HLA-G、IL-10在急性白血病中的表达

HLA-G为非经典的HLA Ⅰ类分子,是一种重要的免疫抑制分子,主要在人类胎盘形成过程中侵入蜕膜和螺旋动脉的绒毛外细胞滋养层表达,依据结构及分布不同分为膜结合型HLA-G (mHLA-G)和可溶性HLA-G(sHLA-G).近来研究发现HLA-G在多种肿瘤细胞中表达,它参与调控肿瘤免疫逃逸[1],与肿瘤的大小、分化程度及肿瘤转移有密切关系.     

国产试剂在Immage特定蛋白分析仪上的应用评价

目的评价国产试剂在Immage特定蛋白分析仪上应用的可行性。方法对四川奥博公司生产的IgA、IgG、IgM、C3、C4试剂进行精密度评价、偏差评估以及与Beckman-Coulter原装配套试剂进行相关性分析。结果奥博试剂无论检测低值还是高值血清其结果的日间、批内、批间及总变异系数(CV)均<5%;与Beckman-Coulter原装配套试剂同时检测临床40份标本,两试剂所测结果基本一致,无显著性差异(P>0.05);相关系数(r)分别为:IgAr=0.96(P<0.01)、IgGr=0.98(P<0.01)、IgMr=0.85(P<0.01)、C3r=0.98(P<0.01)、C4r=0.98(P<0.01);相对偏差IgA为2.3%~3.42%、IgG为-10.97%~19.2%、IgM为-3.13%~8.0%、C3为14.5%~18.6%、C4为5.0%~6.3%。结论国产奥博IgA、IgG、IgM、C3、C4试剂与Beckman-Coulter试剂相比相关性好、偏差小、精密度较高,可以替代进口原装试剂。     

高效毛细管电泳法同时测定尿液清蛋白和肌酐

目的建立同时测定尿液清蛋白和肌酐的高效毛细管电泳法。方法对缓冲系统、pH值、缓冲液的离子强度、检测波长、表面活性剂、电压及电流和进样方法等进行研究,建立同时测定清蛋白和肌酐的毛细管电泳法。结果选择20mmol/L、pH9.3硼砂-NaOH(含6mmol/LSDS)缓冲液作为毛细管区带电泳运行液,利用外标法定量,检测波长214nm,同时测定肌酐和清蛋白。非涂层毛细管有效长度47.5cm,内径75μm;电流79μA,压力进样1psi、4s,电泳时间为12min。肌酐和清蛋白的线性范围分别为4.32～8840μmol/L和1.95～1000mg/L,肌酐和清蛋白最低检出限分别为0.977μmol/L和0.285mg/L。本法的日内和日间变异系数均小于4.8%。肌酐和清蛋白的平均回收率分别为99.6%和102.4%。结论建立的方法线性范围宽,测定简单快速,可用于临床检测。     

毛细管胶束电动色谱法检测尿液肌酸和肌酐含量

目的 建立高效毛细管电泳技术（HPCE）测定尿液中肌酸（Cri）和肌酐（Cr）的方法。 方法 运用毛细管胶束电动色谱技术（MEKC）,以pH 5.5、20 mmol/L的Na₂HPO₄-H₃PO₄（含100 mmol/L SDS）作为电泳缓冲液,非涂层石英毛细管进行分离,样品经过20倍稀释后以1 psi压力进样4 s,15 kV电压下分离尿液中的Cri和Cr,二极管阵列检测器（DAD）（λ=200 nm）检测。 结果 Cri和Cr的线性范围为4.9~2 500 μmol/L和4.9~2 500 μmol/L（r值分别为0.999 8和1）; Cri回收率为97.8%~100.8%、平均99.2%,Cr回收率为99.5%~104%、平均101.8%;Cri迁移时间批内和批间差异（CV）平均值为3.2%和8.0%、Cr为2.3%和6.8%;Cri和Cr的最低检出限分别为1.4 μmol/L和3.31 μmol/L。 结论 本法标本用量小、干扰因素少、精密度和准确度高、线性范围宽、测定成本低廉,可满足临床常规检测要求。     

急性脑梗死患者治疗前后血浆HCY、vWF和血清P-选择素水平检测的临床意义

目的：探讨急性脑梗死患者治疗前后血浆HCY、vWF和血清P-选择素水平的变化及临床意义。方法：应用ELISA法对32例急性脑梗死患者进行血浆HCY、vWF和血清P-选择素水平检测,并与35例正常人进行比较。结果：患者组治疗前血浆HCY、vWF和血清P-选择素水平均显著高于正常人组（P〈0.01）,经溶栓等措施治疗1个月后与正常人比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：检测急性脑梗死患者治疗前后血浆HCY、vWF和血清P-选择素水平的变化对了解病情及观察疗效均具有重要的临床价值。     

尿蛋白SDS-琼脂糖凝胶电泳方法建立及临床应用

目的　建立应用于临床的尿蛋白十二烷基硫酸钠 (SDS) 琼脂糖凝胶 (AGE)电泳方法。方法　分别对Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型 4种琼脂糖、不同的缓冲对、电压和电泳时间进行实验 ,确定最佳的分离条件 ,建立测定方法。结果　当Ⅳ型琼脂糖凝胶浓度为4 0g/L ,SDS含量为 1g/L ,在pH 7.0的AMP 咪唑 HCl缓冲体系下进行电泳 ,可以有效地将尿蛋白按分子量大小进行分离。 5 7份临床尿蛋白阳性标本电泳结果表明 ,生理性蛋白尿 2 4例 ,中、高分子蛋白尿 5例 ,小分子蛋白尿 11例和混合型蛋白尿 17例。结论　本法具有分离效果好、操作简便、灵敏度高、成本低廉等优点 ,可以将尿蛋白按分子量大小分为小分子、中分子以及混合型 ,对肾脏疾病的受损部位和损伤程度的判断具有较高的价值 ,适于基层实验室的常规开展。     

