AQPs在宫颈鳞癌癌变过程中的表达及意义

目的研究水通道蛋白(aquaporins,AQPs)在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤样变(CIN)和宫颈鳞癌中的表达,分析其与宫颈鳞癌临床病理资料的相关性,探讨其在宫颈鳞癌病变中的可能作用及意义。方法免疫组化检测47例宫颈鳞癌、37例CIN、16例正常宫颈组织中AQPs的表达及分布。双重免疫组化染色法检测宫颈鳞癌中AQP1与VEGF,AQP3与VEGF,AQP8与VEGF的共同表达与分布。结果①AQP1在3组宫颈组织间质的微血管内皮细胞中表达;②AQP3、AQP4、AQP5和AQP8在正常宫颈鳞状上皮细胞、CIN异形细胞及宫颈鳞癌癌细胞胞质和(或)胞膜中表达;③AQP1在CIN的表达高于正常宫颈组织和宫颈鳞癌(P<0.05),在临床Ⅰ期宫颈鳞癌的表达高于临床Ⅱ期(P<0.05);④AQP3、AQP4、AQP5、AQP8在正常宫颈组织、CIN、宫颈鳞癌的表达逐渐增高;⑤AQP3在低分化组宫颈鳞癌中的表达高于中-高分化组(P<0.05);⑥AQP1和VEGF,AQP3和VEGF,AQP8和VEGF在宫颈鳞癌中共同表达。结论 AQP1、AQP3、AQP4、AQP5和AQP8在宫颈鳞癌癌变过程中起了一定的作用;AQP1、AQP3和AQP8可能参与宫颈鳞癌微血管的形成。     

宫颈癌新辅助动脉化疗敏感性相关蛋白质组的研究

目的利用蛋白质组学的方法研究宫颈鳞癌新辅助动脉化疗前后的差异表达蛋白,以期得到与宫颈癌化疗敏感性相关的蛋白质。方法选取巨块型宫颈鳞癌经新辅助动脉化疗有效的患者18例。其中8例通过双向凝胶电泳技术分离化疗前后的宫颈鳞癌组织的差异蛋白点,然后用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱鉴定差异表达的蛋白质。在另外10例患者中用Western blot方法验证兴趣蛋白质Peroxiredoxin 1和Galectin-1在化疗前后的表达差异。结果建立了宫颈鳞癌有效组化疗前后蛋白差异表达的双向凝胶电泳图谱,发现化疗前后存在3倍以上量差表达的蛋白点共有116个(P<0.05),其中31个差异蛋白点通过质谱分析和数据库的检索得到了鉴定,其中化疗后表达上调的蛋白点有15个,表达下调的蛋白点有16个。West-ern blot方法验证了两个兴趣蛋白在化疗前后的表达差异。结论利用蛋白质组学方法可寻找到宫颈鳞癌新辅助动脉化疗敏感性相关蛋白,从而实现在化疗前预测肿瘤对化疗药物的敏感性,使患者得到更加有效的个体化治疗。     

子痫前期产妇胎盘胎膜中水通道蛋白8和水通道蛋白9的表达和意义

目的研究水通道蛋白8(aquaporin 8,AQP8)和水通道蛋白9(AQP9)在妊娠期高血压及子痫前期产妇胎盘胎膜上的表达,探讨其在子痫前期发病中的作用。方法选取2007年1月～2009年1月笔者医院产科足月产妇90例,其中正常妊娠30例,妊娠期高血压30例,子痫前期30例。采用免疫组化SP法,检测各组胎盘胎膜中AQP8和AQP9的表达,分析其与高血压程度、血乳酸脱氢酶水平和24h尿蛋白定量等的相关性。结果在子痫前期组,AQP8在羊膜上皮细胞的表达显著高于绒毛膜滋养细胞和胎盘滋养层细胞,而AQP9在胎盘滋养层细胞的表达显著高于绒毛膜滋养细胞和羊膜上皮细胞。子痫前期组,AQP8在羊膜上表达显著高于正常组,而在胎盘上的表达显著下降;AQP9在胎盘上表达显著高于正常组,在羊膜上表达轻度升高。子痫前期产妇胎盘上AQP8,AQP9的表达与血乳酸脱氢酶水平相关,而与24h尿蛋白水平无关。结论 AQP8、AQP9在子痫前期产妇胎盘胎膜上表达异常,可能参与子痫前期的发生和发展。     

