考。     

冬虫夏草中砷及其安全性评价研究进展

传统名贵中药冬虫夏草Cordyceps sinensis中砷超标及其安全性问题近年来备受关注,针对冬虫夏草中砷的研究逐渐增加并不断深入。在文献查阅的基础上,从冬虫夏草砷及砷形态的分析方法,砷的含量、分布、存在形态,安全性评价,以及野生和人工仿生繁育冬虫夏草中砷含量等方面进行归纳总结,并对冬虫夏草中砷的认知及研究进行展望,以期为冬虫夏草安全性评价的深入研究提供参考。     

藏药佐太中汞在小鼠体内的蓄积

目的探索给予KM小鼠不同剂量和不同时间的佐太后,汞在体内的蓄积情况。方法 KM小鼠随机分为空白组,佐太低、中、高剂量组(42 d,6.07、60.70、606.97 mg/kg;14 d,606.97 mg/kg),给药后,测定小鼠脑(嗅球、皮层、海马、下丘脑、脑干、小脑)、心脏、肺脏、肾脏、肝脏、脾脏、血清、肌肉中汞含有量。结果与空白组相比,给予42 d低剂量佐太后,能够显著增加小鼠海马、小脑、肺脏、肾脏、肝脏、血清中汞含有量;给予42 d中剂量佐太后,能够显著增加小鼠嗅球、皮层、海马、脑干、小脑、心脏、肺脏、肾脏、肝脏、脾脏、血清中汞含有量;给予42、14 d高剂量佐太后,能够显著增加小鼠嗅球、皮层、海马、下丘脑、脑干、小脑、心脏、肺脏、肾脏、肝脏、脾脏、肌肉、血清中汞含有量。结论小鼠灌胃佐太后,汞在不同组织中产生蓄积,且表现出剂量和时间依赖性,提示佐太及其复方制剂不宜过量、长期使用。     

复方藏药当佐脂溶性成分GC-MS分析

目的 对复方藏药当佐中脂溶性化学成分进行分离鉴定,以探索其药理效应的物质基础.方法 采用柱色谱法将当佐的脂溶性提取物分离为3个流份;非极性、弱极性和极性流份,并运用GC-MS联用法进行分离鉴定.结果 从3个不同极性的流份中,共分离出103个色谱峰,所有化合物均得到鉴定,并用面积归一化法确定各成分质量分数.结论 藏药当佐中脂溶性成分得到全面分析,并发现存在多种活性化合物,为揭示当佐药理和毒理效应的物质基础提供了参考.     

HPLC分析不同来源藏药当佐中4种指标成分的含量

目的:建立HPLC同时测定藏药当佐中没食子酸、羟基红花黄色素-A、桂皮醛、胡椒碱含量的方法,对不同来源样品进行测定,以建立当佐的质量控制标准.方法:采用Waters XTerra RP-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,以甲醇-水(含0.1%冰乙酸)为流动相,梯度洗脱(0-22.5 min,流动相比例5:95-50:50;22.5-40 min,流动相比例50:50-80:20),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为270 nm.结果:在此色谱条件下,没食子酸、羟基红花黄色素-A、桂皮醛、胡椒碱达到基线分离,且线性良好,线性范围分别为0.040-0.640μg(r=0.999 8),0.090-1.440 μg(r=0.999 9),0.031-0.500μg(r=0.999 9),0.092-1.477μg(r=0.998 9),平均回收率(n=6)分别为97.42%(RSD 1.9%),97.55%(RSD 2.9%).98.69%(RSD 0.96%),96.72%(RSD4.0%);不同来源当佐中该4种成分的含量变化分别为0.113-1.69,0.889-1.51.0.000-0.606,1.96-2.75 mg·g-1.结论:本研究所建立的方法,能够准确快速地测定当佐中指标成分的含量,可为该药的全面质量评价提供参考.     

