谷氨酸对腺苷A2A受体调节一氧化氮合酶活力的影响

目的探讨谷氨酸是否能够影响腺苷A2A受体对一氧化氮合酶（NOS）活力的调节。方法用1000ng／ml脂多糖（LPS）刺激小胶质细胞，分别加入100nmol／L A2A受体激动剂CGS21680以及不同浓度的谷氨酸（0，1，0，25，0，5mmol／L）干预，观察NOS活力变化。结果LPS诱导NOS活力增高，激活A2A受体可以产生抑制作用；0，25及0．5mmoL／L谷氨酸和A2A受体激动剂同时存在时，NOS活力进一步增高。结论高浓度谷氨酸可逆转腺苷A2A受体激动剂抑制升高NOS活力的作用。     

纳米级金颗粒在基因芯片检测技术中的研究进展

纳米直径的金颗粒用于生命科学研究中的示踪技术已有较长的历史，由于其独特的物理、化学性质及生物相容性，近年来更是在芯片检测技术中得到了广泛的应用，特别是用不具备吸附能力离散的纳米金作为信号报告分子则被认为是芯片检测中的一个重要进展。     

ELITE ESP型流式细胞仪堵塞现象的快速排除

流式细胞仪所检测的细胞要求排列成单列且单个细胞直径 <1 0 0 μｍ。因此 ,制备细胞悬液十分重要 ,否则容易堵塞管道 ,给检测带来困难[1,2 ] 。过去一旦有堵塞现象发生就必须立即关闭仪器 ,卸下流动室的Ｆｌｏｗｃｅｌｌ把它浸泡入Ｃｏｕｌｔｅｒｃｌｅｎｚ液中过夜 ,然后用蒸馏水冲洗后安装。开机调节光斑位置 ,调节入射光、反射光位置、安装透镜 ;在Ａｃｐｕｉｓｉｔｉｏｎ状态下选择Ｆｌｏｗｃｈｅｃｋｐｒｏｔｏｃｏｌ方案 ,进行光路的反复调节 ,而光路的调节是ＥＳＰ流式细胞仪工作的一个难点 ,在多数状态下都要求专门的工程师上门服…     

原代成纤维细胞和纤维肉瘤细胞自分泌转化生长因子β1浓度检测及对转化生长因子β1增殖的调节

背景：体外实验常采用外源性转化生长因子β1刺激来观察细胞增殖变化，易忽略细胞本身自分泌转化生长因子β1的影响。 目的：检测原代成纤维细胞和纤维肉瘤细胞(L929)自分泌转化生长因子β1的浓度和细胞增殖的变化。 方法： Elisa试剂盒检测原代成纤维细胞和纤维肉瘤细胞各时相点细胞内和培养上清中生长转化因子β1水平。 结果与结论：纤维肉瘤细胞内转化生长因子β1浓度随培养时间延长而升高，原代成纤维细胞内转化生长因子β1浓度随培养时间延长而降低；两种细胞培养上清转化生长因子β1浓度均随时间而上升，但纤维肉瘤细胞显著高于原代成纤维细胞 (P < 0.01)，峰值时达到原代成纤维细胞的20倍；两种细胞增殖曲线在72 h内均随时间而显著增高(P < 0.01)，同一时间点比较，纤维肉瘤细胞明显高于原代成纤维细胞。提示自分泌转化生长因子β1具有促进细胞增殖的作用，不同的自分泌水平可能是影响原代成纤维细胞这种正常细胞和纤维肉瘤细胞肿瘤细胞对于外源转化生长因子β1反应不同的重要原因。     

