载脂蛋白E在神经母细胞瘤细胞内表达对细胞生长的影响

目的观察人载脂蛋白E(apoE)在神经母细胞瘤细胞SK-N-SH内表达的分布情况及对细胞生长的影响。方法构建含apoEcDNA和绿色荧光蛋白(GFP)基因的真核表达载体,转染至SK-N-SH细胞,经G418结合荧光动态监测筛选稳定表达人apoE基因的细胞克隆,荧光显微镜下观察GFP-apoE融合蛋白在SK-N-SH细胞中的表达。采用MTT法和流式细胞术观察apoE3、apoE4对细胞增殖和细胞周期的影响。结果经酶切和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒,经G418筛选得到的SK-N-SH细胞克隆中存在apoE基因表达,其表达分布与GFP不同,呈点状分布。转染apoE3的细胞增殖速度加快,G0G1期细胞比例降低,S期细胞增加;而转染apoE4的细胞则相反,表现为增殖速度减缓,G0G1期细胞比例增加,S期细胞减少。结论神经母细胞SK-N-SH细胞内apoE的表达对其生长具有表型特异性。通过建立稳定表达不同多态性的apoE的细胞克隆,为进一步研究apoE在神经细胞中的生物学功能以及apoE在阿尔茨海默病发病机制中的作用奠定了基础。     

医学基础学科研究生创新人才培养的研究与实践

我国研究生教育质量与世界发达国家相比,存在着创新精神与创新能力培养不足等问题.本文结合南京医科大学病理学与病理生理学重点实验室多年来在研究生教育实践中的体会,从学科建设、基础训练、研究生管理、品德、学风、学术交流等方面,阐述了提高我校病理生理学系研究生培养质量的方法和措施,以期为我国基础医学研究生创新人才的培养提供相应的理论支持和可供借答的经验.     

控制某些人兽共患寄生虫病的地理学新方法

本文介绍了地理学新方法及其在某些人兽共患寄生虫病流行病学研究中的应用。     

医学基础学科研究生创新人才培养的研究与实践

我国研究生教育质量与世界发达国家相比,存在着创新精神与创新能力培养不足等问题.本文结合南京医科大学病理学与病理生理学重点实验室多年来在研究生教育实践中的体会,从学科建设、基础训练、研究生管理、品德、学风、学术交流等方面,阐述了提高我校病理生理学系研究生培养质量的方法和措施,以期为我国基础医学研究生创新人才的培养提供相应的理论支持和可供借答的经验.     

A1类清道夫受体通过促进M2型巨噬细胞极化增加脂肪组织产热能力

目的：探讨A1类清道夫受体（macrophage scavenger receptor 1,MSR1）在低温刺激诱导白色脂肪产热进程中的作用及其机制。方法：正常饮食（common diet,CD）的野生型小鼠（MSR1^+/+）和MSR1缺失表达小鼠（MSR1^-/-）分别给予低温刺激1 d 或者 14 d 后,通过 qRT-PCR、Western blot 和免疫组织化学染色检测皮下白色脂肪组织（subcutaneous white adipose tissue, scWAT）和棕色脂肪组织（brown adipose tissue,BAT）中脂肪产热能力标志物（UCP1、Cidea和Cox8b）的表达。qRT-PCR和流式细胞术检测正常饮食的MSR1^+/+和MSR1^-/-小鼠给予低温刺激14 d后,小鼠scWAT中巨噬细胞极化情况。建立高脂饮食（high fat diet,HFD）诱导的小鼠肥胖模型,监测CD和HFD 12周的MSR1^+/+和MSR1^-/-小鼠体重变化,并使用代谢笼监测小鼠耗氧量和产热量变化;qRT-PCR和免疫组织化学染色检测HFD 12周的小鼠给予低温刺激7 d后,小鼠scWAT和BAT中产热基因表达。 体外实验应用巨噬细胞条件培养基刺激小鼠前脂肪细胞分化,待分化成熟后应用qRT-PCR检测产热基因表达。结果：慢性低温刺激下,与MSR1^+/+小鼠相比,MSR1^-/-小鼠脂肪组织产热基因表达明显降低。进一步,MSR1^-/-小鼠scWAT中M2型巨噬细胞数量明显减少。HFD喂养12周后,MSR1^-/-小鼠体重增加更为明显,并且耗氧量和产热量明显降低。低温刺激下,与MSR1^+/+ HFD小鼠相比,MSR1^-/- HFD小鼠脂肪产热能力明显降低。体外细胞研究发现,与MSR1^+/+小鼠腹腔巨噬细胞条件培养基诱导的成熟脂肪细胞相比,MSR1^-/-小鼠腹腔巨噬细胞条件培养基诱导的成熟脂肪细胞产热基因表达明显降低。结论：低温刺激下,MSR1通过增加M2型巨噬细胞极化促进小鼠脂肪组织产热。     

