注意缺陷障碍动物模型的行为学特征检测

目的：以国外常用的注意缺陷障碍动物模型SHR大鼠为观察对象，观察注意缺陷障碍动物模型的行为学特征。 方法：实验于2003—12／2004-01在南京医科大学动物实验中心完成，清洁级SHR大鼠（注意缺陷障碍组）和WKY大鼠（对照组）各10只，鼠龄4周，均为雄性，体质量70-90g，两组之间差异不显著。利用开场试验观察记录大鼠穿越的格子数、大鼠直立次数、理毛次数，以及粪便数，lat迷宫观察大鼠穿越角落的频数及直立和斜搭在墙上的频率，跳台试验记录每只大鼠受到电击后跳上平台的次数，以此作为学习成绩。24h后重新测试，在铜栅通电的情况下，直接将大鼠置于橡皮台上，记录第1次跳下橡皮台的潜伏期和5min内的错误次数作为记忆的成绩。 结果：10只SHR大鼠和10只WKY大鼠均进入结果分析。①白天及夜晚开场中SHR大鼠穿越格数及直立次数均较对照组WKY大鼠显著增多（白天：72．10&;#177;15．44，37．50&;#177;9．59，29．40&;#177;15．19，10．30&;#177;8．55；夜晚：83．70&;#177;11．78．49．00&;#177;7．94,42．00&;#177;18．12，14．10&;#177;10．45，P〈0．001）。②SHR大鼠在Lat迷宫中30min内，穿越角落频数、直立次数、理毛次数均较对照组WKY大鼠显著增加（128．30&;#177;29．38，151．90&;#177;46．51，14．00&;#177;5．03；46．10&;#177;22．97，36．00&;#177;26．31，7．90&;#177;4．12，P〈0．001或P〈0．05）；将其分为0～10min。10—20min、20～30min3个时间段来分析，发现随着时间的延续，SHR和WKY大鼠穿越角落频数逐渐减少，但各个时间段内SHR大鼠穿越角落频数仍较对照组WKY大鼠显著增加（63．80&;#177;15．5，36．10&;#177;13．34，28．40&;#177;8．34：26．40&;#177;11．01，13．30&;#177;12．18，6．40&;#177;4．97，t=6．13，3．99，7．15，P均〈0．01）。SHR和WKY大鼠直立次数随着时间的延续也逐渐减少，但各个时间段内SHR大鼠直立次数仍较对照组WKY大鼠多（67．30&;#177;20．49，46．60&;#177;21．58．38．00&;#177;14．31；18．80&;#177;12．04，11．60&;#177;12．21，5．60&;#177;4．38，t或t’=6．41，4．46。6．85，P均〈0．01）。③跳台实验结果显示，SHR和WKY的学习能力差异无显著性，记忆测试时SHR大鼠的潜伏期与WKY大鼠也未见显著差别，但SHR大鼠的错误次数显著高于WKY大鼠（1．42&;#177;1．00．0．56&;#177;0．73．t=2．19。P〈0．05）。 结论：利用开场实验、Lat迷宫及跳台实验等多方法结合，可以简单有效的从多动、注意障碍、学习记忆等方面对注意缺陷障碍模型进行行为学检测。     

神经肽Y2受体促进大鼠学习记忆的机制

目的:观察双侧海马插管注射神经肽Y2受体的反义寡核苷酸对大鼠海马c-fos基因mRNA和蛋白表达的影响,探讨Y2受体在学习记忆中可能的作用机制。方法:双侧海马插管注射Y2受体的反义、错义寡核苷酸或生理盐水,应用RT-PCR和免疫组化方法检测大鼠海马中c-fos基因在跳台法训练后的表达水平变化。结果:①反义组大鼠海马c-fos基因mRNA表达水平23.40±8.87明显低于生理盐水组60.38±15.52和错义组53.14±11.71,差异有显著性意义(F=22.54,P<0.001)。但错义组与生理盐水组之间大鼠海马c-fos基因的mRNA表达水平差异无显著性意义,(P>0.05)。②反义组大鼠海马c-Fos蛋白阳性细胞数在海马CA1,CA3和齿状回分别为16.33±6.18,27.00±9.72和109.67±23.44,均低于生理盐水组和错义组,而错义组与生理盐水组之间c-Fos蛋白表达水平差异无显著性意义。结论:神经肽Y2受体可能是通过调节c-fos基因的表达参与大鼠的记忆形成过程。     

