毒黄素对非小细胞肺癌A549细胞株作用的实验研究

目的 研究毒黄素不同浓度和不同作用时间对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法 分别取0.5、0.375、0.25和0.125 μmol／L毒黄素作用于A549细胞（实验组）,以不加毒黄素为对照组,分别培养24 h和48 h。采用CCK-8试剂盒、Annexin V-FITC／PI凋亡试剂盒检测A549细胞增殖抑制率和凋亡率。划痕实验对比0.125 μmol／L毒黄素组和对照组（0 μmol／L毒黄素）在12、24和48 h细胞迁移率。结果 0.5、0.375、0.25和0.125 μmol/L毒黄素组24 h细胞增殖抑制率分别为（93.51±3.69）％、（40.38±3.08）％、（23.54±2.58）％和（13.07±2.37）％,48 h为（90.53±3.58）％、（53.72±3.02）％、（34.44±3.10）％和（24.78±2.43）％。0.5、0.375、0.25和0.125 μmol/L毒黄素组24 h细胞凋亡率分别为（78.68±2.22）％、（43.66±2.53）％、（20.81±2.59）％和（6.25±0.96）％,高于对照组的（1.57±0.52）％;0.5、0.375、0.25和0.125 μmol/L毒黄素组48 h细胞凋亡率分别为（88.66±3.16）％、（59.86±2.81）％、（27.89±3.48）％和（9.91±1.33）％,高于对照组的（1.59±0.55）％。0.125 μmol／L毒黄素组12、24和48 h细胞迁移率分别为7％、11％和16％,低于对照组相应的14％、26％和39％。结论 毒黄素对A549细胞有明显增殖抑制和促凋亡作用,并呈时间和剂量依赖性,且可抑制A549细胞迁移活性。     

sIL-33联合CEA、CA19-9检测对结直肠癌的诊断价值

目的研究结直肠癌(CRC)患者血清白介素-33(s IL-33)水平,评价其对CRC诊断的临床意义。方法收集121例CRC患者的术前血清标本与临床病理资料,以81例体检健康者、33例肠息肉患者作为对照。用ELISA法检测s IL-33含量,分析其与临床病理参数的关系,并采用ROC曲线、Logistic回归分析比较s IL-33、CEA和CA19-9单独检测或3者联合检测的诊断价值。结果 CRC患者s IL-33含量[172.44(108.08,321.57)pg/m L]显著高于肠息肉组[67.31(37.72,130.44)pg/m L]和体检健康组[71.73(36.80,85.53)pg/m L],差异有统计学意义(P均0.01)。s IL-33与CRC的分化程度、肿瘤部位有关,差异有统计学意义(P均0.01)。s IL-33、癌胚抗原(CEA)和糖链抗原19-9(CA19-9)3者联合检测的敏感性(80.99%)、准确率(86.38%)和曲线下面积AUCROC(0.933 4)均比单独检测高,其特异性(92.11%)也处于较高水平,具有较好的诊断价值。结论s IL-33、CEA和CA19-9 3者联合检测对CRC诊断具有较好的临床应用价值,可作为潜在的血清学标志物。     

Foxp3在卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨叉状头-翅膀状螺旋转录因子p3（Forkhead box protein 3,Foxp3）在卵巢癌组织中的表达及其与预后的关系。方法 采用免疫组化染色法检测卵巢癌组织芯片中45例癌组织及7例正常卵巢组织的Foxp3表达。应用秩和检验比较不同病理类型卵巢癌Foxp3表达的差异;卡方检验分析Foxp3表达与临床病理参数的关系;Kaplan-Meier法分析Foxp3表达与卵巢癌预后关系;Cox比例风险回归模型评价影响患者预后的因素。结果 Foxp3阳性着色主要定位于细胞核。Foxp3表达与FIGO分期有关（P＜0.05）,与年龄、病理类型、分化程度、肿瘤长径、淋巴结转移等均无关（P＞0.05）。Kaplan-Meier法生存分析显示Foxp3低表达者（H-score≤90）中位生存时间（OS）为6183个月,显著高于高表达者（H-score＞90）的25.03个月（P＜0.05）。Cox比例风险模型显示,术后未化疗（HR=6.603,95％CI： 1.147～32.057）、FIGO分期较高（HR=3.861,95％CI： 1.427～10.417） 为预测卵巢癌不良预后的独立因素。结论 卵巢癌组织中Foxp3表达与FIGO分期相关,并可以作为卵巢癌预后判断的参考指标。     

sCTLA-4与CD4+CD25+调节性T细胞的相关性及其与肿瘤的关系

调节性T细胞（Treg）在保持免疫反应平衡、调节免疫反应中有重要作用。转录因子Foxp3被认为是Treg细胞的标志性分子。在恶性肿瘤中，Treg被认为参与了宿主免疫系统的肿瘤免疫逃避，与不同肿瘤患者较差的生存结局有关。细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）表达于激活的T细胞，在T细胞免疫反应中起负向调控作用。CTLA-4还能以溶解形式（sCTLA-4）存在于机体循环中，调节免疫环境稳定。CTLA-4和Treg功能上的重叠共同影响了免疫调节过程，其相互作用尚有待研究。     

