乌骨藤粗提物对大鼠胶质瘤C6细胞的体外实验研究

目的 观察乌骨藤粗提取物(MTE)不同组分对大鼠C6胶质瘤细胞增殖情况的影响,探讨其作用机制.方法 采用新型四氮唑盐法(MTS)检测MTE的Fr1、Fr2、Fr3组分对C6细胞增殖的影响;采用流式细胞仪检测Fr2对C6细胞凋亡和周期的影响;采用荧光定量PCR(qPCR)技术检测不同浓度Fr2对C6细胞的Bax、Bcl-2表达的影响.结果 MTE的Fr1、Fr2、Fr3均能显著抑制C6细胞的增殖(JP＜0.05),与阳性对照组5-氟尿嘧啶(5-FU)相比抑制率也较高(P＜0.05),其半数抑制浓度分别为:60.32、52.30、83.83 μ g/ml.经80、160 u g/ml的Fr2处理24 h后,可有效促进C6细胞早期和晚期凋亡(P＜0.05),其周期被阻滞在G2期;Fr2相同方式处理后,C6细胞中Bax表达水平分别提高到(124.80±7.68)％和(380.30±6 91)％;Bcl-2表达水平分别降低到(84.20±3.10)％和(34.20±4.80)％(P＜0.05).结论 MTE能够显著抑制C6胶质瘤细胞的增殖,其中主要有效成分Fr2能够诱导C6细胞发生G2期周期阻滞,并通过影响Bax和Bcl-2的表达,促进其凋亡.     

莽吉柿提取物通过调控MAPK/ERK信号通路诱导宫颈癌细胞凋亡的作用研究

目的: 研究莽吉柿(Garcinia mangostanaSL.)提取物对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响。方法:使用0μg/ml、0.75μg/ml、1.25μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml的莽吉柿提取物体外培养Hela细胞,CCK-8法检测其对宫颈癌细胞增殖的影响;使用不同浓度莽吉柿提取物体外培养Hela细胞,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞活性氧(Cell reactive oxygen, ROS)表达水平;不同浓度莽吉柿提取物体体外培养Hela细胞,Western Blot检测凋亡相关蛋白BCL-2、BAX、p-ERK的表达。 结果: 莽吉柿提取物对宫颈癌细胞的增殖具有显著的抑制作用(P<0.05),IC50为1.63μg/ml。流式细胞术检测发现, 0、2.5μg/ml、5μg/ml的莽吉柿提取物处理后Hela细胞的凋亡率分别为(3.30 ± 0.10)%,(4.19 ± 0.24)%,(14.03±0.21)%,具有显著性差异(p＜0.05)。流式细胞术检测发现0、5μg/ml的莽吉柿提取物处理后,细胞活性氧(ROS)水平显著提高(P<0.05),mean值分别为(129796 ± 1336)和(481665 ± 9804)。荧光显微镜结果显示其ROS荧光水平显著提高。Western Blot检测发现宫颈癌Hela细胞中Bcl-2蛋白显著降低、BAX蛋白显著升高、p-ERK蛋白显著降低(P均<0.05)。结论: 莽吉柿提取物对宫颈癌细胞的影响可能是通过诱导细胞氧化损伤,调控肿瘤细胞MAPK/ERK信号通路,调控凋亡相关蛋白,进而诱导细胞发生凋亡,抑制肿瘤细胞的增殖。     

AQP1和AQP3在宫颈癌新辅助化疗前后的表达变化及意义

目的观察新辅助化疗前后宫颈癌组织中水通道蛋白1（AQP1）与水通道蛋白3（AQP3）表达的变化，探讨两者在宫颈癌新辅助化疗中的意义。方法选择宫颈鳞癌患者30例，术前接受以顺铂为基础的有效新辅助化疗。化疗前和手术中分别取癌组织标本，应用RT-PCR法、Westernblot法和免疫组化法对水通道蛋白（AQPs）的mRNA、蛋白和组织分布进行检测。结果化疗后AQP1和AQP3的mRNA表达量约为化疗前的3倍和2.7倍，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。AQP1和AQP3蛋白在宫颈癌组织中大量表达，在细胞膜和胞质中均有分布，化疗后表达量提高，以胞质更为明显。30例患者经过化疗后，其中19例完全缓解，11例部分缓解。完全缓解组患者化疗后AQP1和AQP3的mRNA和蛋白表达的增值虽然均大于部分缓解组，但差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论AQP1和AQP3在新辅助化疗后宫颈癌组织中的表达增加，增幅可能与化疗效果相关。     

