阿克替苷通过激活血红素加氧酶-1抑制H_(2)O_(2)诱导的视网膜神经节细胞氧化损伤北大核心

目的研究阿克替苷对视网膜神经节细胞(RGC-5)的保护作用及其机制。方法将RGC-5细胞分为对照组、H_(2)O_(2)组、阿克替苷+H_(2)O_(2)组(1μmol·L^(-1)、10μmol·L^(-1)、30μmol·L^(-1)阿克替苷分别预处理细胞2 h),MTT法检测各组细胞活力;后续实验阿克替苷+H_(2)O_(2)组选择阿克替苷30μmol·L^(-1)作为治疗浓度,荧光探针H2DCF-DA检测活性氧(ROS)产生和罗丹明123检测线粒体膜电位,Western blot检测各组细胞中Bcl-2、Bcl-2/Bax、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达。机制研究中首先用不同浓度阿克替苷单独处理RGC-5细胞24 h,Western blot检测血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达水平,进一步锌原卟啉(ZnPP)预处理RGC-5细胞1 h,而后30μmol·L^(-1)阿克替苷单独预处理后与200μmol·L^(-1)H_(2)O_(2)共孵育24 h,通过MTT法测定细胞活力。结果与对照组相比,H_(2)O_(2)组中细胞活力明显降低(P<0.01)。与H_(2)O_(2)组相比,阿克替苷+H_(2)O_(2)组中10μmol·L^(-1)、30μmol·L^(-1)阿克替苷预处理可显著提高细胞活力(P<0.05、P<0.01)。与对照组相比,H_(2)O_(2)组RGC-5细胞ROS生成明显增加,线料体膜电位显著降低,同时Bcl-2/Bax比值降低和Caspase-3蛋白相对表达量增加(均为P<0.05)。与H_(2)O_(2)组相比,阿克替苷+H_(2)O_(2)组RGC-5细胞ROS生成减少,线粒体膜电位增加,Bcl-2/Bax比值提高,Caspase-3蛋白相对表达量减少(均为P<0.05)。与阿克替苷未处理组相比,阿克替苷剂量依赖性诱导HO-1蛋白的表达,与阿克替苷+H_(2)O_(2)组相比,加入ZnPP后细胞活力降低(P<0.01),说明HO-1抑制剂ZnPP降低了阿克替苷对H_(2)O_(2)损伤的抑制作用。结论阿克替苷能够通过上调HO-1表达抑制H_(2)O_(2)诱导的RGC-5氧化应激损伤。     

富马酸二甲酯和肾草酸钙结石模型大鼠氧化应激的关系

目的:探讨富马酸二甲酯(DMF)和肾草酸钙结石模型大鼠氧化应激的关系。方法:45只雄性SD大鼠,随机分为对照组,模型组和DMF组,每组15只。对照组和模型组大鼠每天给予双蒸水灌胃1次;模型组大鼠每天一次性腹腔注射一水乙醛酸80 mg/kg;DMF组大鼠每天DMF 25 mg/kg灌胃处理,连续14 d。比较3组大鼠肾脏草酸钙晶体含量、氧化应激指标、核因子E2相关因子2 (Nrf2)和血红素氧化酶-1(HO-1)表达的差异;比较3组大鼠尿钙、尿草酸含量、尿量、血肌酐和尿肌酐的差异。结果:对照组大鼠肾脏组织未见明显草酸钙晶体,DMF组比模型组草酸钙明显降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组和DMF组血肌酐含量均明显升高,且DMF组低于模型组(P<0.05)。3组大鼠肾脏氧化应激指标比较,组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,模型组大鼠Nrf2和HO-1明显降低,且模型组低于DMF组(P<0.05)。结论:DMF可以有效降低肾草酸钙结石模型大鼠的草酸钙晶体附着以及缓解大鼠的氧化应激损伤,其机制可能与DMF诱导Nrf2和HO-1表达有关。     

