人参、附子药渣的生物活性初探

目的:初步探讨人参、附子药渣的生物活性。方法:分别制备含有0.53%人参药渣、0.78%附子药渣及含有人参药渣0.26%+附子药渣0.52%的家兔饲料;及含人参药渣1.7%、0.85%、0.425%,附子药渣2.5%、1.25%、0.625%,及人参药渣0.85%+附子药渣1.7%的大鼠及小鼠饲料;将含药渣的兔饲料喂饲1.5月龄家兔50天,观察对其生长发育、肌肉p H值和净膛率的影响;以含药渣鼠饲料喂饲大鼠3个月,观察大鼠一般状态和抗体内细菌感染能力变化;以之喂饲小鼠6周,观察其对小鼠体重和耐寒、耐缺氧应激能力的影响。结果:含人参药渣、附子药渣和人参+附子药渣的饲料可促进家兔体重增长,提高净膛率;可增加大鼠耐受大肠杆菌感染的能力,且长期给药无明显不良反应;可延长小鼠耐缺氧存活时间和增加小鼠耐寒存活时间。结论:人参、附子药渣具有促进动物生长发育、增强抗感染和抗应激能力,具有开发为动物饲料添加剂的潜力。     

盐酸小檗碱体外抗单纯疱疹病毒1型的作用及机制研究

目的:探讨盐酸小檗碱体外抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的作用及作用机制。方法:MTT法检测盐酸小檗碱对Vero细胞的毒性作用,观察HSV-1感染Vero细胞后所致的细胞病变效应(Cytopathologic effects,CPE),实时荧光定量PCR法检测盐酸小檗碱对病毒蛋白gD的mRNA表达水平,免疫印迹(Western blot)法检测盐酸小檗碱对病毒蛋白ICP27和ICP8表达的影响。结果:盐酸小檗碱半数中毒浓度(TC50)为392.5μmol/L,病毒半数抑制浓度(IC50)为66.49μmol/L,选择性指数(SI)为5.9。实时荧光定量PCR结果显示盐酸小檗碱可降低HSV-1 gD的mRNA表达水平。Western blot显示盐酸小檗碱可明显抑制病毒蛋白ICP27和ICP8的表达。结论:盐酸小檗碱具有抗HSV-1的作用,可能与抑制病毒蛋白ICP27的表达进而影响ICP8和gD的表达有关。     

乳没药对抑瘤和受体型酪氨酸激酶活性的影响

目的:研究乳香和没药药对的抑瘤作用,并考察其对肿瘤细胞中受体型酪氨酸激酶(RTKs)的影响,探讨乳没药对抑瘤作用的机理。方法:体外实验:采用乳没药对浸提液,MTT法分别测定其对2种人恶性肿瘤细胞株(SMMC7721、HL-60)增殖的影响,并检测其对肿瘤细胞RTKs活性的影响。体内实验:采用移植性荷瘤H22小鼠模型,接种3天后,荷瘤小鼠随机分组,并给予乳没药对10天,检测肿瘤重量并计算抑制率,同时检测肿瘤组织中RTKs的活性。结果:体外实验:乳没药对浸提液在5mg/ml~10mg/ml浓度下对两种肿瘤细胞的增殖均表现出明显的抑瘤作用,同时对2种肿瘤细胞的受体酪氨酸激酶活性有明显的抑制作用。体内实验:乳没药对在1.08g/kg和2.16g/kg剂量下对H22荷瘤小鼠肿瘤生长有明显的抑制作用,同时对肿瘤组织中受体酪氨酸激酶活性有明显的抑制作用。结论:乳没药对具有明显的抑瘤作用,其抑瘤机理可能与抑制肿瘤细胞内受体酪氨酸蛋白激酶途径有关。     

右归丸对围绝经期综合征/肾阳虚证基因表达谱的影响

目的:研究右归丸对围绝经期综合征肾阳虚证基因表达谱治疗前后的异同。方法:以围绝经期综合征肾阳虚证患者为对象,服用右归丸一个月,应用基因芯片技术,分析治疗前后围绝经期综合征肾阳虚证基因表达谱;结合SAM软件对差异表达基因进行筛选并分析。结果:经核酸定量分析仪检测,6例患者RNA的OD260/OD280比值在1.90~1.98,经琼脂糖凝胶电泳检测,28s和18 s条带清晰,28 s条带约是18 s条带的2倍,说明RNA完整性较好;治疗前后基因表达谱存在明显的差异,表达有差异的基因共81条,ratio值≤0.5的基因62条;ratio值≥2的基因19条,下调基因大于70%,获得基因主要是与免疫应答、代谢通路、信号通路、氧化应激、细胞因子相关基因等,差异表达基因的信号值区为治疗前与治疗后两大类,说明与临床治疗结果符合。结论:围绝经期综合征肾阳虚证患者通过右归丸治疗后,下调基因超过70%,且主要与多种代谢途径密切相关。     

