脂多糖诱导的急性肾损伤小鼠模型肾脏中JNK信号通路的激活

目的 探讨JNK信号通路激活在脂多糖(LPS)诱导的急性肾损伤(AKI)发病中的作用.方法 48只小鼠随机分为对照组和AKI组,分别检测血清尿素氮、肌酐以及胱抑素C,HE染色观察肾组织病理改变,免疫组化、West-ern blot检测肾组织p-JNK和p-c-Jun蛋白表达部位及强度,ELISA检测血中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素1β(IL-1β)水平.结果 小鼠腹腔注射LPS后,血清尿素氮、肌酐、胱抑素C均较对照组均明显升高,肾组织病理损伤呈进行性加重.正常小鼠各时间点可见p-JNK和p-c-Jun在肾小管、肾小球系膜区有微量表达.AKI组小鼠p-JNK及p-c-Jun在肾小管等部位大量表达.与对照组相比,AKI组p-JNK和p-c-Jun蛋白水平在1h后即开始升高,以造模4h时增高最明显,30 h时逐渐下降.与之相应,血中TNF-α和IL-1β水平亦明显升高,于4h达峰值后逐渐下降.结论 JNK信号通路激活在LPS诱导的AKI发病中起重要作用,JNK信号通路活化后可诱发TNF-α和IL-1 β等炎性因子的表达,继而介导AKI的发生和发展.     

山楂叶总黄酮调控肾组织p38MAPK信号通路干预糖尿病肾病大鼠氧化应激损伤的实验研究

目的探讨山楂叶总黄酮调控糖尿病肾病大鼠肾组织氧化应激损伤的作用和机制。方法 35只SD雄性大鼠随机分为正常对照组和模型组,模型组给予高脂饮食及链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型。成模的大鼠随机分为糖尿病肾病组、厄贝沙坦组、山楂叶总黄酮组,分别于实验第4、8、12周测体质量、24h尿蛋白定量,12周后处死大鼠,留取血标本分别检测尿素氮、肌酐、三酰甘油、一氧化氮、丙二醛和超氧化物歧化酶水平,HE及Masson染色观察肾脏病理改变,免疫组化检测肾组织p38MAPK、p-p38MAPK蛋白的表达。结果山楂叶总黄酮能改善糖尿病肾病模型鼠一般情况、体质量,减少尿蛋白,与糖尿病肾病组相比,山楂叶总黄酮组大鼠肾组织病理损害明显减轻,血清尿素氮、肌酐、三酰甘油等指标明显改善(P0.05),一氧化氮、超氧化物歧化酶水平增加(P 0.05),同时丙二醛水平显著降低(P 0.05),肾组织p38MAPK、pp38MAPK蛋白水平下调(P0.05)。结论山楂叶总黄酮可能通过抑制氧化应激对糖尿病肾病进展起积极作用,并可能通过调控糖尿病肾病肾组织p38MAPK信号转导通路,改善氧化应激对肾组织的损伤。     

二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌早期IFN-λ表达增加

<正>肝癌是严重危害人类健康的常见肿瘤之一,揭示肝癌的发病机制刻不容缓。干扰素-λ(interferon-lambda,IFN-λ)是发现最早、研究最多,首次被克隆并用于肿瘤和病毒性疾病治疗的细胞因子[1]。多种肿瘤都有IFN-λ及其下游因子JAK和STAT的表达或活化,表明IFN-λ的激活与肿瘤的发生发展密切相关。但在肝癌形成过程中,IFN-λ的表达及其作用机制研究甚少。本研究采用二乙基亚硝胺(diethynitrosamine,DEN)诱导的肝癌大鼠模型,观察肝脏IFN-λ的动态变化,及其在肝癌发病过程中的作用和机制,为临床防治肝癌提供新的治疗靶点。     

高磷血症与慢性肾脏病血管钙化研究进展

慢性肾脏病患者普遍存在高磷血症,同时高磷血症是慢性肾脏病患者血管钙化发生和进展的主要因素,并与心血管疾病发病率和病死率的增加密切相关。本文对高磷血症与慢性肾脏病血管钙化研究进展进行综述。     

α-硫辛酸联合甲钴胺治疗尿毒症周围神经病变血液透析患者的疗效分析

目的探讨α-硫辛酸与甲钴胺联合治疗尿毒症周围神经病变(UPN)的临床疗效。方法将100例UPN的维持性血液透析患者按照随机数字表法分为对照组和观察组,对照组50例患者在常规血液净化基础上给予甲钴胺治疗;观察组50例患者在对照组治疗基础上给予α-硫辛酸治疗,8周后评价两组患者临床疗效,比较治疗前后两组患者血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平及神经传导情况。结果观察组治疗8周后肢体疼痛、麻木、感觉减退及不宁腿综合征等情况改善的有效率较对照组明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。观察组治疗后血清MDA水平明显低于对照组,血清SOD水平明显高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗8周后与治疗前比较,下肢感觉神经传导速度均明显提高,差异有统计学意义(P0.05);治疗后观察组较对照组下肢感觉神经传导速度升高更明显,差异有统计学意义(P0.05)。结论α-硫辛酸联合甲钴胺对UPN血液透析患者的症状改善及神经传导速度提高均有明显疗效,且无明显不良反应。     