尿β痕迹蛋白检测在2型糖尿病肾损伤诊断中的应用

目的探讨尿β痕迹蛋白（beta-trace protein,βTP）检测在2型糖尿病（T2DM）肾损伤中的诊断价值。方法临床确诊T2DM 174例,按照尿白蛋白（Alb）与肌酐（Cr）比值（Alb／Cr）将其分为糖尿病无肾损伤组（A组）和糖尿病肾损伤组（B组）,另设健康对照组（C组）70名。采用胶乳增强散射免疫比浊法原理检测尿液BTP、α1微球蛋白（α1 microglobulin,α1MG）,免疫比浊法测定尿Alb,碱性苦味酸法测定Cr,测定结果以与Cr比值表示。比较各组尿βTP水平,并行ROC曲线分析,同时对尿βTP与α1 MG及其他指标作相关分析。结果B组尿βTP／Cr中位数为9．1mg／gCr,显著高于A组的3．1mg／gCr和C组的2．0mg／gCr,差异有统计学意义（H=45．5,P〈0．01）。B组其他指标Alb／Cr、α1MG／Cr、血Cr（SCr）结果均高于A、C组（H值分别为110．9、38．3、11．4,P值均〈0．01）。相关分析结果表明,尿βTP／Cr与尿α1MG/Cr与显著正相关,相关系数为r=0．894（P〈0．01）,与SCr、糖化血红蛋白A1（HbA1C）、收缩压、病程呈正相关,r分别为0．367（P〈0．05）、0．242（P〈0．05）、0．162（P〈0．05）、0．251（P〈0．05）;与舒张压、空腹血糖（FBG）、体重指数（BMI）无相关性。ROC曲线分析结果表明,尿βTP／Cr与α1MG／Cr曲线下面积分别为0．86（95％C10．78～0．93）、0．76（95％C10．67～0．85）。尿βTP／Cr最佳判断水平为4．1mg／gCr,诊断敏感性为68．5％,特异性为89．8％;尿α1MG／Cr最佳判断水平为10．9mg／gCr,诊断敏感性为59．7％,特异性为80．3％,两者差异有统计学意义（P〈0．05）。结论尿βTP对T2DM肾损伤有诊断价值,可敏感地反映肾小管功能损伤,诊断价值优于尿α1MG,可作为评价肾小管损伤的一个新的生物标志物。     

原发性胆汁性肝硬化患者血清细胞因子表达及意义

目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者血清中16种相关炎性因子表达及其临床意义。方法以50例PBC患者和40名健康对照者作为研究对象,应用Luminex液态芯片系统检测16种炎性因子血清表达情况。分析表达存在明显差异细胞因子与PBC临床及实验室参数相关性。指标相关性采用Spearman相关性检验,数值资料比较采用t检验。结果与健康对照组相比,PBC组血清中IL-6、IL-8、IL-17A、IFN-γ和TNF-α表达显著升高,差异有统计学意义[(5.8±1.3)pg/ml,(69.7±22.1)pg/ml;(328.5±154.5)pg/ml,(874.5±678.5)pg/ml;(21.3±8.5)pg/ml,(68.5±32.5)pg/ml;(25.6±10.5)pg/ml,(104.5±46.8)pg/ml;(125.5±69.5)pg/ml,(408.5±185.6)pg/ml;P均<0.01]。IL-6、IL-17A、IFN-γ和TNF-α血清表达与PBC Mayo风险评分呈正相关,相关系数r分别为0.598、0.618、0.519和0.614,P均<0.05。IL-17A、IFN-γ和TNF-α血清表达与ALT、ALP及CRP水平呈正相关,相关系数r分别为:0.632、0.521、0.493;0.614、0.603、0.532;0.727、0.814、0.659;P均<0.05。结论 PBC患者血清炎性因子IL-6、IL-17A、IFN-γ和TNF-α表达显著升高,且与疾病活动指数呈相关。     

M2亚型巨噬细胞对胃癌细胞迁移及上皮-间质转化的影响

目的 探讨M2亚型巨噬细胞对胃癌细胞迁移及上皮-间质转化(EMT)的影响.方法 磁性活化细胞分选法(MACS法)分离获得临床胃癌患者肿瘤组织与外周血来源巨噬细胞.采用流式细胞和RT-qPCR分析并评价胃癌微环境中浸润的肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的亚型.Transwell小室迁移实验检测胃癌组织来源巨噬细胞(GC-TAMs)对肿瘤细胞迁移能力的影响.Western blot和RT-qPCR评价GC-TAMs对肿瘤细胞EMT的调节作用.结果 GC-TAMs中CD204+细胞的比例明显高于癌旁组织;GC-TAMs中CD163、CD204、CD206、IL-10和CCL-22等M2亚型相关基因的转录水平明显高于癌旁组织,而M1亚型相关基因IL-23(p19)的转录水平则明显降低.胃癌患者外周血来源巨噬细胞的表面标记蛋白及亚型相关基因表达情况与GC-TAMs相似.体外共培养实验显示,M2亚型GC-TAMs对肿瘤细胞的迁移能力具有明显促进作用,镜下可见胃癌细胞形态发生明显间质细胞样改变,且细胞中EMT相关基因和蛋白fibronectin、vimentin和snail2的表达明显上调.结论 胃癌微环境中浸润TAMs以M2亚型为主,且可通过诱导肿瘤细胞发生EMT而对其迁移能力发挥促进作用.