60Co γ射线诱导正常人淋巴母细胞PIG3 基因mRNA表达的剂量相关性研究

目的 探讨正常人淋巴母细胞AHH1电离辐射作用后PIG3基因mRNA表达变化的剂量-效应规律,建立一种基于基因表达变化的新型辐射生物剂量计的可能性。方法 激光共聚焦检测DNA双链断裂分子标记γ-H2AX集簇点,1、2、4、6、8和10 Gy ⁶⁰Co γ射线照射AHH1细胞后4、10和24 h收集细胞,应用实时荧光定量PCR技术对PIG3基因mRNA表达水平进行相对定量检测。结果 γ射线照射后30 min检测发现PIG3蛋白与γ-H2AX在细胞核内有部分共定位,形成集簇点(foci),表明其参与电离辐射致DNA双链断裂损伤信号识别反应。γ射线诱导PIG3基因 mRNA表达水平随时间推移不断提高,持续时间可达24 h。PIG3基因mRNA表达水平具有显著的剂量依赖性,其表达丰度变化的剂量依赖范围在照射后4 h为0~ 6 Gy、照射后10和24 h均为0~10 Gy。结论 PIG3基因参与DNA双链断裂损伤信号识别反应,其mRNA的辐射诱导表达具有良好的剂量-效应关系,具有发展成为新的放射生物剂量计的价值。     

单细胞凝胶电泳检测人血淋巴细胞DNA辐射损伤的剂量效应关系

目的 采用单细胞凝胶电泳观察和分析不同剂量辐射照射后1d和22d血淋巴细胞DNA损伤的特征性变化。方法 C57BL/6j小鼠分为假照射组和辐射损伤模型组。采用⁶⁰COγ射线照射诱导辐射损伤模型。吸收剂量分别为1.0、2.0、4.0、和8.0Gy。应用单细胞凝胶电泳检测和分析照射损伤后1d和22d淋巴细胞DNA损伤变化。结果 ①通过单细胞凝胶电泳可观察辐到射损伤后1d和22d淋巴细胞DNA损伤的特征性改变。其中彗星头DNA,尾DNA,彗星长度,头长度,尾长度,尾/头长比值,彗星尾距,Oliv尾距等指标具有显著性统计学差异。在照射后22d所检测的上述特征性改变较照射后1d更为显著。结论 上述结果提示SCGE将有可能作为辐射损伤后DNA损伤的一种新的辐射生物剂量量计。     

医用诊断X射线工作者GPA基因突变频率与累积受照剂量关系的研究

目的　探讨GPA基因突变频率检测作为累积受照生物剂量计的可行性。方法　用改进的GPA基因位点突变检测技术 ,分析了 5 5名不同时期开始X射线工作者和 5 0名非放射科医务工作者外周血红细胞GPA基因突变变异体频率与开始工作时期、工龄和累积受照剂量间的关系。结果　医用X射线工作者的GPA基因突变频率明显高于对照 ;突变率明显增高是发生在 1970年前开始X射线工作者 ,这与肿瘤流行病学调查所见恶性肿瘤危险明显增高发生在 1970年前开始X射线工作者相一致 ;X射线工作者的GPA基因突变频率随累积剂量而增高 ,剂量 效应关系N突变优于NN突变。结论　用GPA基因突变检测作为生物剂量计 ,还有许多问题需要解决 ,如 :个体差异、特异性及剂量 效应刻度曲线等     

辐射诱导小鼠外周血网织红细胞微核与骨髓嗜多染红细胞微核的 剂量-效应关系

目的 观察X射线照射后小鼠外周血网织红细胞微核(MN-RET)和骨髓嗜多染红细胞微核(MN-PCE)的变化,为探索快速、高通量的辐射生物剂量计奠定基础.方法 54只ICR雄性小鼠随机分为3组,每组18只,分别施予X射线全身照射,吸收剂量分别为0、0.5、1、2、4和5 Gy.在照射后24、48和72 h,分别采用流式细胞术(FCM)和人工镜检的方法,观察外周血MN-RET和骨髓MN-PCE的变化.结果 在0.5～5.0 Gy范围内,3个时间点外周血MN-RET和骨髓MN-PCE均随剂量的增加而升高,剂量-效应曲线可拟合成直线回归方程(t=10.26～25.77,P<0.05);外周血MN-RET和骨髓MN-PCE之间明显相关(r=0.986-0.996,P<0.05).结论 FCM检测MN-RET有望成为快速、高通量的辐射生物剂量计或辅助诊断方法.

Abstract：

objective To study the changes of reticulocyte micronueleus(MN-RET)from peripherai blood and polychromatic erythrocyte mieronucleUS(MN-PCE)from bone marrow in mice following exposure to X-rays in order to provide an experimental basis for exploring possible hish-throughput radiation biodosimeter.Methods Male ICR mice were whole-body irradiated with 0,0.5,1,2,4 and 5 Gy at a dose rate of 0.488 Gy/min.MN-RET from peripheral blood wag scored with FCM and MN-PCE from bone marrow was scored with manual microscopy at 24,48 and 72 h post-irradiation.Results Both MN-RET and MN-PCE rates increaged with doses in the range of 0-5 Gy at 24,48 and 72 h after WBI.The dose-response relationship can be fit with linear equations(t=10.26-25.77,P<0.05).The correlation coeffcients between MN-RET from peripheral blood and MN-PCE from bone mallow were highly significant(r=0.986-0.996,P<0.05).Conclusions In view of its simplicity,accuracy and high throughput capacity,FCM scoring of peripheral blood MN-RET may be a candidate for radiation biodosimetry,More work should be carried out on human specimens to investigate this possibility.