纵行神经束内电极在周围神经感觉信号采集分析中的应用

目的:观察成年家猫在不同刺激状态下腓浅神经内动作电位的差异,探讨纵行神经束内电极在周围神经感觉信号采集分析中的应用价值。方法:实验于2004-04/07在复旦大学上海医学院病理生理实验室完成。①用直径25μm×25μm的聚四氟乙烯绝缘铂铱合金丝(95%铂+10%铱)制作纵行神经束内微电极,植入成年健康家猫(n=6)左侧踝上腓浅神经内。②将铂铱合金电极与SMUP-E型生物信号处理系统相连,记录的电信号经放大、过滤、采集后(放大倍数×80000,时间常数0.01s,高频滤波10kHz),输入奔腾733计算机进行信号的存储分析。③用毛刷(刷板0.3cm×1.0cm)及自制机械震荡刺激器的钝头金属探针分别对左侧足背皮肤进行搔刮、压力(800～1200g)刺激,3Hz。④以纵行神经束内电极依次记录平静、搔刮和压力刺激时的感觉诱发电位;用MFLab3.01软件包对动作电位的面积、频率、峰值变异系数及功能谱密度等参数进行分析。结果:6只家猫左侧踝上腓浅神经的感觉诱发电位测定结果均纳入分析。①平静、搔刮和压力刺激时的感觉神经动作电位分析:家猫足背皮肤安静状态下间断无规律地发放神经冲动,脉冲0～2个/s;搔刮刺激时,脉冲16～24个/s,发放较规律,波幅波动不大;压力性刺激时,神经冲动呈爆发性释放,叠加成串,脉冲80～104个/s,波形波幅差异较大。②不同刺激状态感觉神经动作电位面积、频率及峰值变异系数分析:搔刮和压力刺激时均高于平静时,压力刺激时高于搔刮刺激时,差异均有显著性(P<0.05～0.01)。③平静、搔刮和压力刺激时感觉神经动作电位的功能谱分析:压力刺激时动作电位的高频成分增加。结论:对皮肤内触、压觉感受器施以触压刺激,随着触压力量的增大,传入纤维上的动作电位频率逐渐增高,发放动作电位的纤维数目也随之增多。通过自制的神经束内微电极,可以敏感地记录到不同刺激形式时感觉信号发放的变化,为采集分析感觉信息用于电子假肢的反馈控制,提供良好界面。     

大鼠肝内型门脉高压症形成中门静脉力学性质的变化

目的观察大鼠肝内型门脉高压症形成中门静脉零应力状态及轴向拉伸时张应力．伸长比关系的动态变化，探讨门静脉生物力学特性的变化在门脉高压症形成中的作用。方法以60％四氯化碳(CCl4)皮下注射法制备肝内型门脉高压症大鼠模型，采用生物力学技术测定CCl4注射第2、4、6、8、10周大鼠门静脉零应力状态张开角和轴向拉伸时张应力，伸长比关系，并同步监测大鼠门静脉压力(PVP)、门静脉流量(PVF)、平均动脉压(MAP)、门静脉阻力(PVR)和内脏血管阻力(SVR)等血液动力学指标的动态变化。结果随着CCl4注射时间的延长，实验组大鼠的血液动力学指标发生了显著的变化。与之相对应．大鼠门静脉张开角及轴向拉伸参数b亦逐渐增大，从注射第10周起与对照组相比具有统计学差异(P＜0．05)。结论门脉高压症大鼠存在高动力循环状态(HCS)。HCS可引起门静脉血管生物力学特性的变化。     

高效液相色谱-荧光检测法快速测定脊髓和脑内氨基酸

目的建立快速测定脊髓和脑内氨基酸浓度的方法。方法通过邻苯二甲醛和β-巯基乙醇柱前衍生、反相高效液相色谱结合荧光(激发波长280nm,发射波长340nm)检测氨基酸浓度。用0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH值6.00~6.25)和甲醇(46%)混合液(加入四氢呋喃2%)作流动相,流速为1ml/min。结果在0.1~40.0μmol/L范围内,氨基酸浓度与相对峰面积之间的相关系数(r)均值为0.9992,日内和日间变异系数(CV)分别为2.41%~5.23%、3.51%~6.48%,平均回收率为90.13%~98.47%。结论本法灵敏度高、快速、简便易行,可用于脊髓和脑内氨基酸测定。     

