子宫内膜异位症和子宫腺肌病在位、异位内膜间质细胞原代培养与形态学观察

目的:探讨子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)和子宫腺肌病(adenomyosis,AM)在位、异位子宫内膜间质细胞(ESC)的原代培养方法,并比较EMT及AM在位、异位ESC与正常对照ESC形态的差异。方法:采用胶原酶酶解、分段消化,单次筛网分离,贴壁法分离子宫内膜细胞,采用免疫细胞化学法进行细胞鉴定,光镜下观察细胞形态差异。结果:原代培养正常对照ESC和EMT在位、异位ESC及AM在位、异位ESC各15例,分离、培养成功率分别可达93.3%、93.3%、80.0%、93.3%、86.7%。得到的细胞数量较多,纯度较高,经鉴定ESC纯度可达95%以上。EMT、AM在位、异位ESC与正常在位ESC大小不一,与在位及正常ESC细胞相比异位ESC细胞核较大,细胞膜表面有很多胞浆突起,边界不清。结论:采用胶原酶酶解、分段消化,单次筛网分离,贴壁法分离可以获得数量较多、纯度较高的EMT和AM在位、异位ESC。EMT、AM异位ESC与正常妇女及EMT、AM在位ESC的形态差异可能与EMT、AM具有恶性肿瘤样的侵袭特征有关。     

生长分化因子15用于心力衰竭标志物的意义及应用前景

心力衰竭是由于任何原因的初始心肌损伤（如心肌梗死、血流动力学负荷过重、炎症等）引起心肌结构和功能的变化,最后导致心室泵血和（或）充盈功能低下。生长分化因子15（grow differentiation factor-15,GDF-15）是转化生长因子-β（TGF-β）超家族的一员,同时也是心衰领域中新的标志物。近年来的研究显示,在心衰发展过程中,血清 GDF-15水平与美国纽约心脏病学会（NYHA）心功能分级相关,其水平随着心衰患者心功能分级加重而递增［1］。另有研究表明,血清 GDF-15水平与急性心肌梗死后心室重构［2］、收缩或舒张性心衰［3-4］、心衰的预后［5］等有关。     

血红蛋白变异体对糖化血红蛋白测定方法的干扰

目前,大部分糖化血红蛋白的检测系统可排除常见的血红蛋白变异体杂合子的干扰,或给出警告提示信息,而一些较为罕见的血红蛋白变异体引起的干扰常被临床医生和患者忽视。因此对于血红蛋白变异体普遍存在的地区,应谨慎选择HbA1c的检测系统,对于变异体携带者可选择合适的替代指标用于评估血糖水平。1血红蛋白和糖化血红蛋白血红蛋白是由珠蛋白和血红素构成的一种结合蛋白质,相     

B淋巴细胞CD19和CD20在孤独症谱系障碍诊断中的应用价值

目的探讨B淋巴细胞CD19和CD20在孤独症谱系障碍(又称为自闭症)诊断中的应用价值。方法选取2010年1月至2012年5月中山大学孙逸仙纪念医院儿童神经专科确诊的自闭症患儿35例和幼儿园入学前健康体检儿童35例分别作为自闭症组和对照组,采用流式细胞仪检测分析两组CD19、CD20水平变化,并采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析其对自闭症的诊断价值。结果自闭症组CD19、CD20水平均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。ROC曲线分析结果显示:CD19最佳临界值为16.55%时,曲线下面积、灵敏度和特异度分别为81.70%、88.90%和74.30%;CD20最佳临界值为14.35%时,曲线下面积、敏感度和特异度分别为68.90%、88.90%和48.60%。结论 B淋巴细胞CD19和CD20可以作为孤独症谱系障碍的辅助诊断指标。     