CCl4诱导大鼠纤维化肝组织 microRNA 差异表达及其初步分析

目的：探索 microRNA 在四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠纤维化肝组织中的差异表达及其意义。方法采用 microR-NA 高通量测序分析技术检测对照组(n=10)与模型组(n=10)肝脏组织 microRNA 表达,对差异 microRNA 进行靶基因预测,对靶基因进行基因本(GO)分析、pathway 分析。结果对照组与模型组间筛选出37个差异 microRNA,上调29个,下调8个;从microRNA-基因网络图中发现关键上调为 miR-184、miR-10b-5p、miR-199a-3p 等;关键下调为 miR-200b-3p、miR-199a-5p、miR-125b-5p 等。结论模型组 microRNA 表达谱变化明显,肝纤维化的形成与 microRNA 调控细胞增殖、凋亡、细胞周期等有关。     

135例带状疱疹发病及后遗神经痛相关因素临床回顾研究

目的探求与带状疱疹发病及发生后遗神经痛可能的相关因素。方法收集2007年1月至2012年8月期间北京东直门医院皮肤科135例符合入选标准的带状疱疹患者的住院病历进行回顾性分析。应用SPSS 17.0统计软件进行统计学处理。结果年龄与疱疹前驱痛、疼痛程度均无明显相关性;年龄、疱疹前驱痛、皮损疼痛程度、基础慢性病及开始治疗时间均可能是发生带状疱疹后遗神经痛的相关因素。结论带状疱疹发病、发生后遗神经痛均有一定相关因素,早发现、早治疗,尤其对于老年患者或伴有基础慢性病者防治更有意义。     

平胃散对湿阻中焦证大鼠肝脏水通道蛋白SLC12家族影响的研究

目的:观察平胃散对湿阻中焦证大鼠肝脏水通道蛋白SLC12家族的影响,探讨平胃散揭示湿阻中焦证可能存在的作用机制。方法:将大鼠分成正常组、模型组、自然恢复组、平胃散6.0、3.0、1.5g/kg剂量组,连续灌胃3天。利用酶联免疫法分别检测各组大鼠肝脏水通道蛋白KCC1、KCC3、KCC4、NKCC1含量。结果:与正常组比较,模型组胃肠动力明显障碍,肠道吸收明显降低,Na~+-K~+-ATP酶活力显著降低,肝脏组织KCC1、KCC3、NKCC1含量明显上升,KCC4含量明显下降。与模型组比较,平胃散组胃肠动力肠道吸收明显改善,Na~+-K~+-ATP酶活力显著增强,以平胃散1.5g/kg剂量组尤为明显,KCC1含量下降,KCC3和NKCC1含量明显上升。结论:平胃散能够减轻湿阻中焦证大鼠症状,可能与平胃散降低胃残留,促进肠道吸收功能,改善Na~+-K~+-ATP酶活性,抑制KCC1,激活KCC3和NKCC1的表达有关。     

肿节风对人前列腺癌DU-145细胞PI3K/Akt/mTOR信号传导通路的影响

目的:探讨中药肿节风溶液对人前列腺癌DU-145细胞PI3K/Akt/mTOR信号传导通路的影响.方法 采用细胞培养的方法,用不同浓度的肿节风溶液作用于DU-145细胞48h,用MTT法检测肿节风溶液对DU-145细胞增殖的影响,用RT-PCR检测用药后细胞PI3K、Akt、mTOR和P70(S6K)的基因表达情况.结果:肿节风溶液作用48h后,DU-145细胞增殖受到抑制,并表现为量效关系;DU-145细胞的PI3K、Akt、mTOR和P70(S6K)的表达均呈不同程度的抑制,但不表现为量效关系.结论:肿节风溶液能抑制人前列腺癌DU-145细胞增殖,其抑制细胞增殖的机制与其抑制了细胞的PI3K/Akt/mTOR信号传导通路的作用有关.     

白芷根中香豆素类成分的组织化学定位研究

目的：确定香豆素在白芷药用部位根中的积累部位,为进一步揭示白芷活性成分香豆素类及其积累规律与白芷内部结构及发育的关系奠定基础。方法：结合冰冻切片技术、荧光显微技术对白芷根中香豆素类成分进行组织化学定位研究。结果：白芷木栓层、木质部和栓内层、韧皮部中分布的分泌组织在紫外光的激发下,均有明显的蓝色荧光发生,其中分泌组织的荧光与对照品欧前胡素的荧光相同,而同步阴性对照实验中分泌组织的荧光消失。结论：在白芷根中,香豆素类成分分布于分泌组织内。     

一对2型糖尿病老年双生子基因表达谱动态变化比较

目的分析一对老年同卵双生子2型糖尿病(T2DM)随病程延长而稳定表达的基因功能特征。方法连续2年分6次调查一对老年双生子的T2DM病情变化并作基因芯片实验,筛选出表达量随病程延长而连续升高的基因为双生子的共表达基因,通过FatiGO Compare工具比较两组共表达基因功能注释的异同。结果分别筛选到大、小双的共表达基因473和529个,其中相同的共表达基因功能富集于"T细胞活化调节"基因本体(GO)类,不同的共表达基因功能差异体现在分子功能调节及刺激反应2个GO类别。结论免疫功能基因的异常表达是该对双生子T2DM随病程延长而稳定出现的共性特征。