S100A9在宫颈鳞癌癌变过程中的表达及意义

目的:检测S100A9在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌中的表达,分析其在宫颈癌癌变过程中的表达变化以及和宫颈癌临床病理资料的相关性,探讨其在宫颈癌癌变中的可能作用.方法:采用免疫组化SP法,检测40例宫颈鳞癌患者、50例CIN患者和30例正常宫颈组织患者鳞状上皮组织中S100A9蛋白的表达情况,分析其与临床病理特征的相关性.结果:(1)S100A9在正常宫颈组织、CIN、宫颈鳞癌中的表达逐渐增高;在CIN Ⅰ、CIN Ⅱ、CIN Ⅲ中的表达也逐渐增高;(2)S100A9的表达与宫颈鳞癌的组织分化程度密切相关,依次为高分化>中分化>低分化;(3)S100A9的表达与宫颈鳞癌的临床分期、淋巴转移、血管侵犯无关.结论:S100A9在宫颈鳞癌的癌变过程中起了重要的作用,与宫颈鳞癌的组织分化密切相关.     

Two-dimensional electrophoresis analysis of differential protein expression in squamous carcinoma of the cervix

Objective： To establish and optimize the two-dimensional gel electrophoresis （2-DE） maps of squamous carcinoma of the cervix and to study the protein difference between squamous carcinoma of the cervix （SCC） and normal cervical tissue. Methods： Using Two-dimensional gel electrophoresis followed by computer-assisted image analysis, the differential proteins between squamous carcinoma of the cervical tissue and normal cervical tissue were compared. Then using matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry, the differential proteins were identified. Results： The well-resolved and reproducible two-dimensional gel electrophoresis patterns of squamous carcinoma of the cervix tissue and normal cervical tissue were obtained. After silver staining, the average matching ratio of squamous carcinoma of the cervix was 86.1%. There was a good reproducibility of spot position in 2-DE map, with average deviation in IEF direction of 0.95±0.13 mm, while in SDS-PAGE direction it was 1.20±0.18 mm. Ten protein spots were identified by mass spectrometry, some of which were involved in cell proliferation, cell apoptosis, intracellular enzymes, structural proteins, cycle regulation, and tumor occurrence. Conclusion： The differentially expressed proteins provide a fundamental basis for further study of human squamous carcinoma of the cervix and screening of its specific markers.     

水通道蛋白1和水通道蛋白3在羊水过少孕妇胎盘和胎膜的表达及其意义

目的 研究水通道蛋白1(AQP1)和AQP3在羊水过少孕妇胎盘、胎膜中的表达及分布,探讨其在羊水平衡途径中的作用. 方法 选取30例孤立性羊水过少的足月孕妇为研究组,同期分娩的30例正常羊水量的足月孕妇为对照组.分别采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学SP法,检测两组胎盘、胎膜组织中AQP1和AQP3 mRNA和蛋白的表达及分布. 结果 AQP1mRNA在研究组羊膜组织中的表达为对照组的0.31,AQP1蛋白在研究组羊膜组织中的表达为0.14±0.02,较对照组的0.25±0.03明显下调(P<0.05).而在胎盘、绒毛膜中的分布及表达强度两组间差异无统计学意义(P>0.05).AQP3 mRNA在研究组羊膜和绒毛膜中的表达分别为对照组的0.31和0.37,而胎盘中的表达为对照组的7.36.AQP3蛋白在研究组羊膜和绒毛膜中的表达分别为0.18±0.05和0.18±0.04,均较对照组的0.26±0.03和0.29±0.06明显下调(P<0.05),而在胎盘组织中的表达研究组为0.47±0.09,较对照组0.28±0.01明显上调(P<0.05). 结论 AQP1和AQP3在羊水过少孕妇胎盘、胎膜组织中表达的改变为羊水减少后的代偿性反应.     

