罗布麻叶提取物的抗高血压作用及其机制研究

目的: 研究罗布麻叶提取物(extracts from leaves of Apocynum venetum,ELA)的抗高血压作用及其激活磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和(或)蛋白激酶B(Akt)信号转导通路促进一氧化氮释放的作用。 方法: 采用双肾双夹法建立Beagle犬高血压模型,随后按血压值将Beagle犬随机分为模型组(ig,生理盐水)、马来酸依那普利组(ig,1.66 mg·kg^-1)、ELA低剂量组(ig 23 mg·kg^-1)、高剂量组(ig ELA 46 mg·kg^-1)。受试动物在单次给予上述药物后,每隔1 h记录1次动物血压,连续8 h,观察ELA的降压作用;采用细胞培养法,观察ELA对内皮细胞(EAhy 926)一氧化氮(NO)产量和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响;采用Western blot法,观察ELA对eNOS,磷酸化内皮型一氧化氮合酶(p-eNOS)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)以及磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)表达量的影响。 结果: 给药后,ELA高、低剂量组Beagle犬收缩压分别为(140.4±7.5),(136.2±6.8) mmHg;舒张压分别为(63.5±3.3),(72.2±4.4) mmHg;平均血压分别为(88.9±4.7),(93.3±5.2)mmHg,与给药前相比均显著降低(P<0.01);ELA可显著增加EA Hy926细胞NO的释放量(P<0.01),提高eNOS活性(P<0.01);Western blot结果表明,ELA可显著增加p-eNOS,p-PI3K以及p-Akt的表达量,与对照组相比,具有显著差异(P<0.01)。 结论: ELA具有明显的降压作用。激活血管内皮细胞内PI3K/Akt信号转导途径,从而促进eNOS磷酸化,提高eNOS活性、增加NO可能是ELA降压作用的机制之一。     

清火胶囊对发热大鼠的解热作用及其机制研究

摘要：目的:探究清火胶囊对脂多糖所致大鼠发热模型的解热作用,并研究其作用机制。方法:60只SPF级SD健康大鼠按基础体温随机分为6组：正常对照组、模型组、阳性对照组(阿司匹林,0.125 g·kg-1)、清火胶囊高(1 g·kg-1)、中(0.5 g·kg-1)、低(0.25 g·kg-1)剂量组,每组10只。连续给药7 d,末次给药30 min后给予20μg·kg-1脂多糖溶液造模,记录造模后4 h内的大鼠体温变化,取大鼠血清测定血清白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量,取大鼠下丘脑测定环磷酸腺苷（cAMP）、下丘脑前列腺素E2（PGE2）以及下丘脑腹中隔区精氨酸加压素（AVP）水平。结果:造模后,清火胶囊高、中剂量组在造模后3、4 h的体温升高幅度低于模型组,低剂量组在4 h的体温升高幅度低于模型组（P<0.05）;清火胶囊高剂量组TNF-α、IL-6、 IL-1β水平均低于模型组,清火胶囊中剂量组TNF-α、IL-1β水平均低于模型组,清火胶囊低剂量组TNF-α水平均低于模型组（P<0.05）。清火胶囊各剂量组大鼠cAMP、PGE2水平均低于模型组（P<0.05）,AVP水平与模型组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论:清火胶囊能够降低发热大鼠体温,抗炎效果明显,其解热功效可能与降低各种炎症因子水平,抑制下丘脑发热介质PGE2与cAMP有关。     

辅酶Q10毒理学安全性的小鼠实验评价

目的 评价辅酶Q10毒理学安全性的小鼠实验结果.方法 选择健康小鼠50只,雌鼠及雄鼠各占一半,通过辅酶Q10毒理学试验,分析辅酶Q10的安全性.结果 50只小小鼠经短时间毒性试验,每kg体重LD50超过15 g,不具备毒性;小鼠骨髓静细胞微核试验,检测结果为阴性;小鼠检验精子畸形情况,结果为阴性;小鼠检验Ames实验,结果显示无论是否添加S9,均未发现任何突变基因;经30 d的小鼠喂养实验,小鼠无害辅酶Q10作用剂量为每kg·bw(bw:body weight,即体重)为1.32 g.结论 辅酶Q10无毒性,而且不具有基因突变性.     

