35例小儿染色体病分析

本文对35例经细胞遗传学诊断为染色体病的患儿资料进行分析：染色体病儿以21三体综合征发病率最高(82．9％)．余染色体病为散发。对其中33例惠儿家系调查发现惠儿异常染色体可源自携带者父母的遗传．也可源自父母生殖细胞染色体或受精卵染色体的突变。突变原因主要与父母高龄、避孕药物、有毒化学物质的接触、大量烟酒嗜好等有关。对25例(除外高龄孕母)21三体综合征母孕期情况分析，推测配子减数分裂如为母源性染色体不分离，其发生以第一次减数分裂(M1期)为主。     

小鼠原始生殖细胞分离培养方式和生物特性研究

目的：探索一种简单高效的分离、培养小鼠原始生殖细胞（PGCs）的方法,为小鼠模型提供充足的PGCs来源。方法体外分离小鼠12.5 dpc胚胎生殖嵴,剪碎后用含血清、胰岛素-转铁蛋白-硒添加剂、卵泡刺激素、重组表皮生长因子的α-M EM培养基进行组织块贴壁培养;于倒置显微镜下观察细胞形态,采用流式细胞术检测阶段性特异性胚胎抗原,采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）、细胞免疫荧光等方法检测干细胞的多能性基因Oct4及减数分裂Ⅰ期的几个特异性基因的表达。结果体外分离培养的小鼠 PGCs具有良好的细胞形态、极强的增殖能力,SSEA-1表达阳性,SSEA-4表达阴性,同时检测到Oct4、Stra8、Vasa、SCP3、ZP3表达均为阳性。结论利用该实验方法能培养出高纯度、具有良好干性及极强增殖能力的小鼠PGCs ,并使该细胞进入减数分裂。     

孕期如何补充各种营养素?

Q1: 怀孕了再开始补充营养来得及吗? A1: 很多年轻的夫妻都是在没有准备的情况下得知小生命的到来,因此很多在孕前就要注意的问题根本没有来得及准备.像现在大家都知道的,在怀孕前3个月女性应该每天补充0.4mg叶酸,因为叶酸对胎儿的神经管发育非常重要,能减少新生儿神经管畸形风险.准妈妈还要注意补充蛋白质、矿物质、维生素、微量元素等营养元素,以保证生殖细胞的发育,为胎儿的到来做好充分准备.以上这些营养元素的补充,最好从怀孕之前3个月开始准备.     

甲基汞对雄性小鼠生殖细胞的毒性作用

目的：研究甲基汞（MeHg）对雄性小鼠生殖细胞氧化损伤、细胞周期、细胞凋亡及其凋亡相关蛋白表达的影响。方法：应用MTT法检测MeHg对雄性小鼠生殖细胞的毒性;采用TBA比色法、OPA荧光法和KI比色法分别检测睾丸生殖细胞中脂质过氧化产物MDA、H₂O₂的含量和GSH-Px酶活性;采用AO/EB染色法和流式细胞术2种方法检测细胞凋亡;采用流式细胞术检测MeHg对细胞周期的影响;应用免疫组织化学方法检测与线粒体途径细胞凋亡相关Caspase-9和CytC蛋白表达。结果：体外给予0.1、1.0、10.0和100.0 μmol•L^-1 的MeHg,随着甲基汞染毒剂量的增加,细胞存活率逐渐降低,作用2、4、8、24和48 h时,1.0、10.0和100.0 μmol•L^-1各剂量组与对照组比较差异有显著性（P<0.05）。体内给予1/100、1/50和1/10 LD₅₀的MeHg,随着甲基汞染毒剂量的增加,睾丸组织中MDA和H₂O₂含量有所增加,各剂量染毒组MDA含量与对照组比较差异具有显著性（P<0.05）。H₂O₂含量随着甲基汞染毒剂量的增加,1/50 LD₅₀、1/10 LD₅₀组与对照组比较差异有显著性（P<0.01）。GSH-Px酶活性随着甲基汞染毒剂量的增加有所降低,各剂量染毒组与对照组比较差异均具有显著性（P<0.05）。随着染毒剂量的增大,凋亡率先增加,1/50 LD₅₀达到最大,1/10 LD₅₀组逐渐降低,1/10 LD₅₀组与对照组比较差异具有显著性（P<0.05）。采用流式细胞术检测,G₂/M期细胞百分数增加,1/50 LD₅₀染毒组时与对照组比较差异具有显著性（P<0.05）。Caspase-9与CytC阳性表达为棕黄色染色。分析结果表明,MeHg各剂量染毒组CytC表达先增加,随着染毒剂量的增加而逐渐降低,CytC表达各剂量染毒组与对照组比较差异具有显著性(P<0.01),Caspase-9 的表达在1/50 LD₅₀组达到最高,1/50和1/10 LD₅₀ 组与对照组比较差异具有显著性(P<0.01)。结论：甲基汞可以引起生殖细胞氧化损伤,影响细胞周期进程,使细胞有丝分裂延迟,并可能诱导细胞凋亡和凋亡相关蛋白的改变,对雄性生殖细胞具有细胞毒性作用。     

干细胞向雌性生殖细胞分化的研究进展

干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的细胞。根据其来源不同,干细胞可分为胚胎干细胞、成体干细胞以及诱导性多能干细胞。生殖细胞系负责跨代传递遗传和表观遗传信息,以确保新的正常个体产生。人类辅助生殖技术(ART)虽可解决部分难治性不孕不育患者的生育问题,但尚不能解决由于卵巢早衰生殖细胞缺乏导致的不孕,如果在体外可以将干细胞定向诱导分化为生殖细胞,则可能通过ART帮助卵巢早衰患者获得健康后代。雌性配子发育经历了多个严格、复杂的过程,包括原始生殖细胞(PGC)特化、增殖、迁移到生殖嵴并最终分化为成熟的卵母细胞。然而具体过程尚不明确。近年来学者已建立了干细胞向雌性生殖细胞分化的体外模型,并取得了长足进步。     