机器人消化内镜系统的研制及机械模型与活体动物实验研究（含视频）

目的　研制机器人消化内镜系统（robotic digestive endoscope system，RDES），验证其可行性、安全性及操控性能。方法　基于主从控制系统设计RDES，包含3部分：整合内镜主体包括内镜和与之整合的内镜旋钮/按钮控制系统；机械臂系统包括基座、机械臂及连接在其上的内镜进退操控装置（有力反馈）和内镜轴向旋转操控装置；操控台包括内镜控制主手和图像显示器。操作者坐在远离检查台的操控台前，操控主手实现内镜头端弯曲、镜身进退及旋转，并通过主手上的按钮实现送气、送水、吸引、定图以及运动比切换功能。（1）活体猪胃镜检查实验：初学组、高级组医师各5名，每人分别操控RDES及普通内镜（间隔2周）行活体猪胃镜检查6次，比较检查时间。（2）仿真胃模型内壁画圆实验：初学组、高级组医师各5名，每人分别操控RDES 1∶1、RDES 5∶1模式和普通内镜完成画圆实验各6次，比较3种方式完成时间、准确度（即轨迹偏差）和工作量。结果　RDES运行良好，力反馈良好。活体猪胃镜检查实验中，胃镜检查均顺利完成，无黏膜损伤及出血、穿孔。初学组和高级组医师操控RDES的检查时间均随操控例次增加呈下降趋势，但操控RDES的下降值大于操控普通内镜（初学组P=0.033；高级组P=0.023）。仿真胃模型内壁画圆实验中，初学组医师操控RDES 1∶1、5∶1模式完成内镜下画圆时间均短于普通内镜［1.68（1.40，2.17）min、1.73（1.47，2.37）min比4.13（2.27，5.16）min，H=32.506，P<0.001］，轨迹偏差均优于普通内镜［（0.50±0.11）mm、（0.46±0.11）mm比（0.82±0.26）mm，F=38.999，P<0.001］，工作量均小于普通内镜［42.00（30.00，50.33）分、43.33（35.33，54.00）分比52.67（48.67，63.33）分，H=20.056，P<0.001］；高级组医师操控RDES 1∶1、5∶1模式完成时间均长于普通内镜［1.72（1.37，2.53）min、1.57（1.25，2.58）min比1.15（0.86，1.58）min，H=13.233，P=0.001］，但轨迹偏差［0.47（0.13，0.57）mm、0.44（0.39，0.58）mm比0.52（0.42，0.59）mm，H=3.202，P=0.202］、工作量［（44.62±21.77）分、（41.24±12.57）分比（44.71±17.92）分，F=0.369，P=0.693］和普通内镜差异无统计学意义。结论　RDES可实现远台操控，大大降低了工作强度；RDES可同时调控大小旋钮，使操控更灵活；RDES增加了运动比模式，使操控更精细；RDES易于初学者掌握，有望缩短医师培养周期；RDES为实现内镜远程操控和全自动消化内镜提供了可能。     

肺腺癌组织SIRT1表达及其临床意义

目的 沉默信息调节因子1 (silent mating-type information regulation 2 homolog 1,SIRT1)与多种肿瘤的发生发展密切相关,但与肺腺癌的关系尚未明确.因此本研究将重点探讨肺腺癌组织中SIRT1的表达水平与临床病理参数和预后的关系,阐明其在肺腺癌发生发展中的作用.方法 肺腺癌芯片购自上海芯超生物科技有限公司,包括75例癌组织和配对癌旁正常组织(距切缘≥2 cm).采用免疫组织化学染色法,检测肺腺癌组织芯片中75例癌组织及配对癌旁正常组织中SIRT1的表达.x2检验分析SIRT1表达与临床病理特征的关系;Kaplan-Meier法及Log-rank检验分析临床病理参数和SIRT1表达与总生存期(overall survival,OS)的关系;拟合多因素Cox模型,采用风险比(hazard ratio,HR)评价不同临床指标与死亡风险的相关性.结果 肺腺癌组织中SIRT1的表达高于癌旁正常组织,H-score评分均值分别为260和113,P＜0.001;肺腺癌组织中SIRT1的表达水平与患者的性别(P=0.232)、年龄(P=0.318)、淋巴结转移(P=0.377)、肺腺癌亚型(P=0.245)、远处转移(P=1.000)和TNM分期(P=0.216)无显著相关性,而与病理分级显著相关,P=0.029.SIRT1高表达组肺腺癌患者的死亡风险较低表达组显著增加,单因素显示,HR=3.991,95％CI为1.411～11.288,P=0.009;多因素回归分析显示,HR=4.388,95％CI为1.192～16.155,P=0.026.结论 肺腺癌组织SIRT1表达与病理分级显著相关,且SIRT1高表达提示肺腺癌预后较差.     

sCTLA-4联合CEA、CA19-9检测对结直肠癌的诊断价值

目的探讨血清可溶性细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(s CTLA-4)水平与结直肠癌(CRC)患者的临床病理的特征关系,评价其对CRC的诊断价值。方法收集111例CRC患者的术前血清及临床病理资料,以37例体检健康者作为健康对照组。ELISA法检测血清中s CTLA-4含量,分析其与临床病理特征的关系,并用受试者工作特征曲线(ROC)和二元Logistic回归比较s CTLA-4、CEA和CA19-9对CRC的诊断价值。结果 CRC患者血清中s CTLA-4含量显著高于健康对照组(t=9.37,P0.01);溃疡型腺癌s CTLA-4水平明显高于隆起型腺癌(t=2.40,P0.05);CEA单独检测特异性最高(97%),而s CTLA-4、CEA、CA19-9联合检测的准确性最高(91%)。结论血清s CTLA-4、CEA和CA19-9 3者联合检测在CRC诊断中具有较好的临床应用价值,可作为潜在的CRC辅助诊断方法。