自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的机制探讨

目的 研究自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的可能机制.方法 雌性受体大鼠随机分成空白对照组(A组)、D-hanks液组(B组)、全骨髓细胞组(C组)、间充质干细胞组(D组).观察大鼠的中位生存时间(median survival time,MST)、肝功能、病理变化、Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测观察自体骨髓细胞的分化情况.结果 C组、D组MST均>180 d(P<0.01);血肝功能指标C组、D组降低明显,有显著差异(P<0.01);C组、D组之间比较无显著差异(P>0.05);移植术后60 d C、D组均无明显的急性排斥反应;C组、D组Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测呈阳性.结论 自体骨髓细胞能减少排斥反应、诱导大鼠肝移植术后长期存活,其中间充质干细胞在移植肝内诱导分化为肝细胞发挥肝细胞功能,是其中可能的机制.     

人骨髓来源的多能成体祖细胞分离纯化及体外培养的实验研究

目的：建立体外分选纯化人多能成体祖细胞(muhipotent adult progenitor cills from bone marrow，MAPCs)的方法，用自行配制的细胞培养基对MAPCs进行体外培养，了解其生长、增殖特性。方法：取健康志愿者适量骨髓后采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞，对单个核细胞行贴壁培养后，将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45，Gly-A免疫微磁珠负分选，流式细胞仪鉴定分选后细胞纯度；培养观察细胞生长情况，对传代到不同阶段的细胞进行流式细胞分析，初步了解MAPCs在培养、增殖过程中的免疫学稳定性。结果：①通过免疫磁性分离(magnetic activated cell sorting，MACS)分选，平均每1&;#215;10^9L^-1骨髓贴壁细胞可分选出约(5．1&;#177;2．8)&;#215;10^7L^-1数量级的MAPCs，分选前后细胞活力分别为(96．7&;#177;1.7)％和(96．0&;#177;2．4)％，差异无显著性意义。②用自制的培养基培养分选后的MAPCs，细胞生长良好，最长传代到第16代。③流式细胞仪分析获取的CD45^-，Gly-A^-细胞纯度大于98％；流式细胞仪分析传代第4，8，12代MAPCs，CD45^-，Gly-A^-细胞纯度大于98％。结论：①CD45，Gly-A免疫微磁珠负分选可从骨髓细胞中分选出高纯度的MAPCs。②自行研制的人MAPCs培养基能成功体外培养MAPCs。     

自体骨髓间充质干细胞移植加动员在重症急性胰腺炎大鼠胰腺保护中的作用

目的探讨自体骨髓间充质干细胞移植和干细胞动员对重症急性胰腺炎大鼠胰腺的保护作用。方法腹腔注射L-精氨酸制备大鼠SAP模型,随机分为假手术组、模型组、骨髓干细胞移植组(MSC)、重组人粒细胞集落刺激因子组(G-CSF)及MSC+G-CSF组(n=48),各组再按术后不同观察时间段分为12、24、48、72h亚组(n=12)。MSC组造模后6h经股静脉注入自体骨髓间充质干细胞1.2ml,G-CSF组造模前连续3天皮下注入G-CSF 40μg/kg,MSC+G-CSF组则联合应用,假手术组仅腹腔注射等体积生理盐水。在术后相应时间点观察各组大鼠的死亡率,观察胰腺病理改变并评分,测定Bax蛋白水平和细胞凋亡指数,检测血清中TNF-α、IL-6、AMY、CRP含量,用方差分析比较各治疗组间的指标差异。结果各治疗组48h前未见死亡,72h死亡率与模型组比较无显著差异(P>0.05);胰腺病理变化较模型组减轻;治疗组各时间点Bax蛋白水平和凋亡指数均较模型组增高(P<0.05),MSC+G-CSF组48、72h凋亡指数及24、48,72h Bax蛋白含量与MSC和G-CSF组比较差异显著(P<0.05);各治疗组血清TNF-α、IL-6、AMY、CRP含量24h/48h后较模型组明显降低(P<0.05),MSC+G-CSF组48h/72h各指标与MSC组和G-CSF组比较差异显著(P<0.05);MSC组与G-CSF组各项指标比较均无显著性差异(P>0.05)。结论联合自体骨髓MSC移植与动员能有效保护重症急性胰腺炎早期大鼠胰腺的损伤,可能与MSC的抗炎症及促进胰腺腺泡细胞凋亡等机制有关。     

自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的机制探讨

目的 研究自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的可能机制.方法 雌性受体大鼠随机分成空白对照组(A组)、D-hanks液组(B组)、全骨髓细胞组(C组)、间充质干细胞组(D组).观察大鼠的中位生存时间(median survival time,MST)、肝功能、病理变化、Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测观察自体骨髓细胞的分化情况.结果 C组、D组MST均>180 d(P<0.01);血肝功能指标C组、D组降低明显,有显著差异(P<0.01);C组、D组之间比较无显著差异(P>0.05);移植术后60 d C、D组均无明显的急性排斥反应;C组、D组Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测呈阳性.结论 自体骨髓细胞能减少排斥反应、诱导大鼠肝移植术后长期存活,其中间充质干细胞在移植肝内诱导分化为肝细胞发挥肝细胞功能,是其中可能的机制.     

