ApoE缺陷大鼠动脉粥样硬化模型的构建

目的构建大鼠的动脉粥样硬化模型。方法将载脂蛋白E(ApoE)缺陷(ApoE-/-)大鼠共16只,均分为两组作为实验组和对照组,均予高脂饲料喂养12周。实验组在前4周予Alzet渗透泵植入大鼠皮下,内部填充血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),以1μg/(kg·min)的速率匀速释放。对照组仅予等量生理盐水处理。第12周麻醉后测体重、取血并处死,检测炎症因子及血脂,取心脏及主动脉组织,切片作HE、油红O、Masson染色。结果实验组大鼠出现动脉粥样硬化斑块,对照组无类似表现,两组之间在其他方面无统计学差异。结论 ApoE-/-大鼠予高脂饮食饲养并予AngⅡ刺激,可成功造成大鼠动脉粥样硬化模型。     

丙泊酚与氯胺酮在小型猪血管介入手术麻醉中的应用

目的 探讨小型猪在血管介入手术中的理想麻醉方法.方法 将经皮肾交感神经射频消融术的贵州小型猪16只随机分为丙泊酚麻醉组和氯胺酮麻醉组,每组8只,在麻醉过程中记录诱导时间、麻醉维持时间和苏醒时间,并对动物的心率、血压、呼吸、体温进行监测.结果 丙泊酚麻醉组诱导时间（2.83±0.59） min,麻醉维持时间（89.13±6.20）min,苏醒时间（29.88±4.82）min;氯胺酮麻醉组诱导时间（4.84±0.72） min,麻醉维持时间（76.50±6.12）min,苏醒时间（43.38±4.21）min.丙泊酚麻醉组对小型猪各项生理指标的影响小于氯胺酮麻醉组（均P＜0.05）.结论 丙泊酚和氯胺酮均可在小型猪血管介入手术中达到满意的麻醉效果,而丙泊酚略优于氯胺酮.     

钙蛋白酶抑制蛋白转基因小鼠的构建和鉴定

目的 将人的钙蛋白酶抑制蛋白（calpastatin,CAST）外源基因整合到C57BL/6J小鼠中,构建高表达CAST的转基因小鼠模型。方法 利用Gateway技术构建pRP.EX3d-EF1A-CAST-IRES-eGFP载体,回收片段后通过显微注射法将目的基因片段注入到C57BL/6J小鼠受精卵中,将其胚胎移植至同期发情的假孕受体母鼠输卵管内获得子代小鼠。采用PCR方法鉴定出阳性的转基因小鼠,确定首建鼠,通过与C57BL/6J小鼠回交后互交数代建系。利用RT-PCR和Western blotting方法检测CAST基因和蛋白在各组织中的表达情况。结果 将90枚注射受精卵移植到3只假孕鼠中,3只均怀孕,移植成功率100%,产下23只子鼠,经PCR鉴定得到2只转基因阳性首建鼠,阳性率为9%。子代小鼠进行RT-PCR检查显示,CAST基因在转基因小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑和骨骼肌中均有表达;Western blotting检查显示,CAST蛋白表达在转基因小鼠中显著高于同窝阴性小鼠。结论 通过显微注射法成功构建CAST高表达的转基因小鼠,为进一步研究CAST奠定了良好的模型基础。     

高质量分数葡萄糖对内皮细胞迁移、增殖功能的影响

目的：探讨高糖状态对体外培养血管内皮细胞迁移、增殖能力的影响,以及其潜在可能的分子机理。方法：通过不同质量分数的葡萄糖干预血管内皮细胞后,用CCK－8评估内皮细胞增殖情况;用transwell实验检测内皮细胞的迁移能力;用Real －time PCR检测腺苷酸环化酶（adenylate cyclase,AC）mRNA的表达;用Western blotting 检测PKA、p－PKA蛋白的表达情况。结果：高质量分数葡萄糖干预血管内皮细胞后,血管内皮细胞迁移、增殖能力明显下降,同时AC mRNA表达明显下降,PKA蛋白表达无明显变化,而p－PKA蛋白表达明显下降。结论：高质量分数葡萄糖使血管内皮细胞迁移、增殖能力下降,cAMP－PKA信号通路的活化可能参与了血管内皮细胞增殖、迁移及修复功能。