神经痛大鼠脊髓胶质细胞源性神经营养因子参与多巴胺D2受体激动剂对痛觉过敏的调制作用

目的 研究鞘内注射多巴胺D2受体激动剂喹吡罗对坐骨神经慢性压迫损伤大鼠脊髓水平胶质细胞源性神经营养因子表达的影响,探讨其介导抗伤害作用的可能机制. 方法 实验1：采用完全随机分组方法将30只成年雄性SD大鼠制作坐骨神经慢性压迫损伤（chronic constriction injury of sciatic nerve,CCI）模型分为5组（每组6只）：CCI＋生理盐水（NS组）、CCI＋喹吡罗0.1 μg（Q0.1组）、CCI＋喹吡罗1μg（Q1组）、CCI＋喹吡罗5 μg（Q5组）、CCI＋喹吡罗10 μg（Q10组）,分别在建模后第7天鞘内注射0.1、1、5、10 μg喹吡罗,NS组单次鞘内注射生理盐水10μl.于给药前及给药后0.5、1、2、4、8、16h测定大鼠术侧后足机械缩足反射阈值（paw withdrawal mechanical threshold,PWMT）和热缩足反射潜伏期（paw withdrawal thermal latency,PWTL）.实验2：将54只成年雄性SD大鼠制作CCI模型,并采用完全随机分组方法分为3组（Q5组、Q10组、NS组,每组18只）：Q5组、Q10组分别在建模后第7天鞘内注射5、10μg喹吡罗后0.5、1、2、4、8、16h处死取材,NS组单次鞘内注射生理盐水10μl;另取6只正常大鼠作为模型对照组（M组）,另取6只正常大鼠作为对照组（C组）.采用免疫印迹法测定脊髓背角胶质细胞源性神经营养因子（glial cell line-derived neurotrophic fact,GDNF）蛋白表达的变化. 结果 实验1：与NS组比较,Q0.1组注药后各时间点PWMT和PWTL差异无统计学意义（P＞0.05）,Q1组注药后2 h PWMT[（4.3±1.5）g]及PWTL[（13.2±1.6）s],Q5组注药后1,2、4 h PWMT[（4.7±1.6）、（5.3±1.6）、（4.7±2.1）g]和PWTL[（14.0±1.7）、（15.2±1.5）、（13.4±1.6）s],Q10组注药后1、2、4 h PWMT[（6.0±1.3）、（7.3±1.0）、（5.3±2.1）g]和PWTL [（15.3±1.8）、（17.5±1.2）、（14.9±1.7）s]明显升高（P＜0.05）.实验2：与C组比较,M组GDNF表达（0.95±0.09）明显升高（P＜0.05）.与M组和NS组比较,GDNF的表达Q     

鞘内注射miR-212反义锁核酸对骨癌小鼠痛行为的影响

目的研究骨癌痛发展和维持过程中小鼠脊髓水平miR-212表达的变化规律及连续鞘内注射miR-212反义锁核酸LNA．anti—miR-212对骨癌痛小鼠痛行为的影响。方法本实验分为两个部分：（一）骨癌痛小鼠脊髓水平miR-212表达的变化规律：C3H／HeJ雄性小鼠36只,随机分为假手术组（sham组,n=18）和肿瘤组（T组,n=18）。sham组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔注射不含肿瘤细胞的仪一MEM,T组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔注射纤维肉瘤细胞NCTC2472,建立骨癌痛模型。在术前1d,术后4d、7d、10d、14d、21d,sham组和T组各随机取三只小鼠处死,取脊髓腰膨大标本,用Real-timePCR的方法检测脊髓水平miR一212的表达情况。（二）连续鞘内注射LNA—anti-miR-212对骨癌痛小鼠痛行为的影响：C3H／HeJ雄性小鼠24只,随机分为四组：L组（鞘内注射LNA-anti—miR一212,n=6）、L’组（鞘内注射LNA＇-negativecontrol,n=6）、C组（鞘内注射溶媒无核酸酶水,n=6）和S组（假手术处理,n=6）。L组、L’组和C组小鼠在右侧股骨远端注射纤维肉瘤细胞NCTC2472,S组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔注射不含肿瘤细胞的仪一MEM。所有小鼠于术前1d、术后4d、7d、10d、14d测小鼠痛行为指标,包括自发抬足次数和机械缩足阈值（PWMT）,术后14d,L组、L’组、C组小鼠分别鞘内注射LNA—anti—miR-21212pmol／5山、LNA＇-negativecontrol12pmol／5I＊1和无核酸酶水5I＊1,连续鞘内注射7d,1次／d,每天测小鼠痛行为指标,至术后第21天。结果miR-212的表达变化表现为：与基础值相比,sham组和T组小鼠在术后第4天,脊髓水平miR一212明显升高（P〈0．05）;与基础值和sham组相比,T组小鼠脊髓水平miR-212在术后7d、10d、14d、21d均明显升高（P〈0．05）。连续鞘内注射LNA—anti—miR-212改善骨癌痛小鼠痛行为：术后19d至21d,与L’组和c组相比,L组小鼠PWMT[19d（1．07-4-0．16）g,20d（1．13±0．21）g,21d（1．27±0．21）g）]明显升高（P〈0．05）,自发抬足次数明显降低[19d（6．674-1．04）,20d（6．62±1．39）,21d（6．47±1．17）]（P〈0．05）。与14d给药前相比,L组小鼠术后19d至21d的PWMT明显升高（P〈0．05）,自发抬足次数明显降低（P〈0．05）。结论骨癌痛发展过程中,脊髓水平miR-212表达量升高。连续鞘内注射LNA-anti—miR一212可以缓解骨癌小鼠痛行为。     

