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1.
(沈张悦)(邵静芳)(王晓林)(朱慧芬)ExperimentalStudyonAnti-tumorEffectofSplenocytesInducedbyAnti-CD3McAb,PHAandIL-2¥SHENGuan-xin,WANGXiao-li... 相似文献
2.
我们成功地将人T淋巴细胞白血病细胞(MOLT-4)、人早幼粒细胞白血病细胞(HL-60)移植到裸鼠体内。裸鼠经环磷酰胺(2.5mg/只)预处理后分别将(5~10)×10~6MOLT-4细胞及(2~4)×10~7HL-60细胞移植到动物皮下能形成实体瘤,该肿瘤呈进行性生长。MOLT-肿瘤在裸鼠间连续传代4次,移植成功率为69.2%,HL-60肿瘤连续传代3次,成功率为100%。肿瘤染色体分析属于人体细胞核型,细胞学研究显示裸鼠体内MOLT-4、HL-60细胞与体外培养的细胞具有良好的一致性,故裸鼠体内MOLT-4、HL-60肿瘤模型的建立对于研究人白血病提供了有用工具。 相似文献
3.
分别用12.5%、25.0%、50.0%、75.0%和100.0%氧化的Dex T_(10)作为交联剂交联抗人胸腺细胞球蛋白(AHTG)和柔红霉素(DNR)形成免疫偶联物(AHTG-Dex-DNR),其中以25.0%氧化的DexT10作为交联剂最佳。它既提高了偶联物的交联度,又降低了硼氢化钠对AH-TG和DNR活性的损伤。偶联物对靶细胞CEM 24h细胞毒试验LD_(50)为10.68μg/ml。对非靶细胞K562仅有轻微杀伤作用,10min细胞毒试验为特异的杀灭肿瘤细胞试验,对CEM的LD_(50)为14.79μg/ml,对K562几乎无细胞毒作用,表明免疫偶联物有特异性细胞毒作用。 相似文献
4.
抗转铁蛋白受体单链抗体原核表达载体的构建和表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 构建抗转铁蛋白受体(TfR)单链抗体原核表达载体,为进一步研究其效应奠定基础。方法 从抗TfR单克隆抗体重链和轻链可变区基因的克隆载体pGEM-T-VH和pGEM-T-VL中扩增重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,用重叠延伸PCR的方法,在VH和VL基因间引入连接短肽(Linker),构建VH-Linker-VL的单链抗体(single chain Fv,scFv)基因。经NcoⅠ和NotⅠ酶切后亚克隆到原核分泌型表达载体pUCl9/119上,转化和筛选后,阳性细菌经IPTG诱导表达。间接免疫荧光法(IFA)及抗体封闭试验鉴定其抗体活性。结果 凝胶电泳可见重叠延伸PCR扩增产物约700bp条带,SDS-PAGE鉴定表达产物的分子量为27kD左右,与scFv的理论值一致,IFA及抗体封闭试验证明表达产物有抗人TfR的活性。结论 本研究成功地构建并表达了抗人TfR scFv,为抗人TfRscFv的应用奠定了基础。 相似文献
5.
目的:在原核细胞中表达经噬菌体抗体库筛选可与HepG2细胞特异性结合的单链抗体(scFv),并对其特性进行鉴定。方法:采用正常肝细胞系L02和肝癌细胞系HepG2,从人源噬菌体抗体库中筛选可与HepG2细胞特异结合的scFv。对scFv DNA测序后,以其阳性噬菌体感染大肠杆菌HB2151,在IPTG诱导下表达scFv并以金属离子螯和层析(IMAC)进行纯化,用100g/L SDS-PAGE、Western blot及ELISA分析纯化的scFv。将纯化的scFv与HepG2细胞共孵育后,观察其对细胞生长的影响。结果:经筛选获得的2个相对特异性的scFv,分别命名为SLH04及SLH10。经IPTG诱导获得可溶性scFv的表达。Western blot分析证明,表达产物的相对分子质量(Mr)均为36000左右,与理论预期值相符。ELISA检测表明,纯化的scFv能与HepG2细胞特异性结合,并抑制HepG2细胞的生长。结论:从人源噬菌体抗体库中,筛选出能与HepG2细胞特异性结合的scFv,并在大肠杆菌中表达,有望用于肝癌生物治疗的实验研究。 相似文献
6.
本文应用人胎盘酸性铁蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合制备出3株抗人胎盘酸性铁蛋白(PAF)的单克隆抗体(McAb)。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测证明,此单抗对人胎盘酸性铁蛋白的酸性部分反应较强,而与碱性部分反应较弱;间接免疫荧光法检测此单机与体外培养的肝癌细胞株7721起反应,而与白血病细胞株Daudi、肺癌细胞株926,以及外周血单个核细胞均不起反应。 相似文献
7.
目的 研究Weel转基因细胞抗CTL介导的凋亡效应及抗穿孔素抗体的对此抗凋亡效应的影响。方法 采用DNA转染技术将重组体Weel Hu/GFP导入哺乳动物细胞NIT(鼠胰岛细胞瘤细胞);以转染重组体前、后的NIT为靶细胞,采用ELISA凋亡试剂盒检测CTL介导的凋亡效应。结果 转染Weel及加入抗穿孔素抗体的NIT组发生凋亡的细胞数最少。结论 Weel基因转染靶细胞在一定程度上可抵抗CTL介导的细胞凋亡,而穿孔素抗体可协同增强此抗凋亡效应。 相似文献
8.
本文采用间接ELISA法检测了11株抗B-CLL患者IgM腹水和杂交瘤上清McAb的相对亲和力。结果提示,各株McAb结合抗原的相对亲和力不同。根据50%最大结合浓度分为两组。其中4株杂交瘤上清McAb与纯化腹水McAb测得结果基本吻合。实验结果为合理地选用这些单抗提供了重要依据。 相似文献
9.
本文应用放射免疫测定法,检测了单克隆抗体(λ-44-5-15,λ26-4-15,SMb,OKT10和抗B)作用于相应白血病瘤细胞后细胞内cAMP、cGMP的含量变化。结果发现:抗原、抗体比例在80∶1时经McAb作用16~24h后,瘤细胞内cAMP含量明显高于对照组,cGMP含量明显低于对照组(P<0002-0001)。从而提示:McAb可通过对细胞膜作用,调控细胞内cAMP和cGMP的水平。本文还对McAb作用浓度及作用时间进行了探讨。 相似文献
10.
MTT比色法检测IL—2和杀伤细胞活性的研究 总被引:23,自引:1,他引:23
本文采用MTT比色法测定了LAK和TIL细胞培养上清IL-2活性及LAK细胞介导对体外培养的白血病细胞株的杀伤活性。结果表明LAK细胞和TIL细胞培养上清有较高的IL-2活性,可用于支持培养IL-2依赖株的生长;LAK细胞对体外培养的白血病细胞株有明显的杀伤作用。其杀伤效应随效靶比例增加而增高;同时亦证明:活的白血病细胞数与MTT甲赞形成产物呈直线相关性,提示通过MTT法测定OD值能较好地反映活细 相似文献