自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的机制探讨

目的 研究自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的可能机制.方法 雌性受体大鼠随机分成空白对照组(A组)、D-hanks液组(B组)、全骨髓细胞组(C组)、间充质干细胞组(D组).观察大鼠的中位生存时间(median survival time,MST)、肝功能、病理变化、Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测观察自体骨髓细胞的分化情况.结果 C组、D组MST均>180 d(P<0.01);血肝功能指标C组、D组降低明显,有显著差异(P<0.01);C组、D组之间比较无显著差异(P>0.05);移植术后60 d C、D组均无明显的急性排斥反应;C组、D组Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测呈阳性.结论 自体骨髓细胞能减少排斥反应、诱导大鼠肝移植术后长期存活,其中间充质干细胞在移植肝内诱导分化为肝细胞发挥肝细胞功能,是其中可能的机制.     

爱全乐等氧气雾化吸入对减轻术后咳嗽、咳痰及降低肺部感染的临床研究

目的:探究爱全乐等氧气雾化吸入对减轻术后咳嗽、咳痰及降低肺部感染的疗效.方法:将本院104例接受手术后出现咳嗽、咳痰现象的患者随机均分为研究组和对照组,每组各52例.研究组进行爱全乐氧气雾化治疗,对照组进行常规超声雾化.结果:研究组的患者术后咳嗽、咳痰及降低肺部感染恢复情况较对照组更加好和快,差异具有统计学意义(P＜0.05).与此同时,研究组并发症情况少于对照组,差异同样具有统计学意义(P＜0.05).结论:爱全乐等氧气雾化吸入,有助于患者术后进行咳痰以及排痰,同时减轻咳嗽情况以及降低患者肺部感染,值得在临床上推广应用.     

门静脉输注骨髓干细胞诱导肝移植大鼠长期存活的实验研究

目的 探讨骨髓间充质干细胞诱导肝移植大鼠长期存活的机制.方法 : 24只受体Wistar大鼠随机分为A(正常对照)、B(D-hanks液)、C(间充质干细胞)3组,术后观察各组大鼠的生存时间、肝功能(ALT、Tbil)和病理变化及Sry基因和白蛋白的表达状况.结果 C组中位生存时间较A、B组显著延长(P&lt;0.05);移植术后1周各组血清ALT、Tbil均较正常值增高(P&lt;0.05),C组明显低于A、B组(P&lt;0.05);术后10天A、B组均呈急性中重度排斥反应,术后60天C组无明显的急性排斥反应.结论 经门静脉输注的骨髓间充质干细胞在移植肝脏中逐渐分化为具有生物活性的肝细胞,可能是减轻急性排斥反应,导致大鼠长期存活的原因.     

肝细胞缺氧预处理细胞保护作用中热休克蛋白70表达的调控机制

目的　研究热休克蛋白 70 (HSP70 )表达与肝细胞缺氧预处理的关系及其调控机制。方法　建立肝细胞缺氧预处理模型 ,应用蛋白激酶C(PKC)抑制剂、激动剂和丝裂原激活的蛋白激酶 (MEK)的抑制剂 ,通过检测PKC磷酸化水平、p44 /4 2丝裂原激活蛋白激酶 (p44 /4 2MAPKs)、HSP70表达量、细胞存活率 ,同时在透射电镜下观察肝细胞超微结构改变 ,研究缺氧预处理与HSP70表达的关系及HSP70表达的影响因素。对相关数据进行统计学处理。结果　和缺氧复氧组 (HR)比较 ,预处理组 (HP)和PKC激动剂组的HSP70和 p44 /4 2MAPKs的表达量显著增加 ,同时PKC磷酸化水平显著增高 ,三者分别为每分钟 (4 2 .63± 4.73 )、(10 9.42± 16.0 9)、(15 2 .47± 19.5 9)pmol/g(P均 <0 .0 1) ,肝细胞结构改变较小 ;和缺氧预处理组相比 ,PKC抑制剂组相应的观察指标呈相反的变化 ,PKC磷酸化活性显著降低 ,为每分钟 (65 .2 8± 5 .3 6) pmol/g(P <0 .0 1) ;MEK抑制剂组HSP70表达量和磷酸化激活的p44 /4 2MAPKs表达量降低 ,肝组织细胞结构出现较明显的改变。结论　效应保护蛋白HSP70在缺氧预处理中参与对肝细胞的保护 ,HSP70受到PKC介导p44 /4 2MAPKs信号通路的调控。PKC处在p44 /4 2MAPKs上游 ,PKC对 p44 /4 2MAPKs起正性调控作用 ;p44 /4 2MAP     

自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的机制探讨

目的 研究自体骨髓细胞诱导肝移植大鼠长期存活的可能机制.方法 雌性受体大鼠随机分成空白对照组(A组)、D-hanks液组(B组)、全骨髓细胞组(C组)、间充质干细胞组(D组).观察大鼠的中位生存时间(median survival time,MST)、肝功能、病理变化、Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测观察自体骨髓细胞的分化情况.结果 C组、D组MST均>180 d(P<0.01);血肝功能指标C组、D组降低明显,有显著差异(P<0.01);C组、D组之间比较无显著差异(P>0.05);移植术后60 d C、D组均无明显的急性排斥反应;C组、D组Sry基因原位杂交和甲胎蛋白、白蛋白免疫组化双标检测呈阳性.结论 自体骨髓细胞能减少排斥反应、诱导大鼠肝移植术后长期存活,其中间充质干细胞在移植肝内诱导分化为肝细胞发挥肝细胞功能,是其中可能的机制.