骨癌痛小鼠脊髓水平CREB转录共激活因子1表达的变化

目的 探讨骨癌痛小鼠脊髓水平CREB转录共激活因子1（CRTC1）表达的变化.方法 采用随机数字表法,46只C3H/HeJ雄性小鼠随机分为假手术组（Sham组,n=23）和肿瘤组（Tumor组,n=23）,Tumor组小鼠在右侧股骨远端骨髓腔接种溶于α-MEM的NCTC2472纤维肉瘤细胞,建立骨癌痛模型,Sham组小鼠接种不含肿瘤细胞的α-MEM.两组在术前1d、术后4d、7d、10 d、14 d、21 d检测痛行为学,并于相应时间点痛行为学检测后,分别随机选取3只小鼠处死,取脊髓L3-L5节段,采用Western Blot法检测CRTC1的蛋白表达水平.结果 与Sham组比较,Tumor组接种后各时间点机械缩足阈值[（1.35±0.14）g,（1.10±0.28）g,（0.78±0.25）g,（0.47±0.16）g,（0.34±0.16）g]明显降低（P＜0.05）,自发抬足次数[（3.12±0.74）次,（6.02±0.67）次,（7.42±1.22）次,（10.82±0.98）次,（12.48±1.06）次]明显增加（P＜0.05）.与基础值相比,Sham组和Tumor组脊髓水平CRTC1的表达在术后4d升高（P＜0.05）;与基础值和Sham组相比,Tumor组脊髓水平CRTC1的表达在术后7d、10d、14d、21 d均升高（P＜0.05）.结论 骨癌痛小鼠脊髓水平CRTC1的蛋白表达上调,该变化可能参与了骨癌痛的发生和维持.     

口腔修复材料人工老化方法

目前修复体已能较好地恢复牙体的形态和生理功能,但由于修复材料的性能还不够完善,老化问题始终是口腔材料学研究的一个重要方面.口内老化试验周期长,不能随机选择实验对象,个体条件差异大。而人工老化试验可以缩短试验周期,老化强度可控,可进行单因素、多因素研究,所以被广泛接受.评估修复材料的可靠性,可以选择具有不同侧重点的人工老化试验方法,现对这些方法做一综述。     

超声引导下髂筋膜联合腰方肌阻滞用于髋关节置换术后镇痛的效果

目的观察超声引导下髂筋膜联合腰方肌阻滞用于髋关节置换术后镇痛的效果。方法选择2017年3—12月拟行择期髋关节置换术患者60例,男26例,女34例,年龄55～75岁,体重45～70 kg,ASAⅠ或Ⅱ级。采用随机数字表法将患者随机分为两组:髂筋膜组(N组)和髂筋膜联合腰方肌组(T组),每组30例。T组术后行超声引导下髂筋膜联合腰方肌阻滞,各注射0.375%罗哌卡因15 ml。N组术后行超声引导下髂筋膜阻滞,注射0.375%罗哌卡因30 ml。术后两组均采用PCIA至术后48 h。记录阻滞操作前(T_0)、术后3 h(T_1)、6 h(T_2)、12 h(T_3)、24 h(T_4)、36 h(T_5)、48 h(T_6)时静息状态VAS评分以及T_4—T_6时运动状态VAS评分;记录阻滞后0～4 h、4～8 h、8～12 h、12～24 h、24～36 h、36～48 h各时段PCIA有效按压次数;记录T_3—T_6时术侧髋关节最大屈曲和外展活动度;记录术后不良反应。结果 T组T_1—T_6时静息状态VAS评分和T_4—T_6时运动状态VAS评分明显低于N组(P0.01)。阻滞后48 h内各时段T组PCIA有效按压次数明显少于N组(P0.01)。T组髋关节最大屈曲和外展活动度明显大于N组(P0.01)。T组术后恶心呕吐和尿储留发生率明显低于N组(P0.05)。结论超声引导下髂筋膜联合腰方肌阻滞用于髋关节置换术后镇痛效果显著,镇痛作用确切,不良反应发生率低。     