急性肺损伤血栓素A2受体,受体mRNA的变化及拮抗剂酚红对它？…

目的 研究急性肺损伤（ＡＬＩ）肺组织特异性膜受体（ＴＸＡ２Ｒ）的变化及受体拮抗剂酚红对它们的影响，从分子水平阐明血栓素Ａ２（ＴＸＡ２）在ＡＬＩ中的作用机制。方法 采用大鼠油酸肺损伤模型，分析后６小时肺组织ＴＸＡ２Ｒ、ＴＸＡ２ＲｍＲＮＡ表达的变化以及酚红（５０ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ）对它们的影响。结果 油酸肺损伤后肺组织ＴＸＡ２Ｒ结合容量明显“降低”，其ｍＲＮＡ的转录显升高。酚红的应用使ＴＸＡ２     

生物信息学的现状和展望

随着人类基因组计划的实施 ,通过基因组测序、蛋白质序列测定结构解析等实验 ,有关核酸、蛋白质的序列和结构数据呈指数增长 ,为了更有效地分析这些数据中所蕴涵的生物学意义 ,产生了综合生物学研究与计算机技术研究等领域最新成果的交叉学科“生物信息学”。本文就生物信息学的产生背景 ,概念 ,研究内容 ,应用以及发展等方面予以综述     

含LacZ报告基因的PcDNA3.0裸质粒转染青光眼滤过术后家兔模型的表达

目的:观察含LacZ报告基因的裸pcDNA 3.0重组质粒在体转染小梁切除术后家兔眼的表达情况,建立动物模型,评价其应用价值,为利用裸质粒对抗青光眼术后瘢痕行基因治疗打下基础.方法:制作家兔双眼小梁切除术后模型,采用自身对照,术后1d在右眼术区局部注射含LacZ报告基因的pcD-NA30裸质粒0.1mL(100μg),左眼术区注射等剂量空质粒,通过X-gal染液原位染色检测注射后1,3,6,15d组织标本中报告基因LacZ的表达情况,绘制感染效率曲线.结果:重组pcDNA 3.0裸质粒100μg可以转染术后滤过区结膜下成纤维细胞并表达携带的基因,表达高峰期3～6 d,15d时仍可检测到少量表达细胞,对照侧各个时相点均未检测到表达.结论:重组pcDNA 3.0裸质粒可以携带外源性基因转染家兔小梁切除术后术区成纤维细胞,适用于对青光眼滤过术后动物模型行基因治疗.     

人PPARδ受体cDNA全长序列的克隆及测序

目的:对人过氧化物酶体增殖物激活受体δ(hPPAR δ)全长cDNA序列进行克隆并测序,为构建含hPPAR δ基因真核表达载体及其受体功能研究奠定基础.方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从HepG2细胞总RNA克隆hPPAR δ全长cDNA序列,胶回收目的条带后与pMD19-T载体连接并转化DH5α感受态菌,用BamH Ⅰ、Sal Ⅰ双酶切及基因测序筛选、鉴定阳性克隆pMD19-hPPARδ-T载体中hPPARa基因的完整性和忠实性.结果:经酶切和测序证实pMD19-hPPARδ-T载体中插入的hPPARδ基因序列与GeneBank中提交的序列(AY919140)一致.结论:成功克隆了hPPARδ基因,构建了pMD19-hPPARδ-T中间载体,为含hPPARδ基因真核表达载体的构建和受体功能研究打下了良好的基础.     

印迹基因H19对人绒毛膜上皮癌细胞JEG-3侵袭能力的影响

目的探讨印迹基因H19对滋养细胞侵袭能力的影响,以期从分子遗传学角度来阐明滋养细胞侵袭行为的调控机制。方法含人全长H19 cDNA重组真核表达质粒pRc/CMV经测序鉴定正确后,转染滋养细胞株JEG-3,观察其H19 mRNA表达和细胞侵袭力的变化。结果质粒转染JEG-3细胞的转染效率〉50%,转染目的基因H19后mRNA表达较对照组显著升高;转染目的基因后JEG-3细胞穿膜细胞数明显少于未转染组和空载体转染组。结论H19基因过表达可抑制JEG-3的侵袭能力,为H19调控滋养细胞侵袭行为提供了直接的实验证据。