通窍活血汤含药脑脊液对OGD/R损伤大鼠BMECs的保护作用

目的:探讨通窍活血汤含药脑脊液对氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)损伤大鼠脑微血管内皮细胞(BMECs)的保护作用及潜在机制。方法:通过酶消化法提取原代BMECs,并将细胞随机分为6组,分别为正常组,OGD/R组,通窍活血汤(TQHXT)组(20%),尼莫地平(NMDP)组(10μmol·L~(-1)),卡博替尼(BMS)组(1μmol·L~(-1))和合用药组。除正常组外,其余各组细胞在氧糖剥夺2 h后迅速复糖复氧24 h进行OGD/R造模并分组给药。采用细胞免疫荧光染色法鉴定BMECs,观察OGD/R损伤大鼠BMECs的形态学和超微结构改变并检测细胞跨膜电阻(TEER)值变化。用试剂盒检测细胞内一氧化氮(NO)水平、乳酸脱氢酶(LDH)活性、活性氧(ROS)荧光强度和组织型纤溶酶原激活因子(tPA)含量。采用流式细胞术检测细胞内钙离子浓度及细胞凋亡,观察血管新生标记因子CD34的表达,用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中紧密连接蛋白(ZO-1),血管内皮生长因子(VEGF),黏着斑激酶(FAK)和桩蛋白(Paxillin)蛋白的表达情况。结果:与正常组比较,OGD/R组细胞皱缩、变圆,细胞TEER值和细胞中ZO-1蛋白表达显著降低,细胞中NO,LDH及ROS水平显著升高,tPA含量显著降低,细胞中钙离子浓度和细胞凋亡显著增加,细胞中CD34有所表达,VEGF,FAK和Paxillin蛋白表达显著升高(P0. 01);与OGD/R组比较,TQHXT组细胞损伤明显改善,细胞TEER值和细胞中ZO-1蛋白表达显著升高,细胞中NO,LDH及ROS含量显著降低,tPA含量显著升高,细胞中钙离子浓度和细胞凋亡显著减少,细胞中CD34表达增加,VEGF,FAK和Paxillin蛋白表达显著升高(P0. 05,P0. 01)。结论:通窍活血汤含药脑脊液对OGD/R损伤大鼠BMECs具有保护作用,该保护作用可能是通过VEGF/VEGF受体2(R2)/FAK/Paxillin信号通路促进血管生成来发挥作用。     

黄蒲通窍胶囊对阿尔茨海默病模型大鼠Wnt/Ca2+信号通路的影响

目的 观察黄蒲通窍胶囊对阿尔茨海默病（Alzheimers disease,AD）模型大鼠学习记忆的影响,探究其潜在作用机制。方法 将30只SD大鼠随机分为空白组、模型组、黄蒲通窍胶囊组,每组10只,腹腔注射D-半乳糖联合双侧海马注射Aβ25-35复制AD大鼠模型;给药28 d,采用Morris水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力,检测后取材,采用苏木精-伊红染色观察海马神经细胞损伤情况,采用Western blot法检测海马组织中Wnt5、Frizzled、PLCβ蛋白表达水平,采用ELISA法检测血清三磷酸肌醇（inositol triphosphate,IP3）表达水平。结果 Morris水迷宫实验结果显示：训练期,各组大鼠的逃避潜伏期随时间的增加呈下降趋势;测试期,与空白组比较,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长,目标象限路程与时间百分比明显减少（P＜0.05）;与模型组比较,黄蒲通窍胶囊组大鼠逃避潜伏期明显缩短,目标象限路程百分比和时间百分比明显增加（P＜0.05）。苏木精-伊红染色结果显示：与空白组比较,模型组大鼠海马神经细胞萎缩破裂、层数减少、排列松散;与模型组比较,黄蒲通窍胶囊组大鼠海马神经细胞损伤减轻。Western blot法检测结果显示：与空白组比较,模型大鼠Wnt5、Frizzled、PLCβ表达水平均明显升高（P＜0.05）;与模型组比较,黄蒲通窍胶囊组大鼠Wnt5、Frizzled、PLCβ表达水平均明显降低（P＜0.05）。ELISA法检测结果显示：与空白组比较,模型组大鼠IP3表达水平明显升高（P＜0.05）;与模型组比较,黄蒲通窍胶囊组IP3表达水平明显降低（P＜0.05）。结论 黄蒲通窍胶囊可减少AD模型大鼠海马神经细胞的损伤,改善其学习记忆的能力,其机制可能与抑制Wnt/Ca2+信号通路有关。     

