基于脑血管重建的血管内皮生长因子缓释微球制备及性质研究

目的制作用于脑血管重建研究的血管内皮生长因子(VEGF)缓释微球并研究其性质。方法采用W1/O/W2复乳溶剂挥发法制作VEGF-聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)微球和载罗丹明B微球;使用扫描电镜观察其表面形态结构;采用微量蛋白测定法测定微球中药物的载药量和包封率,并对微球的体外释药性能进行研究;将用罗丹明B标记的微球注入大鼠颞肌组织,分别于第10天和第30天取颞肌组织行冰冻切片,倒置荧光显微镜下观察。结果扫描电镜观察到微球表面光滑无孔隙,粒径为4~10μm;微球载药量及包封率的测定显示其平均载药量为(25.50±1.57)%,平均包封率为(85.07±0.15)%,累积释放率可达80%以上;微球在颞肌组织中可持续存在30 d以上。结论 VEGF-PLGA微球能稳定长时间释放VEGF,可用于脑血管重建研究。     

胰岛素样生长因子-1对氯化钴诱导的PC12细胞凋亡的抑制作用

目的 探讨胰岛素样生长因子-1（IGF-1）对氯化钴（CoCl2）诱导的肾上腺嗜铬细胞瘤 PC12细胞凋亡的作 用及机制。方法 取对数生长期的 PC12细胞,分别以 10、20、40、80 μmol/L的 CoCl2溶液和 100、200、400 μg/L的 IGF- 1溶液处理细胞,CCK-8法检测细胞活力,得出 CoCl2和 IGF-1最佳干预浓度。根据选定的实验条件,应用 CoCl2处理 PC12细胞建立 HIE细胞模型,实验分为对照组、CoCl2处理组、IGF-1+CoCl2处理组。分组处理 24 h后采用 CCK-8法 检测细胞存活率;TUNEL染色检测细胞凋亡情况;Western blot检测各组细胞 Bax、Bcl-2及 Caspase-3的蛋白的表达 水平。最后在上述实验的基础上,设 CoCl2处理组、CoCl2+IGF-1处理组、HIF-1α抑制剂 2-甲氧雌二醇（2-MeOE2）+ CoCl 2组和 CoCl2+2-MeOE2+IGF-1组,Western blot观察 IGF-1、2-MeOE2及两者共用对 PC12细胞 HIF-1α及 Bax的表 达水平的影响。结果 CCK-8检测结果显示,40 μmol/L CoCl2和 200 μg/L IGF-1为最佳干预浓度。利用以上浓度分 组干预细胞 24 h后,与 CoCl2组相比,IGF-1+CoCl2处理组细胞存活率明显提升,TUNEL阳性细胞数和细胞比例降低, 同时抗凋亡蛋白 Bcl-2表达上调,促凋亡蛋白 Bax、Caspase-3,HIF-1α表达下调,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。 应用 2-MeOE2对细胞进行预处理后,CoCl2+2-MeOE2组与 2-MeOE2+IFG-1组 HIF-1α和 Bax蛋白表达差异无统计 学意义,但均较 CoCl2+IGF-1组明显下调（P＜0.01）。结论 IGF-1可抑制 CoCl2诱导的 PC12细胞凋亡,其保护作用 可能与 HIF-1α表达下调有关。     

受体相互作用蛋白3在细胞程序性坏死中的作用

受体相互作用蛋白3(RIP3)是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族的一个重要成员,参与炎症反应、免疫应答和死亡诱导进程。关于细胞坏死,经典研究认为是一种不受调控的细胞死亡方式,而最新的RIP3基因功能研究突破了关于细胞坏死的经典观点,认为RIP3通过参与核因子κB、肿瘤坏死因子等分子信号通路,调控细胞的坏死进程(程序性坏死),是细胞坏死与细胞凋亡相互转换的功能开关。该文主要围绕RIP3基因和蛋白结构、信号转导、相互作用网络以及与肿瘤的关系进行综述。     

受体相互作用蛋白-3分子功能及其在神经疾病中的研究进展

细胞死亡一直以来被简单分为凋亡和坏死两种主要形式,其中坏死被公认为是组织细胞受到损害因素下发生的被动、不可逆、非调控性的死亡过程。然而最新的研究证实,在某些特定条件下坏死仍可受到调控并具有被逆转的可能,这种新型细胞死亡方式被称为程序性坏死。程序性坏死途径参与了生物体的生长发育、衰老和死亡等生理学进程,尤其在多种神经系统疾病(颅脑创伤、感染、神经退行性病变)的发生、发展中扮演了重要角色。受体相互作用蛋白-3(RIP3)作为细胞凋亡和坏死之间相互转换的关键性分子,在介导神经细胞损伤的程序性坏死、NF-κB通路激活以及诱发线粒体活性氧自由基(ROS)的生成等机制中发挥着重要作用。本文就RIP3的分子功能及其与神经疾病的关系进展予以综述。     