腺苷蛋氨酸联合糖皮质激素治疗胆汁淤积性肝病的临床效果及对血清Nrf2、Ho-1水平的影响

目的探讨腺苷蛋氨酸联合糖皮质激素治疗胆汁淤积性肝病(cholestatic liver disease, CLD)的临床效果及对血清核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2, Nrf2)、血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1, Ho-1)水平的影响。方法选取2016年10月—2018年10月收治的94例CLD,根据治疗方法的不同,分为对照组与观察组,每组各47例。对照组予常规保肝治疗,观察组予常规保肝联合糖皮质激素治疗。两组均连续治疗4周。评估治疗后临床效果,记录治疗前后临床症状(疲乏、皮肤瘙痒、消化道症状及皮肤黄染)、肝功能相关指标[丙氨酸转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)、γ-谷氨酰转移酶(γ-glucosyltransferase,γ-GT)、总胆红素(total bilirubin, TBil)、总胆汁酸(total bile acid, TBA)及Ho-1]与Nrf2变化情况,观察治疗过程中不良反应发生情况。结果观察组治疗后总有效率明显高于对照组,比较差异有统计学意义(P0.05)。与对照组治疗后比较,观察组治疗后疲乏、皮肤瘙痒、消化道症状、皮肤黄染的发生率明显下降,血清ALT、ALP、γ-GT、TBil及TBA水平下降,血清Ho-1、Nrf2水平升高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);与本组治疗前比较,两组治疗后疲乏、皮肤瘙痒、消化道症状、皮肤黄染的发生率降低,血清ALT、ALP、γ-GT、TBil及TBA水平降低,血清Ho-1、Nrf2水平升高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。两组治疗过程中均未发生明显不良反应。结论腺苷蛋氨酸联合糖皮质激素治疗CLD可通过激活Nrf2/Ho-1通路,进而减轻患者临床症状,改善肝功能,效果显著,且安全性高。     

间充质干细胞外泌体上调Mir-21调控HO-1机制促进椎间盘退变的修复

目的探讨间充质干细胞外泌体上调Mir-21调控血红素氧合酶(HO-1)机制促进椎间盘退变的修复研究。方法新西兰健康大白兔36只随机数字法分成3组,Blank组(正常大白兔)、Model组(椎间盘退变大白兔)和Mir-21组(椎间盘退变大白兔+间充质干细胞外泌体),通过建模处理、外泌体提存、免疫组织化学染色、Rt-PCR检测、HE染色、流式细胞术检测,观察外泌体形态、对比分析HO-1蛋白阳性率在椎间盘退变中的表达,Mir-21、HO-1和BACH1在大白兔椎间盘组织中的表达,大白兔椎间盘组织形态学变化,白兔退变髓核细胞凋亡能力情况。结果 Blank组HO-1蛋白阳性率为(62.23±4.1)%,细胞颗粒呈棕黄色,Model组的蛋白阳性率为(8.96±2.4)%,明显低于Blank组(P0.05),Mir-21组蛋白阳性率为(42.38±3.46)%,细胞颗粒呈淡黄色,显著高于Model组低于Blank组(P0.05);Model组的Mir-21、HO-1表达水平明显低于Blank组和Mir-21组(P0.05),Mir-21组的Mir-21、HO-1表达水平显著低于Blank组(P0.05)。Model组的BACH1水平明显高于Blank组和Mir-21组(P0.05),Mir-21组的BACH1水平显著高于Blank组(P0.05);Blank组兔髓核内基质比较高,髓核细胞颜色较深,周边胞浆颜色较淡,Model组通过建模后髓核细胞消失,与Blank组相比基质密度比较低,髓核细胞难见(P0.05),Mir-21组通过Mir-21转染后,与Model组相比髓核内基质明显升高,密度染色加深,髓核细胞出现,并且染色加深(P0.05);Model组和Mir-21组的细胞凋亡能力明显低于Blank组(P0.05),Mir-21组细胞凋亡能力显著高于Model组(P0.05)。结论间充质干细胞外泌体上调Mir-21,抑制BACH1来促进HO-1机制修复椎间盘退变的能力,对退变组织细胞具有促凋亡能力。     