经颈内静脉入路植入静脉输液港原发性导管异位的处理

目的探讨经颈内静脉(IJV)入路植入静脉输液港(TIVAP)发生原发导管异位(PCM)的特征与处理。方法回顾性分析2017年8月至2022年8月在郑州大学第一附属医院乳腺外科单一治疗组连续收治的经IJV入路植入TIVAP的587例乳腺癌患者的临床资料。结果经IJV入路共植入593例胸壁TIVAP, 发生PCM 18例(3.0%)。其中经右侧入路425例, PCM 1例(0.2%)。经左侧入路168例, PCM 17例(10.1%)。18例PCM中11例首选猪尾巴导管介入调整, 10例成功, 1例失败;3例首选数字减影血管造影(DSA)下开放调整, 均成功;4例首选盲视下开放调整, 2例成功, 2例失败。结论经左侧颈内静脉入路植入TIVAP的PCM发生率明显高于右侧, 应用猪尾巴导管介入调整或DSA下开放调整是处理PCM的可行方法。     

硫辛酸对奥硝唑所致少弱精子症大鼠精子发生的保护作用研究

目的:研究硫辛酸(LA)对奥硝唑(ORN)所致少弱精子症模型雄性大鼠生精功能的保护作用。方法:取70只雄性SD大鼠,随机分成7组,每组10只,分别为:A组(溶剂对照组):1 ml 0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)+1 ml橄榄油;B组(低剂量ORN造模组):400 mg/kg ORN+1 ml橄榄油;C组(低剂量ORN+低剂量LA治疗组):400 mg/kg ORN+50 mg/kg LA;D组(低剂量ORN+高剂量LA治疗组):400 mg/kg ORN+100 mg/kg LA;E组(高剂量ORN造模组):800 mg/kg ORN+1 ml橄榄油;F组(高剂量ORN+低剂量LA治疗组):800 mg/kg ORN+50 mg/kg LA;G组(高剂量ORN+高剂量LA治疗组):800 mg/kg ORN+100 mg/kg LA。连续给药20 d,处死大鼠,称量大鼠体重、睾丸、附睾、精囊重量,计算脏器指数,检测附睾精子计数及活力,睾丸、附睾做HE染色观察组织形态学改变。结果:与A组相比,E组大鼠体重增量、睾丸、附睾脏器指数明显减少[(117.67±11.53)g vs(88.11±12.65)g;(1.06±0.12)%vs(0.65±0.13)%;(0.21±0.03)%vs(0.17±0.01)%,P均0.01];与E组相比,F组大鼠附睾脏器指数明显增加[(0.17±0.01)%vs(0.20±0.02)%,P0.01],G组大鼠体重增量、睾丸、附睾脏器指数明显增加[(88.11±12.65)g vs(102.70±16.10)g,P0.05;(0.65±0.13)%vs(0.95±0.06)%,P0.01;(0.17±0.01)%vs(0.19±0.02)%,P0.05],精囊脏器指数各组之间并无明显差异。与A组相比,B组大鼠精子活力明显降低[(74.12±8.73)%vs(40.25±6.08)%,P0.01],E组大鼠精子计数与活力明显降低[(38.59±6.40)×105/100 mg vs(18.67±4.59)×105/100 mg;(74.12±8.73)%vs(27.58±8.43)%,P均0.01];与B组相比,C、D组大鼠精子活力明显增加[(40.25±6.08)%vs(58.13±7.62)%;(40.25±6.08)%vs(76.04±8.44)%,P均0.01];与E组相比,F、G组大鼠精子计数及活力明显增加[(18.67±4.59)×10~5/100 mg vs(25.63±9.66)×10~5/100 mg,P0.05;(18.67±4.59)×10~5/100 mg vs(29.92±4.15)×10~5/100 mg,P0.01;(27.58±8.43)%vs(36.56±11.08)%,P0.05;(27.58±8.43)%vs(45.05±9.59)%,P0.01]。A、B、C、D组大鼠睾丸、附睾组织形态学无明显改变。E组大鼠睾丸与A组相比,生精小管腔内可见坏死脱落的生精细胞,生精细胞层次不清,排列紊乱;附睾管腔中精子数目明显减少,并伴有较多非细胞成分存在。F、G组大鼠睾丸生精小管内精子数目增加,但仍可见到生精小管内有生精细胞脱落,生精细胞层次不清晰,排列紊乱,但较E组有明显改善;F、G组大鼠附睾管腔中精子数目明显减少,可见散在、脱落的生精细胞,但较E组有明显改善。结论:LA能够改善ORN对大鼠造成的生殖系统损伤,提高精子质量,对生殖系统有较好的保护作用。     

