过表达miR-146a通过靶向SOX5抑制胃癌MKN-45细胞增殖和侵袭

目的 探讨过表达miR-146a对胃癌MKN-45细胞增殖、侵袭的影响及可能机制.方法 利用瞬时转染将miR-146a mimics(过表达miR-146a组)和miR-NC(阴性对照组)分别转染胃癌MKN-45细胞,建立过表达miR-146a胃癌MKN-45细胞系,采用MTT法检测转染后MKN-45细胞增殖能力,Transwell实验检测转染后MKN-45细胞侵袭能力.Western blot检测转染后MKN-45细胞中SOX5蛋白表达,通过网站Targetscan预测SOX5是否为miR-146a的靶基因,双荧光素酶实验进行验证.结果 miR-146a过表达抑制MKN-45细胞增殖、侵袭能力,miR-146a过表达使MKN-45细胞中SOX5蛋白表达下降,Targetscan网站分析及双荧光素酶实验证实SOX5为miR-146a的靶基因.结论 过表达miR-146a可以抑制胃癌MKN-45细胞增殖及侵袭能力,其机制可能与下调SOX5的表达有关.     

肺炎支原体CARDS毒素对小鼠IgE反应的影响及机制

目的 通过肺炎支原体产生的特异性CARDS毒素对血清总IgE的作用,研究其对机体过敏反应的影响.方法 60只SPF级BALB/c小鼠分为对照组和感染组,采用CARDS毒素暴露小鼠模型,评价CARDS毒素特异性反应;肥大细胞脱颗粒研究确定CARDS毒素特异性IgE的功能;Western blot检测JAK3及STAT6的表达;给予热灭活毒素以及STAT6抑制剂检测二者对血清IgE的影响.结果 单次暴露于CARDS毒素即可增加小鼠血清总IgE,并持续较长时间;给予CARDS毒素二次暴露的小鼠总IgE仍显著升高,诱导肥大细胞脱颗粒,诱导JAK3和STAT6表达增加,血清IgE的升高需要CARDS毒素的酶活性和STAT6共同作用.结论 肺炎支原体CARDS毒素特异性IgE在小鼠体内的存在导致IgE依赖性介质的释放,导致肥大细胞脱颗粒,与哮喘发病及恶化密切相关.     

关节镜下内减压术治疗膝关节半月板囊肿的应用

目的：分析探讨关节镜下减压术治疗膝关节半月板囊肿的临床效果。方法选取该院2012年12月—2013年12月收治的膝关节半月板囊肿患者72例,采用膝关节镜下内减压术及半月板部分或全部切除或缝合治疗,术后指导患者进行膝关节功能锻炼。对所有患者进行随访,术前术后均进行膝关节Lysholm 功能评分,对比观察疗效。结果术前Lysholm 功能评分为（58.6±9.2）分,明显高于术后评分（93.3±4.6）分,术前术后评分对比t=18.167,P<0.05,差异有统计学意义。结论关节镜下减压术及切除或缝合半月板治疗膝关节半月板囊肿具有非常好的疗效,创伤较小,术后患者的膝关节功能恢复情况良好,可以显著提高患者的生活质量,对膝关节稳定性及生理功能干扰较小,值得临床大力推广。     

JNK抑制剂D-JNKI1减少APPswe转基因小鼠的β淀粉样沉积

目的 探讨腹腔注射JNK抑制剂D-JNKI1对APPswe转基因小鼠β淀粉样沉积的影响.方法 3月龄APPswe转基因小鼠分为D-JNKI1(11mg/kg)组和生理盐水组,每组6只,分别接受腹腔注射D-JNKI1及等体积生理盐水,持续9个月,免疫组化染色法观察大脑皮层和海马中A β的沉积,Western blot法观察大脑皮层和海马APPT668磷酸化水平及APP代谢产物sAPP α和sAPP β水平、APP分泌酶表达水平、MAPK通路蛋白表达及磷酸化水平和Tau蛋白磷酸化水平.结果 在APPswe转基因小鼠大脑皮层和海马中,D-JNKI1使Aβ的沉积减少,p-APPT668水平降低,sAPPβ/sAPPα比值降低,p-JNK、p-c-Jun水平降低,ADAM10、BACE1、PS1表达水平无明显改变,p-Tau水平无明显改变.结论 腹腔注射D-JNKI1减少APPswe转基因小鼠大脑皮层和海马的β淀粉样沉积,与抑制JNK活性,从而降低APP磷酸化,进而导致Aβ产生减少相关.     

