血管紧张素转换酶2在SARS-CoV-2感染中的作用机制研究进展

引发新型冠状病毒肺炎的病原体SARS-CoV-2为单股正链RNA病毒,传染性强,已在世界范围内多个国家传播,成为全球关注的热点。研究表明血管紧张素转换酶2（angiotensin converting enzyme 2,ACE2）可能是SARS-CoV-2 感染宿主的受体,因而了解SARS-CoV-2作用于ACE2的不同机制对于开发治疗性药物和疫苗研发具有重要参考价值。本文综述了ACE2在机体不同组织表达情况与组织损伤的关系,ACE2参与免疫炎症的调节过程及年龄、性别、不同基础疾病等因素对ACE2表达和组织损伤的机制进展。     

中药酸味的药性表达及在临证配伍中的应用

对中药五味中"酸"味的概念、功效内涵、来源以及与药性理论的内在联系进行了归纳。阐述应用电子舌仿生技术及化学分析手段进行酸味物质基础研究的思路和模式,提出酸味的表征方式及其物质基础拆分的研究方法,并总结了酸味中药的临床应用与配伍规律,为酸味药性的表达及临床合理应用提供研究思路和理论依据。     

低浓度5-氟尿嘧啶对胃癌细胞生物学特性的影响

目的探讨低浓度5-氟尿嘧啶(5-FU)对胃癌细胞转录因子OCT4、SOX2及细胞增殖能力的影响。方法用MTT法检测并确定5-FU对胃癌细胞系MGC803、SGC-7901的半数抑制浓度(IC50),实时荧光定量PCR及western blot检测经不同浓度的5-FU处理后胃癌细胞转录因子OCT4、SOX2表达水平,平板克隆形成实验分析胃癌细胞增殖能力的改变情况。结果5-FU对MGC803、SGC-7901细胞的IC50分别为(28.82±1.25)和(23.95±1.34);低浓度5-FU(0.5、1μmol/L)处理后,胃癌细胞MGC803、SGC-7901中转录因子OCT4、SOX2在mRNA及蛋白质水平中的表达均增强,差异具有统计学意义(P0.05);平板克隆形成实验结果表明,经低浓度5-FU(0.5、1μmol/L)作用后胃癌细胞的增殖能力变强,形成的克隆数增多,差异有统计学意义(P0.05);但5-FU浓度为2μmol/L时OCT4和SOX4的表达有不同程度的减弱,且克隆形成能力也有下降。结论低浓度5-FU能增强胃癌细胞转录因子表达、促进胃癌细胞增殖。     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在CIK细胞诱导中的表达及其功能

目的探讨肿瘤患者自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)诱导过程中CD4~+CD25~+Foxp3~+调节性T细胞的变化及其功能。方法应用血细胞分离机采集22例肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC),诱导培养CIK细胞,用流式细胞仪动态监测其CD4~+CD25~+Foxp3~+表型,并分析Tregs细胞负性调控分子转化生长因子-β1(TGF-β1)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)和IL-10的表达水平,采用细胞增殖抑制试验测定Tregs细胞免疫学功能。结果诱导的CIK细胞中存在CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs,其表达量分别为第1天(0.30±0.15)%、第3天(4.48±1.72)%、第5天(3.83±2.12)%、第9天(2.37±1.17)%、第11天(1.65±0.99)%、第14天(1.04±0.76)%。诱导第14天时的Tregs细胞免疫调控负性分子TGF-β1的表达水平为(97.2±2.1)%、CTLA-4为(96.2±3.5)%、IL-10为(4.2±2.3)%。细胞增殖抑制试验中空白对照组、条件对照组以及实验组的增殖细胞表达量分别为(8.55±2.38)%、(42.66±7.32)%、(57.04±7.49)%。结论 CD4~+CD25~+Foxp3~+Tregs细胞可作为潜在的CIK细胞质量评价指标。     

胃癌患者血清外泌体中DANCR表达及其临床意义

目的检测胃癌患者血清外泌体(exosome)中抗分化非编码RNA(DANCR)的表达水平并分析其临床应用价值。方法采用实时荧光定量RT-PCR检测胃癌细胞培养上清和胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平,分析其与临床病理资料的相关性,绘制ROC曲线评价其诊断效能。结果 DANCR在人胃癌细胞系HGC-27中表达水平(4.43±0.37)明显高于胃黏膜上皮细胞(1.01±0.01),差异有统计学意义(P0.05)。HGC-27细胞培养上清exosome中DANCR表达水平(3.06±0.14)明显高于GES-1细胞(1.01±0.20),差异有统计学意义(P0.05)。DANCR在胃癌患者血清exosome中的平均含量[5.060(1.380,22.785)]较胃良性疾病患者[0.535(0.340,1.380)]和体检健康者[1.200(0.605,1.655)]明显升高(Z分别为-3.409,-4.229,P均0.01),且与肿瘤大小、TNM分期以及淋巴结转移相关。胃良性疾病患者与体检健康者相比,血清exosome中DANCR含量差异无统计学意义(Z=-1.308,P0.05)。胃癌患者血清exosome中DANCR的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.777,95%可信区间(CI)为0.678~0.876,cut-off值2.50,敏感性为68.6%,特异性为84.4%。结论胃癌患者血清exosome中DANCR表达水平升高,有望成为胃癌诊断的新指标。     