氧化呼吸链在精子运动中的作用研究

目的 探讨精子运动的能量供应机制。方法 采用计算机辅助精子分析（ＣＡＳＡ）和组织化学、生物化学方法,检测人精子用氧化呼吸链阻断剂ＫＣＮ卵育前后,运动状态和细胞色素氧化酶活性。结果 用ＫＣＮ孵育后精子细胞色素氧化酶活性被完全阻断。然而,精子运动速度参数和运动状态参数无显著改变。结论 在氧化呼吸链阻断后,精子仍能维持基本正常地运动,表明精子运动的供能尚有其他来源。     

定量聚合酶链反应法对不育患者精子中DAZ基因缺失的诊断

目的 :建立测定人精子 DAZ基因相对含量的定量聚合酶链反应 ( PCR)法并应用于检测不育男性精子中 DAZ基因的相对含量 ,以分析其病因。方法 :应用定量聚合酶链反应 ( PCR)法测定了 90例精子发生正常男性和 50例少、弱、畸精子患者精子中 DAZ基因的相对含量。结果 :以 ZFX/ ZFY基因为外部参照 ,精子发生正常男性精子中 DAZ基因的相对含量正常值为 1 .47± 0 .2 93。重复性试验结果表明定量 PCR法批内、批间变异系数分别为 5.8%～ 6.5%、9.5%～ 1 0 .8%。对不育男性的检测结果发现其中 1例少精子症患者 DAZ基因相对含量为 0 .5,明显低于正常值下限 ,其他不育患者未见明显异常。结论 :定量 PCR法测定人精子中 DAZ基因的相对含量是一种切实可行的检测方法 ,部分精子中 DAZ基因的缺失可能为男性不育的病因。     

氰化钾对人精子线粒体细胞色素氧化酶作用的研究

目的了解氰化钾(KCN)对人精子线粒体内细胞色素氧化酶的阻断作用。方法用不同浓度的KCN作用于活力正常的精子,阻断精子内细胞色素氧化酶的活性,观察其活性被阻断的情况。结果低至8.3×10-3mol／L的KCN即可完全阻断精子内的细胞色素氧化酶。结论实验结果提示,8.3×10-3mol／L的KCN可能是阻断精子线粒体内细胞色素氧化酶活性的最低浓度。     

稳定表达A类I型清道夫受体的HEK293细胞系的建立

目的建立稳定表达A类Ⅰ型清道夫受体真核表达载体的人胚肾细胞——HEK293细胞系。方法构建pRc／CMV-A类Ⅰ型清道夫受体真核表达载体，应用脂质体介导的转染技术将该质粒导入HEK293细胞，再用G418筛选稳定的细胞表达系。真核细胞中A类I型清道夫受体的表达分别用逆转录聚合酶链反应与Westem blot方法检测。     

医学基础学科研究生创新人才培养的研究与实践

我国研究生教育质量与世界发达国家相比,存在着创新精神与创新能力培养不足等问题.本文结合南京医科大学病理学与病理生理学重点实验室多年来在研究生教育实践中的体会,从学科建设、基础训练、研究生管理、品德、学风、学术交流等方面,阐述了提高我校病理生理学系研究生培养质量的方法和措施,以期为我国基础医学研究生创新人才的培养提供相应的理论支持和可供借答的经验.