环磷酰胺静脉冲击疗法对频繁复发性肾病综合征患儿的临床疗效

目前 ,儿童难治性肾病的治疗仍是临床上较为棘手的问题 ,由于其病因、发病机制、病理类型不同而直接影响其疗效及预后。近年来有关大剂量环磷酰胺静脉冲击疗法 (ＣＴＸ ＰＴ)治疗小儿难治性肾病的报道较多 ,但结果不尽相同。我们的研究显示 ,ＣＴＸ ＰＴ治疗小儿难治性肾病综合征 (简称难治性肾病 )取得了较好效果[1,2 ] 。本文观察了ＣＴＸ ＰＴ对儿童频繁复发性肾病综合征 (ＦＲＮＳ)的预防效果以及远期转归 ,报道如下。1　对象和方法1.1　临床资料　 1991年 9月～ 1999年 12月接受ＣＴＸ ＰＴ治疗且具有完整资料的ＦＲＮＳ患儿 2 2例 ,临…     

跑台运动训练对脑缺血大鼠TGF-β1/Smad3通路蛋白表达及细胞凋亡的影响

目的 观察跑台运动训练对脑缺血大鼠脑缺血周边区组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）及其受体Smad3蛋白表达水平及细胞凋亡的影响,探讨跑台运动训练促进大鼠脑缺血后神经功能恢复的相关机制。 方法 取成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠30只,按随机数字表法分为假手术组（n=6）、模型组（n=12）和运动组（n=12）。模型组和运动组大鼠采用改良的Longa线栓法制备大脑中动脉闭塞(MCAO)脑缺血动物模型,假手术组大鼠手术方法同模型组和运动组,但是不插入线栓。运动组于造模成功后24 h采用跑台训练仪进行跑台运动训练,其余2组则不进行运动训练。采用修正的神经功能缺损评分方法(mNSS)评价模型组和运动组大鼠造模后第3天、7天及14天的神经功能,并于造模后14 d断头取脑。采用Western blot法检测脑缺血周边区组织中TGF-β1及Smad3蛋白的表达情况,采用TUNEL法检测脑缺血周边区组织中细胞凋亡情况。 结果 造模后第7、14天,运动组的mNSS评分分别为(7.06±0.79)分和(6.33±1.15)分,分别于模型组同时间点比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);运动组大鼠的TGF-β1及Smad3蛋白表达均较模型组明显增加,差异具有统计学意义(P<0.01);运动组大鼠脑缺血周边区TUNEL染色阳性细胞较模型组明显减少,差异具有统计学意义(P<0.01)。 结论 跑台运动训练能够促进脑缺血后大鼠神经功能恢复,其机制可能与上调脑缺血周边区组织中TGF-β1/Smad3蛋白表达,进而抑制细胞凋亡有关。     

热休克蛋白27及其mRNA在实验性肾小管间质损伤中的表达

热休克蛋白是细胞在环境变化时产生的一组应激蛋白，在体内参与细胞的生长、发育和分化，更在细胞抵抗有害刺激损伤^[1]、维持细胞抗氧化机制^[2]、抑制细胞凋亡及调节免疫等方面发挥重要作用。本研究应用单侧输尿管梗阻(unilatral ureteral obstru—ction，UUO)肾小管间质损伤人鼠模型，观察热休克     

急性脑梗死患者脑脊液肿瘤坏死因子、白细胞介素6和8的变化

为探讨脑梗死患者脑脊液中肿瘤坏死因子、白细胞介素6、白细胞介素8水平的动态变化，采用酶联免疫吸附法分别测定30例脑梗死患者病期＜1周与病期＞4周以及20例健康老年人的脑脊液中肿瘤坏死因子、白细胞介素6、白细胞介素8水平。结果发现，脑梗死患者脑脊液肿瘤坏死因子、白细胞介素8水平较正常对照组增高、病期＜1周者脑脊液肿瘤坏死因子、白细胞介素8水平较病期＞4周者显著升高；病期＞4周者相比无明显改变（P＞0．05），但均高于正常对照组，而且神经功能缺损程度与脑脊液肿瘤坏死因子、白细胞介素8的含量呈明显正相关关系。结果提示，脑脊液肿瘤坏死因子、白细胞介素6、白细胞介素8水平的动态监测对脑梗死发生、发展及预后判断具有一定预测价值。     