水通道蛋白3、9在特发性羊水过多产妇胎盘和胎膜中的表达变化及意义

目的 探讨水通道蛋白(AQP)3、9在特发性羊水过多产妇胎盘和胎膜中的表达、分布及其在特发性羊水过多发病巾的作用.方法 2006年6月至2008年3月,选择在温州医学院附属第二医院产科住院并分娩的21例特发性羊水过多的足月产妇为研究组,同期分娩的30例羊水量正常的足月产妇为对照组.采用实时荧光定量PCR技术,检测两组产妇胎盘、胎膜中AQP3、9 mRNA的表达及分布,采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白.过氧化物酶(SP)连接法枪测两组产妇胎盘、胎膜中AQP3、9蛋白的表达及分布.结果 (1)两组产妇羊膜、绒毛膜、胎盘中均可检测到AQP3、9 mRNA的表达.AQP3、9主要表达于羊膜上皮细胞、绒毛膜滋养细胞、胎盘滋养细胞.(2)研究组羊膜上皮细胞AQP3、9 mRNA的表达分别为对照组的5.00倍和3.25倍,而研究组绒毛膜滋养细胞AQP3、9 mRNA的表达分别为对照组的2.03倍和2.08倍,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.01);但是研究组胎盘滋养细胞AQP3、9 mRNA的表达均明显低于对照组,差异也有统计学意义(P<0.01).(3)AQP3、9蛋白在研究组羊膜上皮细胞的表达强度为7.5±2.0、11.1±1.8,对照组为5.3 ±1.6、5.6±2.3,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);AQP3、9蛋白在研究组绒毛膜滋养细胞的表达强度为7.5±2.0、10.0±1.6,对照组为5.4±2.2、5.6±2.1,分别比较,差异也有统计学意义(P<0.05),但是AQP3、9蛋白在胎盘滋养细胞的表达强度(3.5±1.4、4.0 ±2.5)较对照组(5.6±1.3、7.1±2.9)明显下调(P<0.05).结论 AQP3、9在特发性羊水过多产妇胎盘和胎膜中的表达变化可能为羊水增加后的代偿性反应,其调节机制尚待进一步研究.     

水通道蛋白1在羊水量异常产妇中的表达及意义

目的:研究水通道蛋白1在产妇胎盘、胎膜中的分布及表达,探讨水通道蛋白1在异常羊水量调节中的作用。方法:采用实时荧光定量PCR和免疫组化SP法,检测30例羊水量正常,30例羊水过少,21例羊水过多产妇胎盘、胎膜组织中水通道蛋白1的分布及表达。结果:水通道蛋白1在羊水过少产妇羊膜组织上的表达较羊水量正常组明显下调,在羊水过多产妇羊膜组织上的表达明显上调,均P<0.05。而水通道蛋白1在3组的胎盘和绒毛膜上的分布及表达强度差异无显著性。结论:水通道蛋白1在胎盘、胎膜组织表达,其在羊膜上的表达与羊水量异常的发生发展相关。     

水通道蛋白1和水通道蛋白3在羊水过少孕妇胎盘和胎膜的表达及其意义

Objective To study the expression of aquaporin 1 (AQP1) and aquaporin 3 (AQP3) in fetal membranes and placenta in pregnant women with oligohydramnios and to explore their function in the balance of amniotic fluid. Methods Thirty cases of term pregnancy with oligohydramnios were selected as the experimental group and 30 healthy term pregnant women with normal amniotic fluid volume were served as control. The expressions of mRNA and protein of AQP1 and AQP3 in fetal membranes and placenta were examined by real-time polymerase chain reaction and streptavidi peroxidase immunohistochemiscal staining. Results The expression of AQP1 mRNA in the amnion of the experimental group was 0.31 relative to that of the control group. The expression of AQP1 protein in the amnion of the experimental group was 0.14±0.02, which showed significant decrease when compared with the control (0.25±0.03) (P<0.05), while no significant difference in the chorion and placenta was found between the two groups(P>0.05). The amount of AQP3 mRNA expressions in amnion and chorion in the experimental group were 0.31 and 0.37 relative to those of the control group, respectively, while 7.36 in the placenta. The expression of the AQP3 protein in the amnion and chorion in the experimental group were 0.18±0.05 and 0.18±0.04, respectively, which showed significant decrease when compared with those in the control group (0. 26±0.03 vs 0.29± 0.06, P<0.05). But the expression of AQP3 protein in the placenta of experimental group was significantly higher than that of the control (0.47±0.09 vs 0.28±0.01, P<0.05). Conclusions The alterations of AQP1 and AQP3 expressions in fetal membrane and placenta in oligohydramniotic women are adaptive response to oligohydramnios.