乌骨藤提取物对原代新生大鼠心肌细胞的毒性研究

目的探讨乌骨藤提取物（MTE）对原代新生大鼠新生心肌细胞的毒性影响。方法分离和培养SD大鼠心肌细胞,将MTE组分A溶于二甲基亚砜,分别使用20、40、80、160和320滋g/ml的MTE和8000滋g/ml的5-氟尿嘧啶作为阳性对照处理原代大鼠心肌细胞24h,采用MTS法测定不同浓度MTE对体外培养原代大鼠心肌细胞增殖的影响;采用RTCACardio系统建立体外心脏毒性筛选模型,对大鼠心肌细胞增殖、搏动进行检测。结果原代心肌细胞加入不同浓度的MTE后,细胞存活受到显著抑制,半数存活浓度（EC50）为207.3滋g/ml,随着MTE浓度的升高组分A抑制率增强（均P＜0.05）。原代心肌细胞接种到RTCACardioE-Plate96孔板上,24h后出现心肌细胞搏动。MTE处理后,细胞指数（CI）值显著下降,240滋g/mlMTE组分A处理后心肌细胞搏动迅速受到抑制,搏动频率由126次/min下降至0次/min,且不可恢复;160滋g/ml和80滋g/ml处理后分别在12h和6h后抑制作用减弱,搏动频率为40次/min和84次/min;40滋g/ml基本无影响。结论MTE组分A对原代新生大鼠心肌细胞具有细胞毒作用,能够显著影响其搏动功能。     

血浆联合复方甘草酸苷注射液对LPS/D-GalN诱发的小鼠肝损伤的影响

目的:探讨血浆联合复方甘草酸苷注射液对肝损伤小鼠模型肝损伤的影响。方法:将40只清洁型ICR雄性小鼠随机分为4组(n=10):对照组:仅用生理盐水处理;LPS/D-galN组:仅用LPS/D-GalN处理(LPS50mg/ml,D-GalN 500mg/ml);LPS/DgalN+复方甘草酸苷(CG)组:在LPS/D-GalN诱导后2,4,8h腹腔注射5mg/ml的CG注射液3次;LPS/DgalN+复方苷草酸苷和血浆(CG和Plamsa)组:在LPS/D-GalN诱导后2,4,8h尾静脉注射150μl血浆3次,并腹腔注射CG注射液3次。12h后牺牲小鼠,收集血清和肝组织样本,利用AST和ALT检测试剂盒检测血清中AST和ALT的水平,ELISA法检测肝组织中IL-6、TNF-α和NF-κB的表达变化;肝组织进行HE染色,显微镜下观察肝组织病理学变化。结果:与LPS/D-GalN组对比,LPS/D-GalN+CG组和LPS/D-GalN+CG和Plasma组能够显著降低血清中AST和ALT水平(P0.05);炎症相关因子IL-6和TNF-α,转录因子NF-κB水平也明显降低(P0.05)。结论:血浆联合复方甘草酸苷注射液通过抑制炎症相关因子IL-6和TNF-α,并降低转录因子NF-κB的表达,改善LPS/D-GalN诱发的小鼠肝损伤。     

前列腺小体外泄蛋白与EPS常规指标和NIH-CPSI的相关性分析

目的:研究慢性前列腺炎(CP)患者尿液中的前列腺小体外泄蛋白(PSEP)的含量与前列腺按摩液(EPS)中的白细胞(WBC)、卵磷脂小体(SPL)及NIH-CPSI评分之间的关系。方法:收集2017年11月至2018年8月前来东部战区总医院男科门诊就诊的367例CP患者的中段尿进行PSEP含量检测,显微镜下观察EPS中的WBC和SPL计数,指导患者独立填写NIH-CPSI量表,统计分析CP患者尿液中的PSEP含量与EPS中的WBC、SPL计数及NIH-CPSI评分之间的相关性。结果:CP患者尿液中的PSEP含量随EPS中的WBC数量增加而增加,二者具有显著相关性(r=0.19,P=0.047),与EPS中的SPL计数无明显相关性(r=0.02,P=0.48),与NIH-CPSI总评分显著相关(r=0.31,P=0.02)。结论:PSEP对临床诊断CP和评估CP的炎症程度具有一定意义。