人羊膜上皮细胞向卵泡样结构转分化的实验研究

目的研究人羊膜上皮细胞（human amniotic epithelial cells ,hAECs）在人卵泡液的长时间刺激下能否转分化为卵泡样结构。方法在前期实验结果基础上,体外分离培养hAECs,5%人卵泡液为诱导条件,延长诱导时间至44 d,倒置显微镜观察细胞形态学改变,化学发光免疫技术检测培养基上清液中雌激素（estradiol,E ₂ ）水平的变化,实时荧光定量-聚合酶链式反应（real time-polymerase chain reaction,RT-PCR）检测雌性生殖细胞特异性基因（GDF9、DAZL、SCP3）表达情况。 结果诱导组（添加有5%卵泡液的培养基）在培养第10天出现卵母细胞样细胞（OLCs）,随着时间延长,OLCs体积增大,周围见透明带样环变,随后减小,部分消失;对照组无上述现象。诱导组DAZL及GDF9的mRNA表达水平较对照组升高（P<0.05）,并且具有两个高峰;诱导组SCP3mRNA表达水平与对照组之间的差异无统计学意义（P>0.05）。诱导组有E ₂ 生成,其水平随时间先下降后升高再下降;对照组无E ₂ 生成。结论在体外,hAECs具有向卵泡样结构转分化的潜能。     

炎症与鞍区肿瘤的研究进展

鞍区包含脑垂体这一具有内分泌功能的特殊结构,鞍区肿瘤常表现出内分泌系统异常的症状,临床表现多样而复杂,患者生活质量受到严重影响。鞍区肿瘤主要包括垂体腺瘤、颅咽管瘤、生殖细胞瘤、脑膜瘤,炎症与鞍区肿瘤的研究近年来取得一定进展。白细胞介素(IL)6与垂体腺瘤细胞增殖有关,并可促进垂体生长激素瘤和垂体促肾上腺皮质激素腺瘤释放相关激素。颅咽管瘤中同样可见IL-6高表达。核因子κB在垂体腺瘤中表达水平升高。体外实验表明,环加氧酶抑制剂可抑制垂体腺瘤和脑膜瘤的增长。炎性细胞与颅咽管瘤、脑膜瘤、生殖细胞肿瘤的发生和发展相关。有关炎症与颅内生殖细胞肿瘤的研究较少,但与之类似的睾丸生殖细胞肿瘤发生机制的研究表明ILs和炎性细胞起重要作用。未来仍需更多体内试验来进一步探究炎症网络与鞍区肿瘤形成的具体作用模式,从而能研制出针对炎症过程的肿瘤治疗方法。     

儿童颅外恶性生殖细胞肿瘤的临床特点及预后分析

目的:总结儿童颅外恶性生殖细胞肿瘤的临床特点及影响预后的因素。方法:回顾性分析2015年01月至2019年12月我院收治的49例颅外恶性生殖细胞肿瘤的临床资料。结果:共入组49例颅外恶性生殖细胞肿瘤患者,男性29例,女性20例,男女比例1.45∶1;中位发病年龄20月（4~189月）;<4岁42例,4~11岁4例,>11岁3例;原发瘤灶位于性腺者30例（睾丸22例,卵巢8例）,性腺外者19例（纵隔2例,腹腔1例,盆腔4例,阴道4例,骶尾部8例）;I期6例,II期16例,III期14例,IV期13例;低危组6例,中危组24例,高危组19例;病例类型:卵黄囊瘤31例,恶性畸胎瘤12例,混合型恶性生殖细胞肿瘤6例。所有患儿均行手术、化学治疗,部分患者行放疗。中位随访时间49月,经治疗全组CR 44例,PR 1例,复发或进展4例,其中死亡2例。2年总生存率（OS）和无事件生存率（EFS）分别为（98.0±2.0）%和（93.9±3.4）%。5年OS和EFS为（95.6±3.1）%和（91.7±4.0）%。结论:以铂类为主的化疗对于儿童颅外恶性生殖细胞肿瘤治疗效果肯定,初诊患者AFP≥10 000 ng/mL及年龄>11岁与预后不良相关,复发/难治患者可行常规二线化疗、大剂量化疗、自体干细胞移植、放疗等综合治疗。     

卵巢恶性混合性生殖细胞肿瘤误诊1例报道

正1病例简介患者,女,27岁,未婚,有性生活史。因"停经74天,阴道不规则出血14天,下腹痛5天"于2015年5月21日就诊于我院。患者既往月经规律,周期30~33天,经期5天,LMP2014年3月8日。半月前患者无诱因出现少量阴道出血,色暗红,无腹痛、肛门坠胀等不适,尿妊娠试验阳性,未予处理。5天前患者出现下腹隐痛,无头晕、心慌、肛门坠胀感。B超     

长链非编码RNA与精子发生

长链非编码RNA(long non-coding RNAs,lncRNAs)是一类长度超过200个核苷酸的不编码蛋白的RNA分子。近年来的研究发现,lncRNAs在转录水平、转录后水平以及表观遗传水平广泛参与调控基因表达以及染色质重塑等。简述lnc RNAs的分类与3种主要的作用机制(诱导、引导和支架),总结近年来通过二代测序技术以及基因芯片技术鉴定到的在精子发生过程中表达的lncRNAs,重点介绍Mrhl、Tsx、Hongr ES2、Dmr、Tbca16、NLC1-C等lncRNAs在生殖细胞增殖、分化、成熟过程中的功能及作用机制,并对lncRNA的功能研究策略作出展望。