烟雾所致轻度稳定期COPD小鼠肺组织中MRP1表达增加与Nrf2信号通路有关

目的探讨Nrf2信号通路对烟雾致轻度稳定期COPD小鼠肺组织中MRP1表达的影响。方法被动香烟烟吸法建立轻度COPD小鼠模型,检测肺功能;病理切片观察肺组织病理学改变;免疫组化及Western blot检测相关蛋白在肺组织中的表达水平。结果与正常组相比,野生型(WT)及Nrf2~(-/-)模型组各肺功能指标明显降低;并且Nrf2~(-/-)模型组与WT模型组相比,各肺功能指标的下降更为明显。HE染色结果显示,WT及Nrf2~(-/-)模型小鼠肺泡中均发生弥漫性炎症反应,肺泡支气管结构受损,并且在Nrf2~(-/-)模型小鼠中病理改变更为明显。免疫组化及Western blot结果显示,与WT正常组相比,MRP1在Nrf2~(-/-)正常组小鼠肺组织中的表达明显减少;被动香烟烟吸后,与WT正常组相比,MRP1、Nrf2、HO-1在WT模型组中的表达明显增多,但是与Nrf2~(-/-)正常组相比,在Nrf2~(-/-)模型组中MRP1的表达并未发生明显改变。结论 香烟烟雾所致轻度稳定期COPD小鼠肺组     

热敏灸治疗脾胃虚弱型糖尿病胃轻瘫疗效观察

目的:观察热敏灸治疗脾胃虚弱型糖尿病胃轻瘫的疗效及相关机制。方法:将70例脾胃虚弱型糖尿病胃轻瘫患者随机分为对照组和观察组各35例。对照组予多潘立酮片,观察组在此基础上予热敏灸治疗,疗程为1个月。治疗前后测定胃轻瘫症状严重指数量表(GCSI)评分、胃排空率,测定患者静脉血血红素加氧酶-1(HO-1)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平,于治疗结束后进行疗效评价。结果:观察组总有效率明显高于对照组(P<0.05);治疗后,两组早饱、恶心呕吐、腹胀评分及GCSI总分明显降低(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05);治疗后,两组胃排空率均明显提升,观察组胃排空率明显高于对照组(P<0.05);观察组HO-1、IGF-1水平在治疗后明显升高,且与对照组有统计学差异(P<0.05)。结论:热敏灸治疗脾胃虚弱型糖尿病胃轻瘫疗效确切,能显著降低GCSI量表评分,改善胃排空率,这可能与其纠正HO-1、IGF-1水平相关。     

腹腔镜胃癌根治术对胃癌患者血清血红素加氧酶-1和肿瘤坏死因子-α及C反应蛋白的影响

目的探讨腹腔镜胃癌根治术对胃癌患者血清血红素加氧酶-1(HO-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)水平的影响。方法选取2017年3月至2018年3月间陕西省铜川矿务局中心医院收治的98例胃癌患者,根据手术方式不同分为腹腔镜组(50例)和开腹组(48例)。腹腔镜组患者采用腹腔镜D2根治术,开腹组患者采用开腹D2根治术,比较两组患者手术前后血清HO-1、TNF-α及CRP水平。结果腹腔镜组患者术中出血量、手术时间、术后排气时间和术后下床活动时间均低于开腹组,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。术前,两组患者HO-1、TNF-α和CRP指标水平比较,差异均无统计学意义(均P> 0. 05)。术后,两组患者HO-1、TNF-α和CRP指标水平均高于术前,而腹腔镜组患者各指标水平均低于开腹组,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论腹腔镜D2根治术创伤小,抑制胃癌患者血清HO-1、TNF-α及CRP的释放,降低炎症反应,提高患者预后。     

可视化血红素加氧酶-1小鼠模型用于药物肝毒性评价

目的 建立实时动态监测药物肝毒性小鼠模型,用于药物肝毒性临床前评价.方法 通过水动力高压转染法将表达萤火虫荧光素酶的血红素加氧酶-1(HO-1)报告基因质粒转染到小鼠肝细胞中,建立HO-1-Luc小鼠模型.使用HO-1-Luc小鼠模型动态监测对乙酰氨基酚(APAP)导致的肝损伤以及抗氧化剂谷胱甘肽对药物性肝损伤的治疗效果.结果 使用HO-1-Luc小鼠模型通过活体荧光成像的手段能监测到APAP引起的肝毒性,与通过活性氧相关标志物、转氨酶以及组织病理学等经典肝毒性检测手段得到的结果吻合.同时该小鼠模型能够监测到谷胱甘肽对APAP诱导的肝毒性保护作用.结论 建立的HO-1-Luc小鼠模型在药物临床前肝毒性评价中具有潜在应用价值.