云芝多糖对巨噬细胞氧化LDL的抑制作用与iNOS基因表达

为揭示云芝多糖的抗动脉粥样硬化机理，用ＲＴ－ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ等方法了ＰＳＫ对巨噬细胞氧化低密度脂蛋白的影响。结果ＰＳＫ处理小鼠的巨噬细胞对ＬＤＬ的氧化作用明显降低，ＮＯ分泌明显增加；结论ＰＳＫ能抑巨噬细胞对ＬＤＬ的氧化，其作用机制可能与其能诱导ｉＮＯＳ基因表达有关。     

抑制性消减杂交分析肌动蛋白细胞骨架和细胞外基质基因在膀胱癌中的表达下调

目的：分析膀胱移行细胞癌的差异表达基因，探讨肿瘤行为的分子生物学基础及筛选有效的肿瘤标记。方法：应用抑制性消减杂交（SSH）方法构建在正常膀胱组织和膀胱癌组织中差异表达序列的消减文库，用差异筛选技术分离差异表达基因。结果：从消减文库中共获得了9个在正常膀胱组织中高表达、在膀胱癌组织中表达下调的基因，分别属于细胞外基质成分和肌动蛋白细胞骨架体系。结论：细胞外基质和肌动蛋白细胞骨架体系中相关基因的表达下调可能反映了肿瘤细胞在细胞粘附、细胞间相互作用、迁移及运动等诸多过程中的异常，可能与癌细胞的侵袭和转移密切相关，对发展成为膀胱癌的分子标记物具有潜在价值；gelsolin、tuopomyosin等抑癌基因在膀胱癌形成过程中可能起了重要作用。     

一氧化氮在低密度脂蛋白氧化中的双向作用

为观察一氧化氮与低密度脂蛋白氧化的关系,揭示一氧化氮在动脉粥样硬化发病和防治中的作用,给小鼠腹腔注射云芝多糖,再用干扰素γ、脂多糖和Ｌ－精氨酸刺激小鼠腹腔巨噬细胞,然后检测一氧化氮释放量与脂氢过氧化物浓度。结果发现,一氧化氮与低密度脂蛋白氧化间有一个量的相关关系（ｒ＝０．７５３,Ｐ〈０．０５）,一定范围内（≤５０μｍｏｌ／Ｌ）的一氧化氮释放量与脂氢过氧化的量呈负相关,即抑制细胞对低密度脂蛋白的氧化;当一氧化氮产生过多时（≥９０μｍｏｌ／Ｌ）,脂氢过氧化物的量随之增加,则促进低密度脂蛋白的氧化。结果提示,一氧化氮在低密度脂蛋白氧化中发挥双重作用,它对低密度脂蛋白的氧化起抑制或促进作用取决于它的释放量。     

日本血吸虫新基因——蛋白酶体激活因子PA28亚单位的发现与克隆

目的将用EST策略及同源性搜索发现的日本血吸虫新基因——蛋白酶体激活因子PA28亚单位（proteasome activatorPA28 subunit,PA28）cDNA克隆到表达质粒pET32a（+）上,为下一步对该基因进行功能研究做准备。方法将插入于pTrip1Ex2质粒上的cDNA进行测序,测序结果经BLASTx程序搜索,发现该插入cDNA序列所编码的蛋白与小鼠肌肉内的PA28亚基蛋白高度同源。根据表达质粒pET32a（+）上的克隆位点及该cDNA序列设计PCR引物,将PCR产物纯化后连接到pMD 18-T载体上,将重组T载体经EcoRI/XhoI双酶切后切下的SjPA28基因导入原核可溶性表达质粒pET32a（+）中。结果所发现的cDNA所编码的蛋白与小鼠肌肉内的PA28亚基蛋白的同一性达41％,PCR产物的片段长度与预期大小一致,重组T载体及表达质粒经EcoRI/XhoI双酶切后证明具有与目标片段长度相符的插入片段。结论本研究所发现的cDNA所编码的蛋白与小鼠肌肉内的PA28亚基蛋白高度同源,并且已成功地构建出重组表达质粒pET32a（+）-SjPA28。     

654—2和肠道吸附剂对油酸肺损伤时兔心功能的影响

目的和方法：观察应用６５４－２和肠道吸附剂治疗油酸造成兔呼吸窘迫综合征（ＲＤＳ）时左心室功能的变化。结果：（１）油酸组６０和９０ｍｉｎ时左心室功能明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）；（２）６５４－２组和肠道吸附剂组左心室功能显著高于油酸组（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）；（３）油酸组９０ｍｉｎ时血浆和肺泡灌洗液中的中分子物质浓度明显高于对照组（Ｐ＜０．０１），而６５４－２或肠道吸附剂均可明显减少油酸所致的中分子物质的增多（Ｐ＜０．０１）。结论：ＲＤＳ过程可使左心功能降低，而６５４－２或肠道吸附剂均可防治左心功能的降低，并与中分子物质的增加和减少有关     

实验性呼吸窘迫综合征时脂质过氧化物和中分子物质的变化

目的：探讨脂质过氧化物和中分子物质在实验性呼吸窘迫综合征中的变化和作用。方法：用油酸复制家兔呼吸窘迫征模型观察各项指标。结果：血及支气管肺泡灌洗液内ＭＤＡ和中分子物质增高，ＧＳＨ－Ｐｘ和ＳＯＤ起初被激活，但随时间的延长它们的活力逐渐降低。同时支气管肺泡灌洗液中的碱性磷酸酶和白蛋白定量均进行性增加，肺系数也增高。结论：结果提示这一病理过程的发生与脂质过氧化和中分子物质的损害作用有关     

云芝多糖对巨噬细胞氧化LDL的抑制作用与iNOS基因表达

目的和方法为揭示云艺多糖（PSK）的抗动脉粥样硬化机理,用RT-PCR和Westernblot等方法研究了PSK对巨噬细胞氧化低密度脂蛋白（LDL）的影响。结果PSK处理小鼠的巨噬细胞对LDL的氧化作用明显降低,NO分泌明显增加;PSK增强了IFN-Y对巨噬细胞LDL的抑制作用,减弱了一氧化氮合酶抑制剂N-Arg和DPI对细胞氧化LDL的增强作用;同时PSK能增强IFN-Y对细胞分泌NO的诱导作用,减弱N-Arg对细胞分泌NO的抑制作用;PSK能增强Raw264.7细胞iNOSmRNA和蛋白表达。结论PSK能抑制巨噬细胞对LDL的氧化,其作用机制可能与其能诱导iNOS基因表达有关。     

一氧化氮在低密度脂蛋白氧化中的作用及调控研究

通过给小鼠腹腔注射云芝多糖，并用干扰素γ，脂多糖及佛波酯醇刺激细胞，观察细胞一氧化氮的产量，测定脂氢过氧化物和硫代巴比妥酸反应物质，以反应低密度脂蛋白的氧化程度，从而部分揭示巨噬细胞氧化低密度脂蛋白的机制，探讨一氧化氮在低密度脂蛋白氧化中的作用和云芝多糖的抑制效果。