银杏叶提取物对大鼠肺成纤维细胞表达CTGF和α-SMA的影响

目的观察银杏叶提取物(GBE)对大鼠肺成纤维细胞表达CTGF和α-SMA的影响。方法大鼠气管内一次性滴注博来霉素制备肺纤维化模型,原代培养大鼠肺成纤维细胞,分为4组:对照组、GBE 25,50,100 mg/L组,共培养24 h,采用免疫细胞化学法和流式细胞技术检测GBE对各组细胞表达CTGF和α-SMA的影响。结果与对照组比较,50,100 mg/L组细胞表达CTGF和α-SMA依次降低,各组间比较有统计学意义(P<0.05)。结论银杏叶提取物能部分抑制大鼠肺成纤维细胞的表型转化。     

LIPA基因突变致迟发型胆固醇酯贮积病1例

7岁1月龄患儿因“发现肝功能异常4年”就诊。体格检查发现肝脾肿大,组织病理学表现为肝脂肪变性和肝纤维化。基因检测提示LIPA基因存在复合杂合突变：c.860G>A（p.G287E）和c.796G>T（p.G266*）,分别来源于父亲和母亲,进一步完善溶酶体酸性脂肪酶活性测定提示明显降低,诊断为LIPA基因突变导致的迟发...     

脱氢表雄酮通过抑制血管细胞粘附分子1的表达发挥抗动脉粥样硬化作用

目的研究脱氢表雄酮能否通过抑制血管细胞粘附分子1的表达发挥抗动脉粥样硬化作用以及维甲酸受体激动剂对这一作用有无影响。方法高脂饮食构建兔动脉粥样硬化模型并加脱氢表雄酮干预,10周后检测各组兔血清脂质水平及主动脉斑块情况。采用免疫组织化学及逆转录聚合酶链反应方法观察脱氢表雄酮对高脂喂饲兔主动脉壁血管细胞粘附分子1表达的影响。体外培养THP-1单核细胞,采用免疫细胞化学及逆转录聚合酶链反应方法观察不同浓度脱氢表雄酮对氧化型低密度脂蛋白诱导的THP-1细胞表达血管细胞粘附分子1的影响。结果脱氢表雄酮干预的高脂喂饲兔主动脉内膜厚度及粥样斑块面积相对动脉粥样硬化模型组兔分别降低59%和48%;同时兔主动脉血管细胞粘附分子1蛋白的表达在脱氢表雄酮干预后(0.1920±0.0034)较高脂喂饲兔(0.3846±0.0198)显著减弱,血管细胞粘附分子1 mRNA的表达(0.6856±0.0286)与高脂喂饲兔(1.0893±0.1089)相比也明显减少。体外培养的THP-1细胞中,加入不同浓度的脱氢表雄酮均可降低氧化型低密度脂蛋白诱导细胞的血管细胞粘附分子1表达,在脱氢表雄酮浓度为5μmol/L时THP-1细胞中血管细胞粘附分子1 mRNA的表达(0.2988±0.0312)较氧化型低密度脂蛋白诱导组(0.6236±0.0237)下降明显。加入全反式维甲酸对脱氢表雄酮的作用没有显著影响(P>0.05)。结论脱氢表雄酮能够抑制高脂喂饲兔主动脉壁及氧化型低密度脂蛋白诱导的THP-1细胞内血管细胞粘附分子1的表达,这可能是其发挥抗动脉粥样硬化作用的机制之一,而补充维甲酸受体激动剂对这一过程中血管细胞粘附分子1的表达没有明显影响。     

宫颈癌癌前病变及早期癌组织中微淋巴系统的定量观察

目的:探讨宫颈癌前病变和宫颈癌组织中微淋巴管与宫颈癌发生、发展及转移侵袭的关系。方法:部分宫颈组织流式细胞仪检测LYVE-1阳性细胞和Prox-1阳性细胞。46例宫颈组织采用LYVE-1和Prox-1相关抗原免疫组化染色,统计微淋巴管密度及其面积百分比,结合临床资料进行分析。结果:(1)流式细胞检测宫颈组织中存在LY-VE-1(+)和Prox-1(+)细胞;(2)癌前病变LMVD(16.13±10.96)条/4HP,LVA(2.00±1.51)%与Ⅰ期宫颈癌LMVD(24.4±11.39)条/4HP,LVA(2.10±1.61)%相比无统计学差异(P>0.05),与Ⅱ期宫颈癌(28.58±12.29)条/4HP(P<0.01),LVA(3.12±1.77)%相比有显著差异(P<0.01);(3)有淋巴转移者LMVD为(29±11.42)条/4HP,LVA为(3.30±1.76)%相对无转移者(20.23±11.06)条/4HP(2.07±1.14)%均有显著差异(P<0.01);(4)细胞HG1级者LMVD(17.19±9.08)条/4HP,LVA(2.20±1.53)%相对HG3(37.43±8.54)条/4HPLVA(2.85±2.23)%有显著差异(P<0.05);(5)LMVD与LVA与病理类型和月经状态无明显相关。结论:宫颈癌前病变和早期癌组织中高淋巴管分布与淋巴转移,肿瘤病理分期,肿瘤细胞分化程度有关。     