体位变化对人体心率的即刻变化研究

目的研究从坐位到立位时，人体心率的即刻变化情况。方法受试对象共168人次，先静坐休息10min，然后站立，并检测前后心率变化情况。结果受试对象站立后心率明显加快，￡检验结果表明这一差异具有统计学意义（P〈0．001）。结论由于自主神经对心血管活动的调节，人从坐位到立位时交感神经兴奋起主导作用。     

P2X2和P2X4受体在新生和成年大鼠延髓的表达

目的研究嘌呤能受体（purinergic receptors，P2）家族中P2X不同亚型在新生和成年SD大鼠延髓的表达。方法成年SD大鼠（6-8w）和新生SD大鼠（1-5d），各6只，雌雄不计，取延髓。应用免疫组织化学的方法和图像分析技术，比较P2X2和P2X4受体在新生和成年SD大鼠延髓的表达。结果P2X2和P2X4嘌呤受体的阳性神经元和阳性纤维在新生鼠和成年鼠的延髓都有广泛表达，主要分布在孤束核、Ⅻ颅神经核和延髓腹外侧区，延髓其他区域为散在的分布。成年鼠和新生鼠的P2X2受体均比P2X4受体表达水平高。在新生鼠延髓，P2X2和P2X4的表达水平均比成年鼠低。结论P2X2和P2X4阳性神经元和阳性纤维广泛分布在大鼠延髓，为ATP对心血管活动、呼吸活动和痛觉等的调节作用提供了结合位点，也有利于实验中P2X受体亚型阻断剂的选择。随着动物发育成熟，P2X2和P2X4表达水平均增加。     

Mechanism of the Reversal Effect of Acupuncture on the Fall of Blood Pressure Induced by Angiotensin-(1-7) in the Caudal Ventrolateral Medulla of Rats

目的:研究电针逆转血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]在大鼠延髓尾端腹外侧区(CVLM)引起血压降低的作用机制.方法:采用中枢核团微量注射和微透析,以及高效液相色谱(HPLC)荧光检测等技术观察Ang-(1-7)及其选择性受体拮抗剂(D-Ala7)-Ang-(1-7)(Ang-779)在大鼠CVLM引起血压改变时氨基酸类神经递质释放的变化以及电针对血压和氨基酸类递质释放的影响.结果: 在CVLM微量注射Ang-(1-7)可引起血压降低,同时伴该区内兴奋性氨基酸谷氨酸(Glu)释放增多和抑制性氨基酸牛磺酸(Tau)释放减少;相反,在CVLM微量注射Ang-779则可引起血压升高,同时伴Glu释放减少和Tau释放增多.在相当于人"足三里"穴位电针20 min,可分别抑制在CVLM微量注射Ang-(1-7)或Ang-779所引起的血压降低或升高,同时也能部分抵消注射Ang-(1-7)或Ang-779所引起的Glu、Tau释放的改变.结论:电针逆转Ang-(1-7)或Ang-779在CVLM引起的降压或升压作用可能与Glu、Tau释放量的改变有关.     

电梯乘坐过程对人体心率的影响研究

目的本试验研究当电梯以额定速度1．75m／s和最大加速度0．3m／s2上升时，电梯乘坐过程对人体心率的影响情况。方法共31名受试对象（21男，10女），随机分成2组。试验组21人（12男，9女）乘坐电梯，对照组10人（9男，1女）不乘坐电梯。研究试验前和试验后2组心率差异有无显著性。用SPSS13．0进行统计分析。结果t检验结果表明，试验前和试验后，2组心率的“组内检验”差异有显著性（P〈0．05），但“组间检验”差异无显著性（P〉0．05）。结论当电梯以1．75m／s的额定速度和0．3m／s2的最大加速度上升时，乘客心率的变化不是由于电梯加速度引起的，而是由于从坐位到站住这一体住变化引起的。电梯乘坐过程不会引起乘客心率的显著变化。     