基于网络药理学研究丹蛭降糖胶囊治疗糖尿病的分子机制

目的 采用网络药理学方法研究丹蛭降糖胶囊治疗糖尿病的潜在分子机制。方法 借助中药系统药理学平台和Swiss Target Prediction数据库检索丹蛭降糖胶囊的化学成分、对应作用靶标及靶标基因。通过GeneCards获取糖尿病相关靶点,将复方活性成分靶点和糖尿病靶点构建韦恩图,以寻找交集靶点,获得丹蛭降糖胶囊治疗糖尿病的预测靶标。利用Cytoscape 3.7.2软件构建药材-化合物-靶点（基因）网络,筛选关键化合物。利用STRING网站建立交集靶点蛋白相互作用网络,选出关键靶点基因。借助R软件对共同靶点进行GO分析和KEGG通路富集分析。结果 丹蛭降糖胶囊作用于糖尿病的活性成分有25个,相关靶基因76个。GO和KEGG分析结果显示,丹蛭降糖胶囊治疗糖尿病的机制共涉及1 702条生物学过程和149条信号通路。结论 丹蛭降糖胶囊治疗糖尿病的关键成分槲皮素、木犀草素、山奈酚等可能通过对AGE-RAGE、IL-17、TNF、HIF-1等信号通路的调控,最终达到治疗糖尿病的效果。其作用机制可能与抗炎,降低氧化应激水平,参与细胞的凋亡与损伤有关。     

栀子化学成分及药理作用研究进展

栀子具有泻火除烦、清热利尿、凉血解毒等功效,常用于治疗自身免疫性疾病、糖尿病和肝脏损伤等。现代研究发现,栀子化学成分复杂,主要有环烯醚萜类、二萜类、黄酮类和有机酸酯类等。栀子苷是从栀子中分离得到的一种环烯醚萜苷类化合物,具有抗感染、免疫调节和抗氧化等多种药理作用。栀子苷可恢复促炎/抗炎细胞因子的动态平衡,调节免疫细胞的功能和活化,减少炎症递质和炎症因子的产生,以及调节多种信号通路发挥抗感染和免疫调节作用。     

栀子苷保肝利胆和肝毒性双重作用的研究进展

栀子苷是中药栀子的主要药用活性成分,对肝脏具有一定的保护作用。然而,近年来不断有研究报道栀子苷具有一定的肝毒性。研究表明,栀子苷对肝脏的保护作用是多方面的,其能够调节肝微粒体酶的活性;诱导信号通路的激活进而调控相关肝细胞的凋亡和炎症因子的释放;此外,栀子苷对氧化应激反应具有一定的抑制作用,能够清除肝组织内的自由基,减少自由基的生成;促进脂肪代谢,对代谢障碍引起的肝脏损伤具有治疗作用。栀子苷产生肝毒性作用是由患者个体的差异性、给药途径不同、给药剂量不同、肠道内pH差异造成的。栀子苷造成肝毒性的机制与其半缩醛结构相关。     

五子衍宗丸的药理作用及临床应用研究进展

五子衍宗丸是补肾益精的经典方剂,临床使用历史悠久。随着现代研究的不断深入,发现其具有调控下丘脑-垂体-性腺轴、抗氧化应激、抗凋亡、调节自噬、增强免疫、抗衰老等药理作用,临床应用涉及男性生殖系统、神经系统、泌尿系统等多种疾病,尤其是治疗少弱精子症、精液液化不良等男性生殖系统疾病的疗效显著。     