不同方法检测缺铁性贫血患者糖化血红蛋白A1c的一致性

目的观察不同方法检测缺铁性贫血(IDA)患者糖化血红蛋白A1c(HbA1c)的一致性。方法参照美国国家糖化血红蛋白标准化计划(NGSP)认证Ⅰ级实验室要求,以通过NGSPⅠ级实验室认证的VariantⅡ检测系统为参考系统,以分别代表离子交换高效液相色谱法(IE-HPLC)、酶法、免疫比浊法和亲和层析高效液相色谱法(AC-HPLC)的VariantⅡTurbo、Modular P、Leadman、Primus Ultra2检测系统为实验系统,用20份健康体检者和20例糖尿病(DM)患者的HbA1c浓度范围为4.2%~14.6%的样品进行比对;再以通过比对的4个检测系统和VariantⅡ检测系统检测20例IDA患者和20例IDA合并DM患者样品并对检测系统间的数据进行直线回归分析。结果 5个检测系统检测20例IDA患者和20例IDA合并DM患者样品,直线回归分析斜率范围为0.973 0~1.023 1,r2范围为0.995 5~0.998 1,偏差的95%CI的最大范围为-0.48%~0.48%、百分偏差的最大范围为-5.62%~5.95%。结论 IDA患者HbA1c水平用不同检测方法可获得一致的检测结果。     

腹腔镜卵巢子宫内膜异位囊肿保守性手术后复发的相关因素分析

目的：分析卵巢子宫内膜异位囊肿(卵巢巧克力囊肿)行腹腔镜保守性手术后复发的相关因素。 方法：收集郑州大学第三附属医院310例因子宫内膜异位症行腹腔镜保守性手术患者的临床资料，进行回顾性队列研究，分析患者年龄、症状和体征、既往史、妇科检查情况、术前孕产次、合并症、术中美国生殖医学学会(American Society for Reproductive Medicine，ASRM)评分及分期、术后辅助药物治疗、术后孕产次等25项指标，通过logistic回归分析复发的相关因素。结果：经单变量分析，危险性相关因素为既往内异症手术史、既往宫腔操作史、后穹窿触痛结节、双侧盆腔病变、多房样囊肿、术中ASRM评分、合并子宫腺肌病及手术时间(P<0.05)；保护性相关因素为术后孕次、术后辅助药物治疗、术前孕次及年龄(P<0.05)。多变量logistic回归分析显示危险性相关因素为既往内异症手术史、既往宫腔操作史、后穹窿触痛结节、双侧盆腔病变、多房样囊肿及术中ASRM评分高(P<0.05)；保护性相关因素为术后孕次、术后辅助药物治疗、术前孕次及年龄(P<0.01)。 结论：既往内异症手术史、既往宫腔操作史、后穹窿触痛结节、双侧盆腔病变、多房样囊肿及术中ASRM评分高为卵巢巧克力囊肿术后复发的危险性因素；而术前术后孕次、术后辅助药物治疗及年龄则为卵巢巧克力囊肿术后复发的保护性因素。     

miRNA let-7a靶向抑制ACVR1B表达

目的：探讨miRNA let-7a对ACVR1B表达的影响。方法：生物信息学分析表明activin receptor type 1B（ACVR1B）是一个let-7a的潜在靶基因。构建ACVR1B 3’UTR野生型（ACVR1B 3’UTR-WT）和ACVR1B 3’UTR突变型（ACVR1B 3’UTR-MUT）双荧光素酶报告载体,分别与let-7a模拟物（let-7a mimic）或let-7a阴性对照（let-7a NC）共同转染HEK293T细胞,通过双荧光素酶报告系统检测各组细胞的荧光素酶活性。分别转染let-7a mimic、let-7a inhibitor和let-7a NC至HEK293T细胞,采用qRT-PCR和Western blot分别检测ACVR1B的mRNA和蛋白表达水平。结果：ACVR1B 3’UTR含有let-7a潜在的高度保守的结合靶点（77～83位点）。在HEK293T细胞中共转染ACVR1B 3’UTR-WT报告载体的let-7a mimic组比let-7a NC组荧光素酶活性组明显降低（P＜0.05）;而共转染ACVR1B 3’UTR-MUT报告载体的let-7a mimic与let-7a NC组其荧光素酶活性差异无统计学意义（P＞0.05）。在HEK293T细胞中let-7a mimic转染组中ACVR1B的mRNA和蛋白水平均低于let-7a NC组和let-7a inhibitor组（P＜0.05）。结论：ACVR1B是let-7a潜在调控的靶基因,miRNA let-7a可以直接抑制HEK293T细胞中ACVR1B基因的表达。     