利用腹壁反射重建人工膀胱反射弧的实验研究

目的 研究利用腹壁反射建立“腹壁反射-脊髓中枢-膀胱”神经传导通路，探讨躯体运动神经纤维长入副交感神经纤维后支配膀胱平滑肌产生控制性排尿的作用机制。方法 建立SD大鼠右侧“腹壁反射-脊髓中枢-膀胱”人工膀胱反射弧以左侧为对照侧，通过刺激右侧下腹壁反射激发截瘫动物排尿。神经缝合术后8个月；（1）在破坏L5-S4脊髓节段前后，观察神经电生理，进行膀胱测压；（2）采用辣根过氧化物酶（HRP）逆行追踪标记技术，观察大鼠T11-L1及L4-S4节段脊髓冰冻切片内HRP标记细胞的形态及分布情况。结果 （1）在破坏L5-S4脊髓节段造成截瘫前后，单相方波（3mA,0.3ms)刺激实验侧T13后根可记录到实验侧动作电位，膀胱平滑肌复合股肉动作电位及膀胱平均内压，其形态及波幅与对照侧相似。（2）实验侧T13脊髓前角及双侧L6-S4节段脊髓中间带外侧核区有HRP标记阳性细胞，而对照侧T13脊髓前角未发现HRP标记细胞。结论 体神经的运动传出支经自体神经移植，其轴突能再生长入膀胱平滑肌内副交感神经节细胞，并具有良好的传导运动兴奋的功能；利用截瘫平面以上的体反射，通过硬膜囊内神经根自体神经移植缝合的方法，可建立新的人工膀胱反射弧，使截瘫患者可控制性排尿。     

尾加压素Ⅱ及其受体GPR14在延髓头端腹外侧区对血压和心率的影响

目的本工作试图观察尾加压素Ⅱ(UⅡ)及其受体GPR14是否在重要心血管中枢延髓头端腹外侧区(RVLM)影响心血管活动调节,并了解UⅡ及其受体GPR14在RVLM的改变是否与针刺治疗高血压的作用机制有关。方法应用中枢微量注射的方法观察UⅡ在RVLM对血压和心率的影响,应用半定量逆转录一多聚酶链反应(RT—PCR)和免疫组化的方法检测GPR14 mRNA和受体蛋白在RVLM的表达,利用足底电击结合噪音引起慢性应激性高血压大鼠模型,用尾套法无创性测量尾动脉收缩压和心率,并用免疫组化的方法检测应激性高血压大鼠和在接受针刺治疗后RVLM内GPR14受体蛋白表达的改变。结果于RVLM内微量注射UⅡ可量效依赖地升高血压和加快心率,RT-PCR和免疫组化都显示RVLM内有UⅡ受体GPR14的分布,针刺“足三里”穴位能降低应激性高血压大鼠的血压,但免疫组化的结果显示RVLM内GPR14免疫阳性反应强度无明显变化。结论大鼠RVLM内存在UⅡ受体GPR14,UⅡ在RVLM对血压和心率具有调节作用,但针刺治疗应激性高血压的机制可能与RVLM内UⅡ及其受体GPR14的改变无关。     

高效液相色谱-荧光检测法快速测定脊髓和脑内氨基酸

目的 建立快速测定脊髓和脑内氨基酸浓度的方法.方法 通过邻苯二甲醛和β-巯基乙醇柱前衍生、反相高效液相色谱结合荧光（激发波长280 nm,发射波长340 nm）检测氨基酸浓度.用0.1 mol/L磷酸盐缓冲液（pH值6.00～6.25）和甲醇（46%）混合液（加入四氢呋喃2%）作流动相,流速为1 ml/min.结果 在0.1～40.0 μmol/L范围内,氨基酸浓度与相对峰面积之间的相关系数（r）均值为0.999 2,日内和日间变异系数（CV）分别为2.41%～5.23%、3.51%～6.48%,平均回收率为90.13%～98.47%.结论 本法灵敏度高、快速、简便易行,可用于脊髓和脑内氨基酸测定.