采用重叠PCR构建高灵敏度酵母细胞传感器评估遗传毒性化合物

采用重叠PCR（overlap PCR）方法构建了pdr5与snq2基因敲除组件,研究了pdr5、snq2基因突变对酵母细胞传感器评估遗传毒性的影响。考察了野生型、pdr5单基因突变、snq2单基因突变与pdr5、snq2双基因突变酵母细胞传感器暴露于系列浓度甲磺酸甲酯（MMS）、甲磺酸乙酯（EMS）、顺铂、4-硝基喹啉-N-氧化物（4NOQ）、5-氟尿嘧啶（5-FU）、羟基脲、水杨酸和葡萄糖溶液24 h后的细胞生长抑制情况与16 h后的荧光诱导情况。研究结果表明,overlap PCR方法能够高效率构建基因突变酵母细胞传感器;snq2单基因突变与pdr5、snq2双基因突变细胞传感器检测遗传毒性的准确度为100%,高于野生型与pdr5单基因突变细胞传感器（87.5%）;pdr5、snq2双基因突变酵母细胞传感器表现出最高的遗传毒性检测灵敏度,为构建高准确度与灵敏度的酵母细胞传感器提供了思路与方法,为酵母细胞膜转运蛋白基因pdr5与snq2的进一步功能研究奠定了基础。     

桡骨远端骨折的治疗体会

桡骨远端骨折是临床最常见的四肢骨折之一,其中以伸直型多见,其治疗多采用手法复位,小夹板固定.然该病后期恢复多有遗憾,概因复位后缺乏锻炼及该骨折多见于老年人,而老年人多惧痛怕动所致.     

药物膜通透性体外评价方法研究进展

药物膜通透性是影响药物安全性和有效性的关键因素,因此在新药研发初期对药物膜通透性进行筛选是提高研发效率、降低研发成本的有效途径。体外评价方法因具有快速、简单等特点已成为药物膜通透性研究领域的热点。本文综述了近年来有关两相分配法、色谱测定法、毛细管电泳测定法、光学传感器测定法以及平行人工膜通透性测定法等体外测定方法在药物膜通透性评价中的应用进展。     

孕产妇血中甲状腺激素及促甲状腺素变化

本文提供了杭州地区正常孕产妇甲状腺激素及促甲状腺素的部分抽样测定值和95%正常范围估计值,以及妊娠,产后动态变化.     

LC-APCI-MS/MS法测定大鼠血浆中维胺酯浓度及其药代动力学研究

本文建立一种高灵敏度的液质联用方法用于快速测定大鼠血浆中维胺酯的浓度.采用蛋白沉淀法制备样品;色谱柱为Agilent TC C18柱(150 mm ×4.6 mm ID,5 μm),流动相为甲醇-水-甲酸(93:7:0.1),辛伐他汀作为内标;在三重四极杆串联质谱仪上,采用大气压化学离子化(APCI),正离子方式诜择性离子模式讲行监测;血浆浓Tel: 86-25-83271251, Fax: 86-25-83271269, E-mail: lwcpu@ 126. com度在0.05～50 ng·mL-1线性关系良好,定量限为10 Pg·mL-1,日内、日间精密度分别在95.97%～104.43%,RSD在4.63%～10.69%.本文利用该方法对大鼠进行药代动力学研究,3个剂量(2.5、5和10 mg·kg-1)大鼠灌胃给药后的药代动力学参数分别为T1/2:(11.28±7.23)、(8.90±3.82)、(8.01±5.65)h;AUC0-∞:(103.41±61.46)、(190.23±74.99)、(421.66±229.20)ng·h·mL-1;MRT:(6.31±0.75)、(5.98±0.71)、(6.18±0.97)h;CL/F:(30.10±13.67)、(29.58±10.59)、(31.18±17.51)L·h-1·kg-1;Vd/F:(414.94±159.82)、(356.16±139.85)、(369.28±322.72)L·kg-1.     