星形胶质细胞转分化为神经元的研究进展

近年来, 转分化技术在干细胞和再生学领域迅速发展, 具有较大的研究价值。研究发现, 随着转分化诱导条件的成熟, 可以改变其他细胞的谱系来获得神经元。并且, 星形胶质细胞 （As） 广泛分布于中枢神经系统的灰质和白质中, 其过度增生会形成胶质纤维瘢痕, 是阻碍神经功能恢复的关键。因此, As 转分化为神经元成为目前研究的热点。As 的转分化既可以阻止胶质瘢痕的形成, 又能获得新的神经元。本文就 As 的功能及其转分化为神经元的相关研究进行综述。     

自发性脑出血的遗传因素及其分子机制的研究进展

自发性脑出血（SICH）是指原发性、非外伤性脑实质内出血, 在我国约占全部脑卒中的 20%~30%, 是一种受环境和遗传等多重因素共同影响的疾病。 其高致残率及病死率严重危害着人类的健康。 因此, 找到 SICH 的发病原因及危险因素具有重要意义。 本文主要从遗传学及分子生物学的角度对 SICH 的发生机制的研究进展作一综述。     

人工仿生脊髓导管的制备及性能分析

BACKGROUND: The traditional method of preparing tissue-engineered conduit has the defects of complex shape manufacturing and uncontrollable inner space structure, which cannot meet the requirements of some micro-catheters.     

MRI-三维重建动态测量颅脑创伤模型大鼠的空腔变化

BACKGROUND: Currently, morphological observations of brain cavity after traumatic brain injury (TBI) via cadavers or animal specimen are difficult to obtain dynamic changes.     

清脑通络汤对脑梗死小鼠TGF-β/Smad通路的影响

目的探讨清脑通络汤对脑梗死小鼠脑组织中TGF-β/Smad通路的影响。方法将32只雄性C57BL/6小鼠随机等分为大脑中动脉栓塞(MCAO)组、清脑通络汤组、假手术组和空白组,每组8只。MCAO组和清脑通络汤组均应用线栓法构建右侧大脑中动脉栓塞模型,随后MCAO组给予生理盐水1 mL/100 g灌胃,清脑通络汤组给予清脑通络汤1 mL/100 g灌胃,均3次/d;假手术组仅暴露颈内动脉后缝合皮肤,随后给予生理盐水1 mL/100 g灌胃,3次/d;空白组不进行任何操作。术后72 h,对4组小鼠进行神经功能缺损评分(mNSS),RT-QPCR法检测缺血半暗带脑组织(假手术组和空白组取相应位置脑组织)中TGF-β、Smad2、Smad4和p21表达情况。结果 MCAO组和清脑通络汤组mNSS评分均明显高于假手术组和对照组(P均<0.05),清脑通络汤组mNSS评分明显低于MCAO组(P<0.05)。MCAO组TGF-β、Smad2、Smad4表达水平均显著高于其他3组(P均<0.05),p21表达水平均显著低于其他3组(P均<0.05);清脑通络汤组除Smad2表达水平明显高于假手术组和空白组外(P均<0.05),TGF-β、Smad4和p21表达水平与假手术组和空白组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论清脑通络汤可调控TGF-β/Smad信号通路相关基因的转录与表达,并通过提高靶基因p21的表达而对脑梗死小鼠起到一定的脑保护作用。     

不同剂量右美托咪定对创伤性脑损伤小鼠急性期脑水肿的影响

目的探讨不同剂量右美托咪定对创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)小鼠急性期脑水肿的影响。方法健康成年雄性C57BL/6J小鼠132只,随机分为六组:正常对照组(C组)、假手术组(Sham组)、创伤性脑损伤组(TBI组)、右美托咪定20μg/kg组(D20组)、40μg/kg组(D40组)、60μg/kg组(D60组),每组22只。应用电子控制性脑皮质撞击仪(eCCI)建立TBI小鼠模型,即刻经腹腔注射不同剂量右美托咪定(20、40、60μg/kg),每隔2小时给药1次,共3次。伤后24h分别采用干/湿重法测定脑含水量,HE染色法观察损伤侧皮质细胞形态变化,Western blot法检测损伤侧脑组织中水通道蛋白4(AQP4)和核转录因子κB(NF-κB)的蛋白含量。并于伤后第1、2、3、7天采用改良神经功能缺陷评分(mNSS)评价其神经功能受损程度,伤后第4、5、6、7天应用Morris水迷宫实验观察其行为学改变。结果与Sham组比较,TBI组不同时点mNSS评分明显升高,逃避潜伏期明显延长,脑含水量明显升高,损伤侧皮质损伤严重,AQP4和NF-κB蛋白含量明显升高(P0.01)。与TBI组比较,右美托咪定各剂量组mNSS评分明显降低,逃避潜伏期明显缩短,脑含水量明显降低,损伤侧皮质细胞空泡变性和炎症反应有所改善,AQP4和NF-κB蛋白含量明显降低(P0.05或P0.01);D60组上述指标改变较D20组更为明显(P0.05或P0.01)。结论右美托咪定20~60μg/kg可以减轻TBI后急性脑水肿和认知功能障碍,随着剂量的增高,此作用更为明显,这可能与降低TBI后AQP4和NF-κB表达密切相关。