卵清蛋白致过敏性腹泻小鼠血清和胃组织中5-羟色胺系统的代谢分析

目的探讨卵清蛋白(OVA)致过敏性腹泻小鼠5-羟色胺(5-HT)信号系统的变化。方法 7~8周龄雌性BALB/c小鼠分为模型组、色甘酸钠处理组和对照组。模型组和色甘酸钠处理组分别在0 d和14 d,腹腔注射OVAⅠ(50μg/只)。28 d后,隔天对小鼠进行口服灌胃OVAⅡ(50 mg/只)激发(共8次)。色甘酸钠处理组从28 d开始,隔天(口服灌胃激发前)给予色甘酸钠(78.0 mg/kg)(共8次)。OVA口服灌胃后对小鼠进行综合评分、粪便评分及测定体温变化。43 d后,处死动物。摘眼球取血离心取血清并取胃组织。ELISA检测血清OVA特异性Ig E(OVA-SIg E)。液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)测定血清中的5-HT及其上下游代谢产物犬尿酸(KYN)、色氨酸(TRP)、5-羟色胺酸(5-HTP)和5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)含量,利用实时定量PCR检测过敏小鼠胃组织5-HT代谢相关基因色氨酸羟化酶1(TPH1)、吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)、单胺氧化酶A(MAO-A)、5-HT选择性再摄取转运体(SERT)及其受体5-羟色胺1A受体(HTR1A)、HTR3A、5-羟色胺4受体(HTR4)的mRNA水平。结果 OVA致敏后,小鼠产生严重的过敏性腹泻,血清中的OVA-SIg E明显升高。血清中的KYN显著上升,5-HT、5-HIAA和5-HTP显著下降。胃组织IDO1及其受体HTR1A、HTR3A的mRNA水平增加,TPH1、MAO-A mRNA水平降低。给予色甘酸钠后综合评分、粪便评分、体温及OVA-SIg E明显降低,并且腹泻率也低于模型组,血清中的5-HIAA及胃组织中MAO-A mRNA水平升高,胃组织IDO1、5-HT1A、5-HT3A mRNA水平降低。结论 OVA致过敏性腹泻小鼠5-HT信号系统激活,给予色甘酸钠后,缓解过敏症状并使5-HT代谢相关产物、代谢基因和受体基因的表达发生改变。     

藏药佐太长期给药对小鼠毒性的初步研究

目的 探索KM小鼠以临床等效剂量长期给予藏药佐太后对机体的毒性情况,为佐太成方制剂的临床安全用药提供科学依据.方法 KM小鼠随机分为空白组和给药组,给药剂量为6.67 mg·kg-1 bw·d-1,给药周期为4.5个月,灌胃给药,观察小鼠的外观体征、体重变化、进食饮水等情况,并检测血常规、肝肾功能血清生化指标以及肝、肾、脾、脑组织病理学结构.结果 与空白组比较,给药组小鼠的外观特征、行为特征、体重变化、进食饮水、粪便外观在整个实验过程中无显著性差异;给药组小鼠的红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)显著高于空白组(P＜0.05),其他血常规指标均无显著性差异;4.5个月时给药组AST/ALT出现显著性下降,但血清ALT、AST、TBIL、BUN、Crea等指标均无显著性变化;病理组织学观察发现,4.5个月时给药组小鼠肾脏近曲小管、肝脏和脾脏组织学结构出现了轻微变化,脑组织学结构正常.结论 KM小鼠以临床等效剂量给药佐太4.5个月,对其外观体征、生长发育状况、血常规指标、肝肾功能血清生化指标、脑组织学结构无明显影响,但可能会对KM小鼠肾脏、肝脏和脾脏组织学结构产生一定程度的影响,提示含佐太复方制剂服用周期不宜过长.     

藏药佐太安全性研究及其复方当佐的临床安全观察初探

佐太是含重金属藏药的典型代表,迄今仍缺乏现代安全性评价数据。该研究通过佐太的急性毒性试验、亚急性毒性试验、单次给药汞分布试验、长期汞蓄积毒性试验及其复方当佐的临床安全性初步观察,以期获得佐太的药用安全数据。急性毒试验发现：半数致死量试验的各组KM小鼠未出现死亡和中毒现象,未做出佐太LD₅₀;佐太的最大耐受量为80 g·kg^-1。亚急性毒性试验发现：佐太在低剂量（13.34 mg·kg^-1·d^-1）和中剂量（53.36 mg·kg^-1·d^-1）时可降低Wistar大鼠血清ALT,AST,Crea水平,且在低剂量时具有显著性差异;高剂量（2 000 mg·kg^-1·d^-1）佐太可显著增加血清ALT,AST,Crea,MDA水平;血清BUN和GSH水平随着剂量增加而降低,呈显著性量效关系。单次给药分布试验发现：佐太单次给药24 h后,Wistar大鼠的肾脏、肝脏及肺中汞含量出现升高趋势,且在肾脏中呈显著剂量依赖性。长期蓄积毒性试验发现：KM小鼠在临床等效剂量（6.67 mg·kg^-1·day^-1）给药佐太4.5个月、停药1.5个月,从2.5个月时肾脏开始出现显著性汞蓄积,停药后又逐步降低,而肝、脾和脑中汞含量及血清ALT,AST,TBIL,BUN,Crea均无显著性变化;在给药4.5个月时KM小鼠肾、肝和脾组织有轻微结构性变化,停药后又恢复正常;佐太组动物体重增加与对照组之间无显著性差异。当佐临床安全观察发现：受试者在临床剂量下服药当佐1个月,血清生化、血常规和尿常规各指标均无不良变化。该研究证实了传统藏药佐太的毒性极低,其临床配伍药用安全性较好,在临床剂量下和临床服药周期内对机体无不良作用,但长期大剂量用药可能会对肾脏等产生一定的影响。