BAPTA-AM在体外大鼠血浆中3个代谢产物的结构确证

目的：确证BAPTA-AM在体外大鼠血浆中3个代谢产物的结构。方法：采用碱性催化水解法，制备得到BAP-TA-AM3个降解产物，并通过NMR和MS对其进行结构解析。比较体外代谢产物和制备的对照品的色谱和质谱行为，对体外代谢产物的结构予以确认。结果和结论：BAPTA-AM在体外大鼠血浆中的3个代谢产物是：1，2-双（邻氨基酚氧基）乙烷-N,N,N′,N′-四乙酸-N-乙酰氧甲基酯、1，2-双（邻氨基酚氧基）乙烷-N，N，N′，N′-四乙酸-N,N′-二乙酰氧甲基酯和1，2-双（邻氨基酚氧基）乙烷-N,N,N′,N′-四乙酸-N，N,N′-三乙酰氧甲基酯。     

超声心动图评价急性心肌梗死Ⅱ期心脏康复前后心功能及同步性

目的： 应用超声心动图评价急性心肌梗死患者行Ⅱ期心脏康复前后心功能及同步性改变。方法: 对20例急性心肌梗死患者Ⅱ期心脏康复前后使用脉冲多普勒结合心电图计算主肺动脉射血前时间差,即心室间机械延迟时间(IVMD)。于心尖四腔心切面,使用M型超声心动图,计算出三尖瓣环收缩期位移(TAPSE)。使用实时三维超声心动图获取心尖四腔心全容积图像,在Qlab 9.0软件下获得心率、左室射血分数(LVEF)、左室舒张末容积(LVEDV)、左房最大容积(LAVmax)和左房射血分数(LAEF)。软件自动计算出左室16节段达收缩期最小容积点时间最大时间差(Tmsv16 Dif)心率校正值,即LVTmsv16 Dif/R R(%),以及左房16节段达收缩期最小容积点时间最大时间差(Tmsv16 Dif)心率校正值,即LATmsv16 Dif/R R(%)。结果: 急性心肌梗死患者Ⅱ期心脏康复后心率、LATmsv16 Dif/R R(%)明显低于康复前(P<0.001和P<0.05),LVEF、LAEF明显高于康复前(P<0.001和P<0.05),康复前后IVMD、TAPSE、LVEDV、LAVmax、LVTmsv16 Dif/R R(%)比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论: 急性心肌梗死患者行Ⅱ期心脏康复后左心收缩功能及左房同步性较康复前改善。     

盐酸莫西沙星对映异构体含量的HPLC法测定

建立了高效液相色谱法拆分盐酸莫西沙星及其对映异构体,并定量测定对映异构体的含量.采用Zorbax SB-C18色谱柱,流动相为手性流动相添加剂溶液(含3 mmol/L硫酸铜与6 mmol/L L-苯丙氨酸的水溶液)-甲醇(78∶22),检测波长293 nm.盐酸莫西沙星与其对映异构体分离完全,对映异构体在0.1～2μg/ml的浓度范围内线性关系良好,平均回收率为98.6％,RSD为1.2％.     

扩张型心肌病患者血清ST2水平及意义

目的:探讨IL-1受体家族成员ST2在扩张型心肌病心衰中的临床意义. 方法:选择扩张型心肌病心衰患者36例(DCM组),根据纽约心脏病学会(NYHA)心功能分级标准:Ⅱ级12例,Ⅲ级11例,Ⅳ级13例;选择36例健康体检者作为对照(对照组).检测两组患者血清中的ST2浓度,分析其与B-型尿钠肽(B-type natriuretic peptide, BNP)、左室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)、年龄及心衰病史之间的相关性,并比较不同心功能分级患者之间ST2浓度的差异. 结果:DCM心衰患者血清中ST2浓度比正常组明显升高(P<0.05),与BNP(r=0.356, P<0.05)和血尿素氮溶度(r=0.312, P<0.05)正相关,与LVEF值负相关(r=-0.249, P<0.05),与年龄(r=-0.037, P=0.613)和心衰病史(r=-0.116, P=0.381)无关,随着NYHA心功能分级增高,血清ST2浓度也明显升高(P<0.05). 结论:血清ST2是DCM心衰新的生化标志物,并且与心衰的严重程度密切相关.     

克服英语学习高原现象的新方法

常规意义上的英语学习高原现象是指英语学习者取得一些进步后,感觉学习效率不高,成绩不大,似乎处于停滞状态的现象。这种“高原现象”可以通过积极休息、调整心理、提高学习兴趣、改进学习方法得以解决。笔者所指的“高原现象”,既指上述高原现象,又有更广泛的含义——即学生在学习的一定阶段遇到困难,但始终克服不了,以致学习兴趣消失殆尽,或者中断学习,或者到了学习结束时,仍达不到听说读写译的应用水平。