基于OPG-RANK-RANKL系统研究饲粮不同钙水平对生长期WHBE兔骨代谢的影响

目的 利用护骨素-核因子κB受体活化子-核因子κB受体活化子配体（OPG-RANK-RANKL）系统,探讨饲粮不同钙水平对生长期WHBE兔骨代谢影响。方法 选择21只雄性断奶WHBE兔,随机分为3组（I、Ⅱ、Ⅲ组）,分别饲以钙水平为0.95%,1.10%和1.30%,其他营养水平基本一致的饲粮。实验期42 d。实验结束,测定兔血清钙（Ca）、甲状旁腺素（PTH）和骨源性碱性酶（BALP）含量;分别运用荧光定量PCR法和免疫组织化学法对WHBE兔骨组织进行OPG-RANK-RANKL的基因转录和蛋白表达分析。最后以RANKL/OPG比值为指标,评估WHBE兔骨代谢与饲粮钙水平间的相关性。结果 实验结果表明,I、Ⅱ、Ⅲ组在血清Ca、PTH含量和BALP活力上差异无显著性（P>0.05）。WHBE兔骨组织RANKL mRNA表达水平和RANKL/OPG mRNA比值均以Ⅱ组最低,与I、Ⅲ组差异有显著性（P<0.05）。钙水平对WHBE兔骨组织OPG-RANK-RANKL蛋白表达影响显著（P<0.01）,Ⅱ组和Ⅲ组OPG蛋白表达阳性指数均极显著高于I组（P<0.01）;而Ⅱ组兔骨组织RANK蛋白表达阳性指数则极显著低于I组和Ⅲ组（P<0.01）,RANKL/OPG的蛋白表达阳性指数比值以Ⅱ组最低,与I组差异有显著性（P<0.01）。此外,WHBE兔骨组织RANKL/OPG mRNA比值和的蛋白表达阳性指数比值均与饲粮钙水平间存在显著的二次曲线相关（R²=0.4068,0.8433,P<0.05,P<0.001）。结论 生长期WHBE兔的骨代谢与饲粮钙水平间呈显著相关性,当饲粮钙含量为1.10%时,生长期WHBE兔可获得较理想的骨代谢水平。