苓桂术甘汤联合常规药物延缓心衰病程有效性和安全性的系统评价和Meta分析

目的 对苓桂术甘汤联合常规药物延缓心衰病程的有效性和安全性进行系统评价。方法 系统检索中国知网、万方医学、维普、中国生物医学文献数据库、PubMed、ClinicalKey、Cochrane Library、Web of Science、Medline、Embase数据库,筛选出苓桂术甘汤治疗心衰的随机对照试验,并用RevMan 5.3软件对最终纳入的研究进行Meta分析。结果 纳入27项研究,总样本量3 569例,其中试验组1 816例,对照组1 753例。Meta分析结果显示,与单用常规药物相比,联用苓桂术甘汤能够提高显效率（相对危险度（RR）=1.41,95%置信区间（CI）［1.29,1.54］,P<0.000 01）和总有效率（RR=1.21,95%CI［1.17,1.25］,P<0.000 01）,降低血清B型脑钠肽（BNP）水平［均属差（MD）=-390.08,95%CI［-538.84,-241.52］,P<0.000 01］和血清N末端脑钠肽水平（NT-proBNP）（MD=-713.83,95%CI［-828.41,-599.25］,P<0.000 01）,升高左心室射血分数（LVEF）（MD=5.73,95%CI［3.33,8.14］,P<0.000 01）,降低左心室舒张末期内径（LVDD）（MD=-5.23,95%CI［-7.18,-3.29］,P<0.000 01）和左心室收缩末期内径（LVSD）（MD=-4.54,95%CI［-6.75,-2.33］,P<0.000 01）,增加心搏出量（SV）（MD=5.90,95%CI［4.56,7.25］,P<0.000 01）,减少肿瘤坏死因子-α（TNF-α）（MD=-37.53,95%CI［-50.72,-24.34］,P<0.000 01）和白细胞介素6（IL-6）（MD=-23.64,95%CI［-47.40,0.11］,P=0.05）,延长6 min步行试验距离（MD=51.08,95%CI［33.01,69.16］,P<0.000 01）,降低中医证候积分（MD=-3.50,95%CI［-4.92,-2.07］,P<0.000 01）,提高患者生活质量（MD=-7.26,95%CI［-10.43,-4.09］,P<0.000 01）,且安全性更高（RR=0.36,95%CI［0.17,0.79］,P=0.01）。结论 结果表明,苓桂术甘汤联合常规药物治疗可以提高心功能,减轻心纤维化,改善预后,且安全性高。     

高效液相色谱法同时测定蟾酥中8种成分的含量

目的建立HPLC法同时检测蟾酥中华蟾酥毒基、酯蟾毒配基、日蟾毒它灵、蟾毒灵、沙蟾毒精、蟾毒它灵、远华蟾毒精和华蟾毒它灵8种成分的含量。方法采用Thermo Scientific C_(18)色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,检测波长296 nm,流速0.6 mL·min~(-1),柱温30℃,进样量10μL。结果 8个成分在对应线性浓度范围内与峰面积线性关系良好,精密度、稳定性和重复性的RSD均<5%,平均回收率在97.2%～99.8%。结论该含量测定方法操作简便、准确可靠,可用于蟾酥的质量控制。     

加工前、后的亳州牡丹皮水提物对2型糖尿病小鼠血糖、血脂等的作用研究

目的:研究加工前、后的亳州牡丹皮水提物对2型糖尿病（T2DM）小鼠的血糖（GLU）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和游离脂肪酸（NEFA）的作用比较。方法:采用高脂饲料喂养雄性昆明小鼠1个月,再采用链脲佐菌素（STZ）120 mg·kg^-1进行腹腔注射,复制T2DM小鼠模型,然后,随机分配已建立成功的小鼠模型至模型对照组、阳性对照组、未加工丹皮给药组和已加工丹皮给药组,并以正常小鼠作为正常对照组。对造模成功的小鼠以各丹皮水提物进行28 d的持续灌胃,再解剖取血,测定T2DM小鼠血清中的各项生化指标。结果:已加工牡丹皮和未加工牡丹皮水提物均能显著的降低T2DM小鼠体内的GLU（P<0.01）、TC（P<0.01）、MDA（P<0.05）,并能使T2DM小鼠体内的SOD显著升高（P<0.01）。结论:加工前、后的牡丹皮水提物均能显著降低T2DM小鼠的血糖值,两者差异无统计学意义,并对血脂的代谢和抗氧化的能力在一定程度上有调节作用。已加工的牡丹皮外观上虽然更加美观,但是在药效上并未增强。     

通窍活血汤含药脑脊液对谷氨酸致PC12细胞损伤的保护作用

目的研究通窍活血汤含药脑脊液对谷氨酸致PC12细胞损伤的保护作用。方法大鼠灌胃给予通窍活血汤提取液制备含药脑脊液后,倒置显微镜下观察细胞形态,MTT法检测细胞活性,台盼蓝染色、LDH法观察细胞膜通透性,试剂盒法检测细胞内NO、MDA水平及SOD、ATP酶活性,DCFH-DA荧光探针染色检测细胞内活性氧(ROS)水平,Fura-2/AM染色检测细胞内游离Ca~(2+)水平,流式细胞联合Annexin V-FITC/PI法分析细胞凋亡。结果与模型组比较,含药脑脊液组细胞形态显著改善,细胞活性、存活率显著升高(P0.05,P0.01),LDH活性,NO、ROS、MDA、游离Ca~(2+)水平及细胞凋亡率显著降低(P0.05,P0.01),SOD、ATP酶活性显著升高(P0.05,P0.01)。结论通窍活血汤含药脑脊液对谷氨酸致PC12细胞损伤具有保护作用。