手术室内护理对合并糖尿病患者术后切口感染的防治价值

目的探讨手术室内护理对合并糖尿病患者术后切口感染的防治价值。方法选取2010年2月—2014年2月来该院接受手术治疗的合并糖尿病患者120例,将他们随机分为两组,分别命名为观察组和对照组,每组患者60例,对照组给予常规护理方法护理,观察组采用在常规护理的基础上加强手术室内护理的护理方法,观察两组患者在术后切口感染的对比情况。结果观察组患者的术后切口感染率为1.67%,对照组患者的术后切口感染率为21.67%,（P〈0.05）具有统计学意义,观察组患者的切口感染率明显低于对照组。结论加强手术室护理可以有效降低合并糖尿病患者切口感染率,提高医疗服务水平和服务质量,适于在临床上推广和普及。     

外科延迟术对跨区皮瓣多血管体间微循环重构的影响

目的建立小鼠背部单穿支和多穿支跨区皮瓣模型,探讨3种延迟术对皮瓣微循环重构的影响,术后中央choke区内皮型一氧化氮合酶(e-NOS)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的变化以及该区域血流对其形态学的影响。方法 Balb/c小鼠100只,随机分为对照组(10只)及实验A、B、C组(每组30只)。A组结扎右胸背穿支;B组结扎2条右侧穿支;C组仅保留左胸背穿支。各实验组分别于术前、术后6h、1d、3d、5d、7d用激光多普勒血流仪连续监测choke区,观察血管形态学变化,并取材进行HE染色,对目的蛋白的表达进行检测(Western blotting)及定位(免疫组织化学染色)。结果与术前相比,术后各组choke区血流增加明显,差异且有统计学意义(P0.01);此区血管曲度也明显增加,管径增粗,管壁增厚,蛋白含量增加,目的蛋白主要定位于血管内及其外周。结论术后各组choke区呈现不同的血流动力学与血管形态学变化特点,即微循环重构;以保留单穿支的延迟方式对跨区皮瓣choke区微循环重构影响最大;e-NOS、MMP-2参与了血管新生过程。     

糖化血红蛋白不同测定方法的可比性研究

目的对离子交换高效液相色谱法(IE-HPLC)、硼酸盐亲和层析高效液相色谱法(AC-HPLC)和高效毛细管电泳法(HPCE)测定糖化血红蛋白(HbA1c)进行比对分析和偏倚评估,实现不同方法检测结果的可比性。方法以IE-HPLC法为参比方法(该法已通过美国NGSPⅠ级实验室认证),HPCE法和AC-HPLC法为实验方法,依据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP9-A3文件进行方法学比对和偏倚评估,比对前进行参比方法正确度验证和实验方法精密度验证;对不可比的实验方法用经NGSP样本赋值传递的新鲜全血实施校准,校准后进行可比性的验证。结果参比方法对10个定值NGSP样本进行检测,检测结果全部在靶值的±6%内。两个实验方法的批内CV均1.5%,批间CV均2.0%。HPCE法在医学决定水平处与参比方法的偏倚分别为-0.06%和-0.07%,小于1/2 CAP TEa,与参比方法具有可比性;AC-HPLC法分别为-0.31%和-0.31%,均大于1/2 CAP TEa,与参比方法不可比;用经NGSP样本赋值传递的两个浓度新鲜全血校准AC-HPLC法,校准后的偏倚分别为0.08%和0.09%,均小于1/2 CAP TEa,与参比方法具有可比性。结论不同方法对HbA1c的测定结果可能存在差异,CLSI EP9-A3是评估这些差异的有效工具,用经NGSP样本赋值传递的新鲜全血对不可比的方法实施校准,可实现检验结果的可比性。