2型糖尿病肾病大鼠肾动脉上BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信号通路的激活

目的探讨2型糖尿病肾病(DN)大鼠模型肾动脉钙化及BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信号通路的激活情况。方法 40只大鼠随机分为对照组和2型糖尿病肾病组(DN组,STZ加高脂高糖饮食诱导的2型DN大鼠模型),采用钙离子试剂盒检测8、12、16周时肾动脉钙含量,Von Kossa染色观察肾动脉上钙盐沉积。免疫组化检测肾动脉的BMP2、Smad1、Runx2及Osterix蛋白表达,RT-PCR法检测肾动脉BMP2及Runx2 mRNA水平。结果DN组大鼠各时间点血糖、尿素氮、胱抑素C及24 h尿白蛋白水平均较对照组明显增高(P0.05),自实验12周后,DN组大鼠的血肌酐值较对照组显著增高(P0.05)。DN组大鼠肾动脉组织钙含量较同时间点对照组明显增加(P0.05),Von Kossa染色见对照组大鼠各时间点均无明显钙盐沉积,而DN组大鼠肾动脉自第8周时即有黑色颗粒沉积,随着时间的延长沉积的黑色钙盐逐渐增多并聚集成团。与对照组相比,DN组大鼠肾动脉组织中BMP2及其下游因子的表达明显升高,同时BMP2、Runx2 mRNA水平亦增加。相关性分析表明,肾动脉钙含量与BMP2、Runx2 mRNA均呈显著正相关(r=0.641,r=0.683,均P0.01)。结论 2型糖尿病肾病模型大鼠肾动脉早期即可出现血管钙化,且BMP2/Smad1/Runx2/Osterix信号通路激活在其中起重要调节作用。     

肾动脉钙化增加2型糖尿病肾病大鼠进行性肾功能损伤

目的探讨肾动脉钙化对2型糖尿病肾病大鼠肾功能的影响。方法将大鼠随机分为对照组(CON组)、糖尿病肾病组(DN组)及DN合并肾动脉血管钙化组(DN+VC组)。DN组和DN+VC组大鼠在高脂高糖饮食基础上腹腔注射链脲菌素(STZ)制备2型糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠模型,造模成功后DN+VC组肌注维生素D3及尼古丁灌胃,分别于实验第8、12和16周末处死大鼠,用Von Kossa染色观察大鼠肾动脉钙盐沉积,Ca2+试剂盒检测肾动脉钙含量,免疫荧光双染观察肾动脉α-SMA/BMP2表达,荧光定量PCR检测肾动脉BMP2 mRNA水平等判断肾动脉钙化程度。检测大鼠血清尿素氮、肌酐、胱抑素C及24 h尿蛋白水平,HE染色观察肾组织病理改变。结果 DN组及DN+VC组肾动脉的钙盐沉积及钙含量、BMP2蛋白及基因表达均较同时间点CON组明显增加,DN+VC组较DN组增加更明显(P0.05)。DN组和DN+VC组大鼠血清尿素氮、肌酐、胱抑素C及24 h尿蛋白随时间进展逐渐升高,且明显高于同时间点CON组(P0.05)。与DN组相比,DN+VC组大鼠仅胱抑素C水平明显升高(P0.05),24 h尿蛋白量在第16周时明显增加(P0.05)。DN组大鼠肾组织病理损伤呈进行性加重,DN+VC组大鼠的病理改变较DN组明显加重。肾动脉钙含量与血清尿素氮、肌酐、胱抑素C、24 h尿蛋白以及BMP2 mRNA呈正相关(P0.01)。结论肾动脉钙化的发生及严重程度可能参与和促进糖尿病肾病的进展。     

血管钙化大鼠肾动脉BMP2/Smad1/Runx2信号通路的表达

目的 观察血管钙化大鼠模型肾动脉上骨形态蛋白2（BMP2）/Smad1/Runt相关转录因子2（Runx2）信号通路的表达及其变化规律,探讨BMP2/Smad1/Runx2信号通路激活在肾动脉钙化中的作用。方法 将24只雄性SD大鼠随机分为对照组和钙化组,钙化组建立维生素D3和尼古丁诱导的大鼠血管钙化模型,对照组给予生理盐水和花生油。6周后采用Von Kossa染色检测肾动脉钙化程度,钙离子试剂盒测定大鼠肾动脉钙含量,实时荧光定量PCR检测肾动脉组织中BMP2、Smad1、Runx2 mRNA水平,免疫组化法观察BMP2、Smad1、Runx2及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果 Von Kossa染色见钙化组大鼠肾动脉有大量黑色颗粒沉淀。钙化组血管钙含量高于对照组（ P<0.05)。与对照组相比,钙化组大鼠肾动脉组织BMP2、Smad1、Runx2 mRNA的水平升高（P<0.05),BMP2/Smad1/Runx2信号通路蛋白在肾动脉的表达亦同步上调,而α-SMA的表达较对照组下降（P<0.05)。相关分析表明,大鼠肾血管钙含量与肾动脉组织BMP2 mRNA（r =0.655, P<0.05)、Smad1 mRNA (r =0.735, P<0.05)、Runx2 mRNA ( r=0.734, P<0.05)均呈正相关。结论 BMP2/Smad1/Runx2通路的表达变化与肾动脉钙化的严重程度相关,提示BMP2/Smad1/Runx2信号通路参与了肾动脉钙化的发生发展。