小檗碱激活p38MAPK/FOXO3a信号通路抑制三阴性乳腺癌细胞增殖、侵袭和EMT

目的 探讨小檗碱(Berberine)对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、侵袭及上皮-间质转化(EMT)的影响及可能机制.方法 以不同浓度小檗碱处理MDA-MB-231细胞,采用CCK8方法观察细胞增殖能力变化,Transwell实验检测细胞侵袭能力变化.裸鼠移植瘤实验观察小檗碱对肿瘤的增殖影响.Western blot方法检测小檗碱处理后MDA-MB-231细胞p38MAPK、p-p38MAPK、FOXO3a、p-ERK、p-JNK及EMT相关标志物(E-cadherin、Vimentin、N-cadherin、Snail)的表达.结果 小檗碱抑制MDA-MB-231细胞的增殖,降低侵袭迁移能力,并抑制荷瘤小鼠肿瘤生长,上调MDA-MB-231细胞E-cadherin蛋白的表达,下调Snail、vimentin和N-cadherin蛋白表达;小檗碱能够上调p38MAPK磷酸化水平并促进转录因子FOXO3a的表达.结论 小檗碱抑制三阴性乳腺癌细胞增殖与侵袭,与p38MAPK/FOXO3a信号通路有关.     

4-苯基丁酸抑制PERK/eIF2α信号通路缓解大鼠脊髓损伤内质网氧化应激反应

目的 探讨4-苯基丁酸对脊髓损伤大鼠的作用和可能机制.方法 采用Allen's法操作方法建立脊髓损伤模型,将SD大鼠分为假手术组(Sham组)、模型组(SCI组)和4-苯基丁酸钠治疗组(4-PBA组);对三组大鼠进行脊髓运动功能(BBB)的评分;应用HE染色检测各组大鼠脊髓的损伤情况;采用ELISA检测各组大鼠血清中MDA、CAT、SOD、GSH-Px等蛋白的表达情况;应用免疫组织化学检测内质网应激蛋白GRP78、ATF4和CHOP的表达水平;Western blot法检测PERK、eIF2o、ATF4蛋白的表达水平.结果 4-苯基丁酸明显降低中性粒细胞的浸润程度,减少脊髓内GRP78、ATF4和CHOP表达水平,BBB评分在各个时间点明显升高,上调血清SOD、CAT,GSH-Pxe和IF2o的表达水平,下调MDA和ATF4的表达水平(P＜0.05),p-PERK/PERK的表达无明显变化.结论 4-苯基丁酸缓解线粒体氧化应激从而减轻大鼠脊髓损伤与抑制PERK/eIF2 α信号通路相关.     

薯蓣皂苷通过下调Notch 1信号通路抑制甲状腺癌SW579细胞增殖与侵袭

目的 观察薯蓣皂苷对甲状腺癌细胞SW579细胞的抑制作用并探讨其可能的作用机制.方法 体外常规培养甲状腺癌SW579细胞,将细胞分为对照组、不同浓度薯蓣皂苷组(10、20、30、40、50μM),CCK-8方法检测各组甲状腺癌SW579细胞存活率;随后将细胞分为对照组、薯蓣皂苷(30μM)组、Jagged 1组(5mg/L)组及薯蓣皂苷+Jagged 1组.EDU染色观察各组细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Real-time PCR检测凋亡基因Bax、Bcl-2及Caspase-3基因表达;Transwell实验观察各组细胞侵袭能力;Western blot检测Notch 1、Jagged 1及Hes 1蛋白表达.结果 薯蓣皂苷能抑制SW579细胞活性,抑制其增殖;能够促进SW579细胞凋亡,增加Bax/Bcl-2比例,增加Caspase-3基因表达;并抑制细胞侵袭;薯蓣皂苷还可下调Notch 1、Jagged1及Hes1蛋白表达(P＜0.05);并且薯蓣皂苷部分逆转了Jagged 1的作用.结论 薯蓣皂苷对甲状腺癌细胞SW579细胞具有一定的抑制作用,其作用机制可能在一定程度上与抑制Notch 1信号通路有关.     

姜黄素通过上调PPARγ/c-Ski信号通路在大鼠乙型病毒性肝炎模型中发挥保护作用

目的 探讨姜黄素在乙型病毒性肝炎中发挥抗纤维化作用的相关机制.方法 制备SD大鼠乙型病毒性肝炎模型,将SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(HBV组)和姜黄素治疗组(Curcumin组);HE染色法检测各组大鼠肝脏的病理损伤情况;ELISA法检测血清中丙氨酸转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(Aspartateaminotransferase,AST)、透明质酸(Hyaluronic acid,HA)、层粘连蛋白(Laminin,LN)、肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor,TNF-α)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)的水平变化;实时荧光定量PCR法对肝脏中HBV-DNA的表达水平进行检测;Western blot法检测肝脏中的过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome proliferatorsactivated receptor γ,PPAR-γ)、c-Ski(cellular Sloan-Kettering institute)、转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)、Smad2、p-Smad2、Smad3和p-Smad3的表达状况.结果 姜黄素可以显著改善肝组织损伤,降低肝功能损伤的相关指标和炎症因子的水平,抑制肝脏组织中HBV-DNA的表达,促进PPARγ、c-Ski的表达,抑制TGF-β、Smad2、p-Smad2、Smad3、p-Smad3的表达.结论 姜黄素在乙型病毒性肝炎中具有显著的抗纤维化的作用,其机制可能是通过激活PPAR-γ、c-Ski的表达,抑制TGF-β/Smads信号通路的活化来实现的.