核因子—kB反义寡核苷酸对系膜细胞炎症因子基因表达的影响

目的：探讨NF－kB反义寡核苷酸（oligodeoxynucleotide,ODN)对人肾小球系膜细胞炎症因子表达的影响，为利用NF－kB反义ODN治疗肾小球炎性病变奠定基础。方法：人工合成p65反义、正义及错配ODN并行全程硫代磷酸化修饰。应用核酸酶保护法观察阳离子脂质体介导的不同浓度的ODN（0．001、0．01、0．1、1、10μmol/L)对系膜细胞TNF－α、IL－1α、IL－1β、MCP－1、IL－8、TGF－β1 mRNA表达的影响，以正义ODN（10μmol/L)及错配ODN（10μmol/L)作为对照组。结果：正常培养状态下，系膜细胞可组成型表达TNF－α、IL－1β、IL－8和TGF－β1 mRNA，而不表达IL－1α和MCP－1 mRNA。细菌脂多糖（lipopolysaccharide,LPS)刺激后上述6种炎症因子表达显著上调。p65反义ODN可呈剂量依赖性地抑制LPS诱导的系膜细胞炎性细胞因子TNF－α，IL－α，IL－1β，MCP－1和IL－8的基因表达，而对TGF－β1无显著抑制作用；p65正义及错配ODN均不能抑制炎性细胞因子的表达。结论：p65反义ODN可明显抑制LPS诱导的肾小球系膜细胞炎性细胞因子的表达，提示NF－kB在肾小球疾病进展中起关键性调控作用，其反义ODN有可能应用于肾脏病变的实验性治疗之中。     

氧化低密度脂蛋白诱导Zucker肥胖大鼠肾小球系膜细胞AP-1活性的变化

目的 :研究氧化低密度脂蛋白 (oxidizedlow densitylipoprotein ,Ox LDL)对体外培养的Zucker大鼠肾小球系膜细胞 (glomerularmesangialcell,GMC)中核转录因子激活蛋白 1(activatorprotein 1,AP 1)活化的影响 ,以及观察Ox LDL诱导的AP 1活性的变化与Zucker大鼠鼠龄以及基因型的相关性。　 方法 :①采用Zucker肥胖大鼠 (3月龄和 10月龄 )及Zucker瘦型大鼠 (3月龄和 10月龄 )的 4种GMC株 (O3m,O10m,L3m,L10m)进行传代培养。②利用凝胶迁移率实验 (EMSA)和超迁移率实验检测不同浓度及不同时相Ox LDL对Zucker大鼠GMCAP 1活性的影响 ,以及AP 1二聚体中c jun和c fos成分的变化。　 结果 :①经Ox LDL诱导后 ,4个组GMC内AP 1活性均较对照组明显增强 (F =177 84 ,P <0 0 1) ;②随着Ox LDL刺激浓度增加和时间的延长 ,GMC内AP 1活性相应增强 ,5 0mg/L的Ox LDL刺激 8h时 ,AP 1活性强度达最高峰 ;③Ox LDL主要激活AP 1二聚体成分中的c jun ;④O10m组AP 1的活性显著高于O3m组 (P <0 0 1) ,L10m组AP 1的活性显著高于L3m组 (P <0 0 1) ,O10m组显著高于L10m组 (P <0 0 1) ,O3m组显著高于L3m组 (P <0 0 1)。　 结论 :Ox LDL可诱导Zucker大鼠GMC内AP 1活化 ,其活化方式呈时间和剂量依赖 ;活化强度与大鼠的基因型及鼠龄     

子宫浆膜下平滑肌瘤粘液变性破裂1例

患者女 ,46岁。因下腹痛 3天 ,加重半天 ,于 2 0 0 2年 1月10日入院。既往体健 ,月经规律 ,G2 P2 。查体 :轻度贫血貌 ,神志清。下腹部略隆起 ,腹软 ,扪及一包块 (约 15 cm× 15 cm) ,质硬 ,压痛 ,不活动 ,移动性浊音 (± )。妇科检查 :外阴阴道正常 ,宫颈光滑 ,略肥大 ,宫体平位 ,正常大小。于子宫右前方扪及约15 cm× 15 cm大包块 ,质硬 ,活动欠佳 ,压痛著 ,表面无突起。右附件区组织略增厚 ,轻压痛 ,未及包块。左附件区无异常。B超示盆腔囊实性占位及盆腔积液 (少量 ) ,考虑卵巢肿瘤性。CT示盆腔内囊状占位性病变 ,考虑卵巢囊腺瘤 ,不…