西罗莫司对肝癌HepG2细胞的增殖及mTOR、HIF-1α的抑制作用

目的:观察西罗莫司对体外培养的肝癌HepG2细胞增殖及mTOR、HIF-1α基因的抑制作用,探讨以mTOR为靶点治疗肝癌可能的细胞内信号转导机制.方法:缺氧培养HepG2细胞,外源性给予不同浓度的西罗莫司(0.1-1000 nmol/L)刺激细胞24h, MTT法检测不同浓度药物对肝癌细胞增殖的影响.Western blot法检测药物刺激后HepG2细胞内mTOR和HIF-1α蛋白的表达.结果:西罗莫司可显著抑制肝癌细胞HepG2的增殖,其抑制率随药物浓度的增加而上升(均P<0.05).在西罗莫司的干预下,HepG2细胞中mTOR和HIF-1α蛋白的表达水平显著下降,实验组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:在缺氧条件下,西罗莫司可通过mTOR信号转导途径下调肝癌HepG2细胞内HIF-1α蛋白表达,诱导细胞凋亡,这可能是西罗莫司发挥抗肿瘤效应的机制之一.     

苦参素对人肺癌A549细胞增殖及caspase3/7蛋白活性的影响

目的 研究不同浓度的苦参素对人肺癌A549细胞增殖及凋亡执行分子caspase3/7蛋白活性的影响.方法 体外复苏与培养人肺癌A549细胞,用不同浓度(0、0.5、1、2 g/L)的苦参素处理A549细胞24、48、72 h,用噻唑蓝(MTT)比色法检测苦参素对A549细胞增殖的抑制作用,比色法检测培养液中caspase3/7活性.结果 苦参素对A549细胞的增殖抑制率呈时间、剂量依赖性;随苦参素浓度的增高及时间的延长,caspase3/7蛋白活性增强(P＜0.05).结论 苦参素对人肺癌A549细胞的增殖有明显抑制作用,可能与激活caspase3/7活性,促进细胞凋亡有关.     

脱氢表雄酮对氧化型低密度脂蛋白诱导的平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白1表达的影响及其机制

目的观察脱氢表雄酮对氧化型低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞分泌单核细胞趋化蛋白1的影响,并探讨其作用机制是否与细胞色素P450芳香酶的催化作用有关。方法使用脂质体转染法将含有细胞色素P450芳香酶基因的质粒和空白对照质粒分别转染至体外培养的血管平滑肌细胞,24h后给予氧化型低密度脂蛋白诱导及脱氢表雄酮刺激,采用逆转录聚合酶链反应、实时荧光定量聚合酶链反应及酶联免疫吸附法检测转染后各组细胞单核细胞趋化蛋白1的基因和蛋白表达水平。结果与氧化型低密度脂蛋白刺激组比较,给予氧化型低密度脂蛋白和脱氢表雄酮后单核细胞趋化蛋白1的分泌明显降低(P<0.05)。转染含有细胞色素P450芳香酶基因的质粒组和空白对照质粒组单核细胞趋化蛋白1的分泌差别不明显(P>0.05)。结论脱氢表雄酮能抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白1的分泌升高,可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。而这一过程可能并不通过转化为雌雄激素而发挥,也许与其本身的生物学活性有关。     

宫颈癌前病变和早期浸润性宫颈鳞癌组织中胎盘生长因子的表达及其意义

目的:探讨胎盘生长因子(placental growth factor, PLGF)在宫颈癌前病变和早期浸润性宫颈鳞癌组织中的表达,及其与肿瘤微血管密度(microvessel density, MVD)和微淋巴管密度(lymphatic vessel density, LVD)之间的关系和临床意义.方法:采用免疫组织化学法和RT-PCR法分别检测22例宫颈癌前病变和36例早期浸润性宫颈鳞癌组织中PLGF蛋白和mRNA水平的表达,CD34和D2-40相关免疫组织化学染色法检测MVD和LVD的水平,分析PLGF的表达与MVD和LVD之间的关系及其意义.结果:宫颈癌前病变组织中PLGF蛋白表达阳性率为22.73%(5/22),早期浸润性宫颈鳞癌组织中PLGF蛋白表达阳性率为58.33%(21/36);PLGF蛋白表达水平与临床分期显著相关(P＜0.01);PLGF mRNA水平的表达与蛋白一致,且与MVD和LVD水平均呈正相关(P＜0.01,P＜0.05),尤与MVD的相关性更为密切.结论:PLGF在宫颈癌早期病变组织中的表达水平与临床分期密切相关,且与肿瘤血管新生密切相关,可能成为宫颈癌新辅助化疗的新靶点.