白念珠菌果糖二磷酸醛缩酶重组蛋白的制备及鉴定

摘要：目的：制备有免疫原性的白念珠菌果糖二磷酸醛缩酶（fructosebisphosphate aldolase, Fba1)重组蛋白。 方法：以白念珠菌C1标准株基因组DNA为模板,用PCR法扩增Fba1 DNA序列,与克隆载体pMD18-T连接、测序,再与原核表达载体pET28a(+)连接,构建成重组表达质粒pET28a(+)/Fba1,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导重组融合蛋白表达,亲和层析柱纯化重组蛋白。用抗His标签的单克隆抗体鉴定融合蛋白,并用确诊为侵袭性白念珠菌病（ICAI）、且抗白念珠菌烯醇化酶抗体阳性的患者血清进行抗原性鉴定。 结果：Fba1 DNA序列与GenBank中的序列一致。在大肠埃希菌中获得白念珠菌Fab1重组蛋白的高效表达,表达产物以可溶性蛋白为主,最终蛋白质得率为7.6 mg/g湿菌。经免疫印迹鉴定,重组蛋白与抗His标签的单克隆抗体和确诊ICAI患者血清呈特异性反应,显示出良好的抗原反应性。 结论：成功制备了具有良好抗原反应性的重组蛋白,为建立特异性诊断ICAI的新方法打下基础。     

以学生为本开展毕业实习阶段的思想政治工作

医学生物技术专业学生的毕业实习，是其走向社会和上岗前的必经阶段，也是一个“预就业”的过程。将思想政治工作融入到毕业实习的整个过程中，可促进学生毕业实习和就业的成功。     

用重组抗原诊断侵袭性念珠菌病

侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)缺乏特异性临床症状和快速准确的诊断方法,迄今IC的诊断仍很困难。检测血清中的特异性念珠菌抗体有助于IC的诊断。但传统检测抗体的方法使用粗制真菌抗原,存在重复性差和交叉反应等问题。用分子克隆技术制备的重组抗原易于大量生产,且无翻译后修饰。将其应用于血清抗体检测,既消除了交叉反应,又易于方法的标准化,为IC早期诊断提供了新的诊断途径。     

临床阴道分泌物检测方法的比较

目的:探讨阴道炎五联检法与传统镜检法(湿片镜检)在白带常规检测中的应用比较。方法:采用748例妇科门诊患者的白带标本同时用阴道炎五联检法和传统显微镜镜检法进行检测。结果:五联检测法在乳酸杆菌、白细胞、BV及念珠菌的检出率方面均高于传统的检查方法,其中念珠菌的检出率26.20%明显高于传统检测方法的检出率19.65%,该差异有统计学意义(P0.01);而在滴虫的检出率方面则低于传统检查方法,差异无统计学意义(P0.05)结论:阴道炎五联检法可以较为准确的反映阴道炎病原菌,并且与传统的检验方法具有互补性,因此,联合检测是白带常规检测较为理想的方法。     

白念珠菌烯醇化酶N端肽段ENO1 319P的原核表达和鉴定

摘要：目的:制备白念珠菌烯醇化酶N端基因重组肽段ENO1-319P并检测其抗原性。 方法:选择与人烯醇化酶蛋白α-ENO同源性低的白念珠菌烯醇化酶肽段ENO1-319P,将其编码DNA序列克隆到表达载体pET28a(+),并在大肠埃希菌BL21(DE3)中用IPTG诱导带有His标签的重组肽段的表达。用SDS-PAGE电泳分析,TALON金属亲和层析柱纯化重组蛋白,其抗原性用侵袭性白念珠菌感染（ICAI）患者血清进行western blot评估。 结果:成功表达并纯化了目的肽段,该蛋白可与ICAI患者血清发生特异性反应。 结论:获得了白念珠菌烯醇化酶N端肽段ENO1-319P的基因表达工程菌株,为将此重组肽段用于制备特异性更高的抗体打下基础。     

环氧乙烷的遗传毒性研究Ⅶ.小鼠胎肝微核试验

我们曾进行了环氧乙烷（ＥｔＯ）对小鼠生殖细胞与体细胞致突变作用的研究，表明有明显的诱变性，为进一步阐明ＥｔＯ是否能通过胎盘形成危害，栖文用胎肝微核试验检测环氧乙烷对胎鼠的影响。实验结果表明：ＥｔＯ这个小分子孤水溶笥化合物能容易地通过胎盘屏障转移到胎鼠，造成胎肝因士细胞染色体损伤的效应，我们必须对ＥｔＯ潜在性遣传危害给予足够的重视。同时胎肝微核试验又是一种快速、简易的检测方法，值得推广应用。     

穴位埋磁对家兔精子质量的影响

在雄性家免足三里（双侧）及关元穴位埋磁片90d，检测其对家兔精子密度、精子活力、精子存活率的影响，结果显示，埋磁家免精子的各项指标都明显高于对照组，提示穴位埋磁有提高家免精子质量的作用。     

环氧乙烷的遗传毒性研究IV.小鼠骨髓细胞染色体畸变亚急性试验

以４组小鼠各１０只为一组，分别给予ＥｔＯ吸入剂量为５４，１８０，５４０ｍｇ／ｍ＾３２ｈｒ／ｄ连续５天。观察了ＥｔＯ对小鼠骨髓细胞染色体畸变的畸变率，发现总畸变率分别为０．５，１．２，３．２，７．０％，高浓度（５４０ｍｇ／ｍ＾３）中等浓度（１８０ｍｇ／ｍ＾３）二组与对照组比较有统计显著性差异；而低浓度（５４ｍｇ／ｍ＾３）组与对照组比较无显著差异。结果表明ＥｔＯ使小鼠骨髓细胞分裂中的染色体畸变，主要为     

在医学遗传学教学中培养学生的思维能力

在医学遗传学教学过程中采用设疑、质疑、释疑，对比式及练习性作业等方法，充分调动和发展学生的思维活动，加强互动．使教与学相长。     

环氧乙烷的遗传毒性研究 Ⅰ对果蝇伴性隐性致死(SLRL)试验

本文以黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)为材料,用吸入法检测了环氧乙烷(Ethylene Oxide简称EtO)对果蝇生殖细胞3个发育阶段(成熟精子,精细胞和精母细胞)的伴性隐性致死(SLRL)的诱变性。环氧乙烷以气体吸入的方式给果蝇染毒,剂量为900mg/m~3和1800mg/m~3,染毒时间为2h。结果:900mg/m~3和1800mg/m~3对果蝇SLRL总的诱变率pt％分别为1.89％和2.84％,在2种浓度的3个阶段中,均是成熟精子的诱变率最高;精细胞其次;精母细胞最低。总诱变率与自发突变率相比较,显示环氧乙烷对果蝇生殖细胞具有一定的诱变作用。