三种光固化灯在不同照射距离对复合树脂固化的影响

目的通过检测比较三种具有较高光密度的光固化灯固化树脂试片的表面硬度值,以评价不同的照射距离对树脂固化程度的影响。方法采用3盏光固化灯聚合90个圆柱形光固化复合树脂试片,固化时间均为40s,聚合时固化灯头与试片表面的距离分别为0mm,3mm,6mm,9mm,12mm,15mm。将固化试片浸泡在蒸馏水中,避光37°C保存24h,测量试片表面和底面的努氏硬度(KHN)。对数据进行统计学分析,计算试片底面与表面最大硬度的百分率,检测试片表面在不同的照射距离所获得的光密度值,取对数后与相应的距离进行直线相关分析。结果光密度的对数值与固化距离呈明显负相关。光固化灯与固化距离对试片的硬度有显著影响。Mini LED AutoFocus固化的硬度值比LEDemetronⅠ和Optilux 401更高,LEDemetronⅠ和Optilux 401的硬度比较没有显著意义。随着固化距离的增加样品的努氏硬度显著下降。大多数实验组都能达到有效的硬度百分率。结论光固化灯灯头与树脂表面距离的微小改变会导致光密度发生显著变化。只有采用具有较高光密度的光敏灯才能满足临床较长照射距离的复合树脂充分固化。     

骨癌痛小鼠痛行为及脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白和脑源性神经营养因子表达的改变

目的 通过观察骨癌痛小鼠痛行为学的变化,磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（phosphorylated cAMP response element binding protein,pCREB）和脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）在脊髓背角中表达的变化,探讨pCREB和BDNF在骨癌痛产生和维持中的作用. 方法 52只雄性C3H/HeJ小鼠,采用随机数字表法分为骨癌痛组（T组）和假手术组（S组）,每组26例.T组小鼠右侧股骨骨髓腔内注射含2×10^5个纤维肉瘤细胞的20μl最小必须培养基（α-minimal essence medium,α-MEM）,而S组注入不含肿瘤细胞的20μ1α-MEM,分别于接种肿瘤细胞前1d、接种后第4、7、10、14、21天测定自发抬足次数（spontaneous lifting times,SLTs）和机械缩足阈值（paw withdrawal mechanical threshold,PWMT）.按照分组在相应时间点处死小鼠,用免疫印迹法测定小鼠L3～5脊髓背角pCREB和BDNF的蛋白表达水平. 结果 与术前基础值和S组比较：接种后7、10、14、21d,T组小鼠SLTs[（4.43±0.91）,（7.10±1.03）,（11.27±1.35）,（13.03±0.58）次]显著增加（P＜0.05）;接种后10、14、21 d,T组小鼠PWMT[（0.63±0.20）、（0.32±0.12）、（0.24±0.12）g]明显下降（P＜0.05）,脊髓背角pCREB[（3.78±0.58）、（3.92±0.46）、（4.92±0.37）]和BDNF[（2.13±0.31）、（2.88±0.15）、（2.58±0.41）]的表达显著增加（P＜0.05）. 结论 骨癌痛小鼠脊髓背角pCREB和BDNF表达增加,并且与痛行为学的改变具有相关性,提示其可能参与了骨癌痛的产生和维持.     

大麻素受体2激动剂JWH-015对骨癌痛大鼠脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白的影响

目的探讨腹腔注射大麻素受体（cannabinoid receptor,CB）2激动剂对骨癌痛大鼠脊髓背角磷酸化环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（phosphorylated cyclic AMP respons eclement binding protein,pCREB）表达的影响。方法运用随机数字表法将63只雌性SD大鼠分为3组：肿瘤给药组（J组,15只）、肿瘤对照组（D组,24只）和假手术对照组（S组,24只）。J组、D组的大鼠左侧胫骨上端骨髓腔被注入5μl Walker256大鼠乳腺癌细胞制备骨癌痛模型;S组则注入等量的生理盐水。在造模后第10天,J组腹腔注射JWH-015（100μg/500μ1）,D组、s组注射等量JWH-015溶剂二甲基亚砜（dimethylsulfoxide,DMSO）。每组大鼠于造模前1d,造模后4、7、10d,腹腔注射后2、6、24、48、72h,检测手术侧机械刺激缩足阈值（paw withdrawal mechanical threshold,pwMT）和行走痛行为学评分。D组和S组大鼠于造模后4、7d,J组、D组和S组大鼠于造模后10d及腹腔注射后6、24、72h,取脊髓腰膨大进行免疫印迹分析。结果与S组比较,J组和D组大鼠造模后7d PWMT开始降低（P〈0.05）,造模后10d行走痛行为学评分增加（P〈0.05）,脊髓背角pCREB表达水平于7、10d上调（P〈0.05）.与D组比较,腹腔注射JWH-015后24h,J组PWMT（8.7±1.6）g显著上升（P〈0.05）,行走痛行为学评分（1.0±0.6）分和pCREB的表达（0.56±0.10）明显下降（P〈0.05）。结论腹腔注射JWH-015可能通过下调脊髓背角pCREB的表达改善骨癌痛大鼠的痛行为。