不同浸提方法对一次性使用输注器具热原试验的影响

目的：比较一次性使用输注器具产品不同浸提方法所获得的供试液对其热原质检测的影响。方法：参照GB/T14233.2-2005和GB/T16886.12-2005的试验原则，对不同生产企业的58批次不同规格的4个不同品种的一次性使用输注器具产品进行了热原检测。结果：58批次不同规格的一次性使用输注器具产品以0.9%氯化钠注射液为浸提液，按0.2 g：1 mL 121 ℃保温1h，按家兔体重每公斤注射10 mL，热原检查结果家兔体温升温均小于0.6 ℃；同批次一次性使用输注器具产品以0.9%氯化钠注射液为浸提液抽取至公称容量 37 ℃保温24 h，按家兔体重每公斤注射10 mL，热原检查结果家兔体温升温均小于0.6 ℃。从58批次4个不同品种的样品中各抽取3个批次的样品，以含10 EU·mL-1细菌内毒素的0.9%氯化钠注射液为浸提介质，按0.2 g：1 mL 121 ℃保温1 h，按家兔体重每公斤注射10 mL，热原检查结果家兔体温升温均小于0.6 ℃；同批次一次性使用输注器具产品以含10 EU·mL-1细菌内毒素的0.9%氯化钠注射液抽取至公称容量 37 ℃保温24h，按家兔体重每公斤注射10 mL，热原检查结果每组家兔（3只·组-1）体温升温至少有1只大于0.6 ℃。结论：当温度升高时，可能导致浸出的热原质降低，从而影响热原实验结果。     

不同浸提方法对一次性使用注射器细胞毒性的影响

目的：比较两种浸提方法对一次性使用注射器细胞毒性试验结果的影响。方法：分别采用公称容量法和克重法用含血清的1640完全培养基对一次性使用注射器进行浸提，37 ℃、24h加入含细胞的96孔板中继续培养，72h后通过MTT比色法进行吸光度检测，采用细胞增殖度比较两种浸提方法对细胞毒性试验结果的影响。结果：1mL一次性使用注射器用两种浸提方法进行细胞毒性试验结果均为1、2级，两种浸提方法的相关系数R为0.704，P为0.034；5mL一次性使用注射器用两种浸提方法进行细胞毒性试验结果均为1、2级，两种浸提方法的相关系数R为0.689，P为0.040；10mL一次性使用注射器用两种浸提方法进行细胞毒性试验的结果有6批为1、2级，有3批为4级，两种浸提方法的相关系数R为0.956，P为0.000。结论：用两种浸提方法对3种规格的注射器进行细胞毒性试验，3种规格一次性使用注射器的细胞毒性试验结果均具有良好的相关性，两种浸提方法对一次性使用注射器细胞毒性的结果基本无影响。     

整肠丸的长期毒性研究

目的：研究整肠丸在 SD 大鼠的长期毒性。方法：将 120 只 SD 大鼠随机分为高剂量组（3.96 g/kg）、中剂量 组（1.98 g/kg）、低剂量组（0.99 g/kg）和阴性对照组,每组 30 只。采用经口灌胃给药法,每日一次,每周 6 天, 连续给药 3 个月,并停药 2 周作恢复性观察。试验期间每日观察一般状况,每周称重和记录摄食量,分别在实验结 束和停药恢复期测定大鼠的脏器系数、血液生理生化指标和组织病理学变化。结果：给药 3 个月后各组大鼠一般状 态和组织病理学检查无明显异常;各给药组体重、摄食量、脏器系数与对照组比较无显著性差异（P＞0.05）;给药 期血常规指标和血生化指标与对照组比较,少部分指标有显著性差异（P＜0.05）,恢复期无显著性差异。结论：以 人体推荐量的 60 倍、30 倍、15 倍对 SD 大鼠进行 3 个月喂养试验,整肠丸对少部分 SD 大鼠血液生理生化指标有影响, 停药 2 周后可恢复。     

罗布麻叶提取物对离体大鼠胸主动脉环的舒张作用

目的:研究罗布麻叶提取物(extracts from leaves of Apocynum venetum,ELA)对离体大鼠胸主动脉环的作用及其可能的机制。方法:采用累积加药法,观察ELA对苯肾上腺素(PE)预收缩的主动脉环张力的影响;观察hemoglobin,亚甲蓝(MB)预处理对ELA扩血管作用影响;观察左旋硝基精氨酸甲酯盐酸盐(L-NAME),甲基异硫脲硫酸盐(SMT)预处理对ELA的扩血管作用的影响;观察四乙胺(TEA),4-氨基吡啶(4-AP)和格列苯脲(GLB)对ELA的血管舒张作用的影响;采用Ca2+剥夺和复加法,观察ELA对细胞内钙释放和外钙内流所引起的血管环收缩反应的作用。结果:ELA可显著舒张PE预收缩的主动脉环,低浓度下(1×10-6～3×10-4)g.mL-1为内皮依赖性作用,而高浓度下(3×10-4,1×10-3)g.mL-1则为内皮非依赖性舒张。低浓度下(1×10-6～3×10-4)g.mL-1,ELA的扩血管作用可被Hemoglobin,MB(P<0.05)和L-NAME,SMT(P<0.05)阻断。高浓度下(3×10-4～3×10-3)g.mL-1,ELA可显著抑制细胞内钙释放和细胞外钙内流(P<0.05);钾通道阻滞剂TEA,4-AP和格列苯脲可不同程度地阻断ELA扩血管作用。结论:ELA可剂量依赖性的舒张PE预收缩的胸主动脉环,呈现低浓度下内皮依赖、高浓度下内皮非依赖的特点。低浓度下ELA的血管舒张作用可能与NO释放有关,高浓度下其作用需要Ca2+,K+通道参与。