SALL4在肿瘤中的作用及临床应用价值

婆罗双树样基因-4(sal-like 4,SALL4)是维持胚胎干细胞自我更新和多能性的重要转录因子。近年来,研究发现SALL4在肿瘤发生、发展中发挥重要作用。SALL4通过调控下游基因表达和信号通路转导,参与肿瘤生长、转移、耐药和复发。SALL4在多种肿瘤组织中存在过表达,且其表达水平与肿瘤进展和患者预后相关。靶向抑制SALL4的表达及其生物学功能具有明显抗肿瘤效果。本文就SALL4在肿瘤中的作用机制及其临床应用价值作一综述。     

非小细胞肺癌患者血清sB7-H3检测及其意义

摘要：目的：探讨非小细胞肺癌 (NSCLC) 患者血清sB7H3的表达水平及其临床意义。 方法：用ELISA夹心法检测36例NSCLC患者和33例体检健康者血清sB7-H3的表达水平,同时检测上述标本中Cyfra21-1的含量进行比较。 结果：NSCLC患者血清sB7-H3水平为(92.7±33.6) ng/mL,健康对照组为（71.7±21.0）ng/mL,两者有显著性差异（t=2.756,P<0.01）;且NSCLC患者血清sB7-H3与Cyfra21-1的水平呈正相关,其敏感性（88.9%）和诊断效率（82.6%）均高于Cyfra21-1。 结论：sB7-H3在NSCLC患者血清中水平升高,其对NSCLC的诊断和病期进展的判断具有潜在的临床应用价值。     

miR-146b在高糖环境下对肾小球系膜细胞的作用研究

目的探讨miR-146b在高糖环境下对肾小球系膜细胞的作用。方法构建高糖培养环境,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-146b在大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E)、足细胞(podocyte)及肾小球系膜细胞(HBZY-1)中的表达水平;western blot分析过表达/敲减miR-146b前后,HBZY-1细胞中YAP及磷酸化YAP(p-YAP)蛋白的表达水平;细胞免疫荧光法检测YAP蛋白的表达情况。结果体外经高糖刺激后,HBZY-1细胞中miR-146b的表达水平(2.197±0.166)明显升高(t=7.215,P0.01)。western blot结果显示,高糖组YAP蛋白(0.753±0.008)的表达水平升高(t=32.17,P0.001),p-YAP蛋白(0.372±0.005)的表达水平降低(t=39.56,P0.001);免疫荧光结果显示,高糖组YAP蛋白荧光强度(53.620±4.229)明显升高(t=5.410,P0.01)。过表达miR-146b后,western blot结果显示,YAP蛋白(0.883±0.005)表达上调(t=10.71,P0.001),而p-YAP蛋白(0.606±0.006)表达下调(t=44.16,P0.001);免疫荧光结果显示,YAP荧光强度(25.70±1.589)增强(t=10.45,P0.001)。敲减miR-146b后,western blot结果显示,YAP蛋白(0.706±0.002)表达下调(t=22.15,P0.001),p-YAP蛋白(0.774±0.003)表达上调(t=25.61,P0.001);免疫荧光结果显示,YAP荧光强度(8.900±1.022)减弱(t=11.56,P0.001)。结论 miR-146b在高糖刺激的HBZY-1细胞中表达上调,可能通过调控YAP信号参与肾细胞损伤。     

国产和进口冷冻原肠中奇异变形杆菌的监测与分析

目的研究国产和进口冷冻原肠携带奇异变形杆菌的情况。方法本研究对2014-2016年采集的40份冷冻原肠样品进行检测,其中包括16份国产猪原肠和24份进口羊原肠。经过奇异变形杆菌的分离、表型特征鉴定和16S rDNA鉴定,同时收集GenBank中不同地域和宿主动物的奇异变形杆菌,以及其他重要食源性致病菌的16S rDNA序列,结合本研究测定序列共同进行比对分析。结果40份样品中有10份样品为PM检测阳性,总的PM检测阳性率为25.00%,其中,国产冷冻猪原肠的PM检测阳性率为31.25%,澳大利亚和新西兰进口冷冻羊原肠的PM检测阳性率分别为27.27%和15.38%,另外,发现不同原肠PM分离株之间的16S rDNA同源性差异较大,且同源性的高低和PM菌株的分离地域及宿主动物均未呈现明显的关联性。结论国产和进口冷冻原肠携带奇异变形杆菌的情况比较严重,相关管理和研究应进一步加强。     

Graves病患者外周血滤泡辅助性T细胞和活化B细胞水平及意义

目的探讨Graves病患者外周血滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cells,Tfh)和活化B细胞(CD19+CD83+B细胞)与疾病的关系。方法采用电化学发光法和流式细胞术分析新发Graves病患者和体检健康者外周血FT3、FT4、TSH、甲状腺自身抗体、Tfh和活化B细胞的水平,同时进行相关性分析。结果 Graves病患者Tfh为(3.05±1.33)%,高于健康人对照组的(1.15±0.59)%(P0.05);Graves病患者活化B细胞为(7.77±3.42)%,高于对照组的(4.94±1.43)%(P0.05);Graves病患者Tfh与TPO-Ab、Tg-Ab呈正相关(TPO-Ab:r=0.893,Tg-Ab:r=0.807,P均0.01),而与TRAb无相关性(r=0.539,P0.05);此外活化B细胞比例与其外周血中TPO-Ab呈正相关(r=0.895,P0.01),而与Tg-Ab、TRAb无相关性(Tg-Ab:r=0.137,TRAb:r=0.398,P均0.05)。Graves病患者外周血Tfh与活化B细胞呈正相关(r=0.702,P0.05)。结论Graves病患者外周血中Tfh及活化B细胞可能参与Graves病的发生和发展。